不同產(chǎn)地魚腥草多糖含量測定

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1、不同產(chǎn)地魚腥草多糖含量測定【摘要】　　目的測定不同產(chǎn)地魚腥草多糖的含量。方法用苯酚－硫酸法測定魚腥草中多糖的含量。結(jié)果不同產(chǎn)地的魚腥草中多糖含量為：15.73%～20.29%。結(jié)論不同產(chǎn)地魚腥草多糖的含量有一定的差異?！娟P(guān)鍵詞】魚腥草多糖含量測定不同產(chǎn)地　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentofpolysaccharidesinHouttuyniacordatafromvariouscultivationlocations.MethodsTheconten

2、tsofpolysaccharideeasuredbyphenol-H2SO4colorimetry.ResultsThecontentsofpolysaccharidesinHouttuyniacordatafromvariouscultivationlocationsvariedfrom15.73%～20.29%.ConclusionThereisgreatdifferenceinpolysaccharidecontentinHouttuyniacordatafromvariouscultiva

3、tionlocations.　　Keyination;VariousCultivationLocations　　鮮魚腥草為三白草科Saururaceae蕺菜屬植物蕺菜HouttuyniacordataThunb.的新鮮全草〔1〕，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效。主要用于肺膿瘍、痰熱咳嗽、熱痢熱淋、癰瘡腫毒〔2〕等證。本課題組曾對鮮魚腥草GC-MS、HPLC-MS指紋圖譜、黃酮類、酚類化合物的化學(xué)研究方面進(jìn)行報道〔3～6〕。藥理研究發(fā)現(xiàn)魚腥草水溶性多糖對羥自由基和超氧自由基有較明顯的清除作用〔

4、7〕。本課題對不同產(chǎn)地魚腥草進(jìn)行多糖含量測定，為魚腥草資源的開發(fā)提供理論依據(jù)?！　?器材　　1.1儀器　　UV-7501型紫外可見光光度計(無錫科達(dá)儀器廠)，電熱恒溫水浴鍋(上海儀表集團(tuán)供銷公司)，醫(yī)用離心機(jī)（LD5-10型，北京醫(yī)用離心機(jī)廠），電子天平（BS210S，madebystartorius）　　1.2試藥葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品Sigma公司產(chǎn)品；苯酚、硫酸、丙酮、乙醚、三氯乙酸、氫氧化鈉試劑均為分析純，醫(yī)用乙醇（廣州市新升華玻有限公司），苯酚試液參照文獻(xiàn)〔8〕配制。　　魚腥草購于廣州清平市場，經(jīng)廣

5、東藥學(xué)院中藥學(xué)院生藥教研室陳幼竹博士鑒定為三白草科蕺菜屬植物HouttuyniacordataThunb.?！　?方法與結(jié)果　　2.1魚腥草多糖的提取與精制　　取魚腥草干品200g，以95%乙醇回流脫脂3次，藥渣置通風(fēng)處晾干，加水10倍量、8倍量、8倍量，于90～100℃依次提取3，2，1h，過濾，合并濾液，濃縮至約200ml，用95％乙醇調(diào)至含醇量為80%，靜置過夜，離心，沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，得粗多糖。取粗多糖加水溶解至100ml，加入等體積30%三氯乙酸溶液脫蛋白，4℃靜置，離心

6、，上清液用0.01mol/L的氫氧化鈉調(diào)pH＝7，溶液減壓濃縮，將濃縮液裝入透析袋置水中透析，透析液減壓濃縮至100ml，加入95%乙醇調(diào)含醇量為80%，靜置，離心，沉淀用無水乙醇、丙酮、無水乙醚依次洗滌，真空干燥，得除蛋白精制魚腥草多糖?！　?.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液與供試品溶液的制備　　2.2.1標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.0964g，加水溶解并定容至100ml，再取1ml，定容至10ml的容量瓶中，即制得濃度為0.0964mg/ml的葡萄糖對照品貯備液?！　?.2.2供試品溶液

7、的制備取60℃干燥1h的魚腥草約10g，精密稱定，用95%乙醇100，80，80ml依次回流脫脂3，2，2h，藥渣用95%乙醇洗滌數(shù)次，藥渣置通風(fēng)處自然晾干后置燒瓶中，加水100ml，精密稱定，水?。?0～100℃）溫提4h。再精密稱定，補(bǔ)足水至原重，振搖，趁熱紗布過濾，離心除去沉淀，得上清液。精密量取上清液5ml，放入透析袋中流水透析24h，透析內(nèi)液定容至25ml，再精密量取5ml，定容至50ml，得供試液，冰箱中放置備用。　　2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備　　精密量葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1，0.2，0.3，

8、0.4，0.5，0.6，0.7ml，分別置10ml具塞試管中，加蒸餾水補(bǔ)充至1.0ml，搖勻，加5%苯酚溶液1ml，濃硫酸5ml，室溫放置40min。另取1ml蒸餾水，加同量苯酚和濃硫酸，同法操作，作為空白對照。置7501型分光光度計中，于490nm測定吸收度，以吸收度（Y）對葡萄糖含量（X）進(jìn)行回歸，得回歸方程：Y=9.1073X+0.0102，相關(guān)系數(shù)r2=0.9998。結(jié)果表明葡萄糖在0.0193～0.0964mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?！　?.4換算因素