唐古特大黃水提取物對大鼠離體胸主動脈的舒張作用及機制

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1、唐古特大黃水提取物對大鼠離體胸主動脈的舒張作用及機黑龍江省哈爾濱市香坊區(qū)成高子鎮(zhèn)屮心衛(wèi)生院150039摘要：目的研究分析唐古特人黃水提取物的舒血管作用及其機制。方法采用大鼠離體主動脈環(huán)灌流模型，觀察唐古特大黃水提取物對苯腎上腺素預(yù)收縮內(nèi)皮完整的血管環(huán)和去A皮血管環(huán)的舒張作用。應(yīng)用一氧化氮合成酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯和鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍研究唐古特大黃水提取物舒張血管作用的影響。結(jié)果唐古特大黃水提取物對離體大鼠胸主動脈環(huán)具有非內(nèi)皮依賴性的舒張作用，分別用一氧化氮合成酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯和鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍預(yù)處理對唐古特大黃水提取物舒張作用沒有明顯影響。在無鈣緩沖液屮，唐

2、古特大黃水提取物對血管收縮有抑制作用。結(jié)論唐古特大黃水提取物對離體大鼠胸主動脈環(huán)的舒張作用具有非內(nèi)皮依賴性，其機制與抑制血管平滑肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)儲存鈣的釋放有關(guān)。關(guān)鍵詞：唐古特大黃；主動脈，胸；血管舒張大黃是蓼科多年生宿根草本植物，我國主要分布于青海、甘肅等西北地區(qū)和四川、云南等西南地區(qū)［1］。2010年版《屮國藥典》收載的人黃有3種即唐古特大黃(RheumTanguticumMaxim)、掌葉大黃(RheumpalmatumLinne)和藥用大黃(RheumofficinaleBall),其主要有效成分有大黃素、人黃酸、火黃酌、大黃素甲醚、蘆薈大黃素等。大黃味苦寒，具有瀉K通便、主下淤血

3、、清熱解毒、調(diào)屮和食、破瘀通經(jīng)等功效，其藥理作用主要有調(diào)節(jié)胃腸功能、抗心律失常、抗心肌缺血、降低血脂、降低血壓、抗病原微生物、抗腫痛、保護心腦血管、保肝及抗衰老等作用［2,3,4】。另有報道大黃素和大黃酚能舒張由腎上腺素和組胺誘導(dǎo)的豚鼠胸主動脈；番瀉甙A和小劑量大黃素舒張兔主動脈；沒食子酸(GA)通過抑制內(nèi)皮NO生成舒張血管，但對于唐古特人黃對離體血管舒張作用及機制，目前尚未見報道。本實驗采用人鼠離體胸主動脈環(huán)灌流模型，探討了唐古特大黃水提取物對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用及其作用機制。1材料準(zhǔn)確稱取唐古特大黃100g,加入蒸餾水1L,在80'C溫度煮沸3h,過濾減壓濃縮干燥而得10.

4、57g粉末。苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、乙酰膽堿(acetylcholine,Ach)、左旋硝基精氨酸甲酉旨(Nω-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)和亞甲藍(methyleneblue,MB)均為美國Sigma公司產(chǎn)品(SigmaChemicalCo.,St.Louis,MO,USA)。其余試劑為市售分析純。本實驗用Sprague-Dawley大鼠，雄性，體重250-300g，由延邊大學(xué)實驗動物科提供。生理性營養(yǎng)液成分(Kreb’s營養(yǎng)液)(mmol.L-1)為NaCI115.0、KCI4.7、CaCI2

5、2.5、MgCI21.2、NaHCO325.0、KH2PO41.2和葡萄糖10.0組成。pH值為7.4。SQG-4型四腔器官浴槽系統(tǒng)、HSS-1(B)型恒溫浴槽及RM6240BD型多道生理信號采集處理系統(tǒng)均為成都儀器廠產(chǎn)品。2方法與結(jié)果2.1大鼠離體胸主動脈環(huán)的制作腹腔注射給予大鼠3%戊巴比妥鈉50mg.kg-l麻醉人鼠后，打開胸腔，分離胸主動脈。將取下的胸主動脈放入4"C的Kreb’s營養(yǎng)液中，小心去除血管周圍的脂肪及結(jié)締組織，把動脈剪成4mm寬的血管環(huán)，避免過度牽拉，以防損傷內(nèi)皮。根據(jù)實驗需要，去除血管內(nèi)皮時，使用小鑷子輕輕地磨檫血管環(huán)內(nèi)表面以去除內(nèi)皮細胞。將血管環(huán)懸掛

6、于經(jīng)37°C預(yù)熱容量為20mLKreb’s營養(yǎng)液的浴槽內(nèi)，一端固定，另一端通過張力換能器連接RM6240BD型多道生理信號采集處理系統(tǒng)。在持續(xù)通以95%02和5%CO2混合氣體，將靜息張力逐漸調(diào)節(jié)至2.0g。在37°C下穩(wěn)定lh,期間每15min換液1次。檢驗血管內(nèi)皮活性:待動脈環(huán)穩(wěn)定后，換液1次，浴槽中加入PE1.0μmol.L-l,收縮達峰值15min后，力口入Ach1.0μmol.L-l,若加Ach后使PE預(yù)收縮的血管舒張60?90%，可認為內(nèi)皮完整；反之，則認為內(nèi)皮去除。2.2統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差(X±s)表示，

7、并采用t檢驗、ANOVA法進行統(tǒng)計學(xué)分析。2.3桂枝醇提取物對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用取雄性大鼠40只，隨機分為5個組，即對照組、內(nèi)皮完整唐古特大黃水提取物大、小劑量組和去內(nèi)皮唐古特大黃水提取物大、小劑量組，每組各為8只。剖取各組大鼠胸主動脈環(huán)，加入1.0&mU;mol.L-l苯腎上腺素，待血管環(huán)收縮穩(wěn)定后，分別向唐古特大黃水提取物大、小劑量組浴槽內(nèi)累計加入0.5，，2.0mg/ml唐古特大黃水提取物，向?qū)φ战M內(nèi)加入20mLKreb&rsq