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《實驗5高效液相色譜分析hbiw產(chǎn)品純度》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、高效液相色譜分析HBIW產(chǎn)品純度一、實驗?zāi)康?.理解高效液相色譜原理;2.了解島效液相色譜站工作原理;3.掌握HBIW的純度分析方法。二、實驗原理高效液相色譜(highperformanceliquidchromatography,HPLC)是20世紀60年代末,在經(jīng)典也想色譜和氣象色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種具有商靈敏度、島選擇性的島效快速分離分析技術(shù)。與經(jīng)典液相色譜相比較,HPLC采用微球填料(5-10um),使用了高壓輸液泵,所以傳質(zhì)快、柱效高(可達20000-80000塔板/米),能分離多組分復(fù)雜混合物或性質(zhì)及相近
2、的同分異構(gòu)體,并可實現(xiàn)快速分離。高效液相色譜還可以稱為高壓液相色譜(highpressureliquidchromatography),高速液相色譜(highspeedliquidchromatography)、髙分力度液相色譜(highresolutionliquidchromatography)或現(xiàn)代液相色譜(modernliquidchromatographyHPLC法原理:一固液色譜法為例。固定相是固相吸附劑,它們是一些多孔性的極性微粒物,如硅膠、氧化鋁等。它們的表面存在著分散的吸附中心,溶質(zhì)分子流動相分子在吸附
3、劑表面呈現(xiàn)的吸附活性中心上進行競爭吸附,這種作用還存在于不同榮哲分子間,以及同一溶質(zhì)分子中不同官能M之間。巾于這些競爭作用,便形成不同洛質(zhì)在吸附劑表而的吸附、解吸平衡,這就是液相色譜具有選擇性分離能力的基礎(chǔ)。本實驗所采用的HPLC就是液相色譜。HPLC色譜儀簡介:高效液相色譜儀分為分析型和制備型,雖然它們的性能各異,應(yīng)用范圍不同,但其基本組件類似。主要部件如下:儲液罐、高壓輸液泵、進樣裝置、色譜柱、檢測器數(shù)據(jù)處理裝置等。HPLC法的特點:商效液相色譜采用液體流動相,流動相也影響分離過程,這對分離的控制和改善提供了額外的因
4、素,它能分析氣象色譜不能分析的髙沸點有機物、高分子和熱穩(wěn)定性差的化合物以及具有生物活性的物質(zhì)。在全部有機化合物中,僅有20%的樣品可用氣相色譜分析,其它80%的樣品可用高效液相色譜分析。HPLC易于對樣品定量回收,這對任何規(guī)模的植被突然別有利。在很多情況下,IIPLC不僅是作為分析方法,更多的是作為一種分離手段,用以提純和制備具有足夠純度的單一物質(zhì)。HPLC譜有多種定量分析方法,如:峰面積(高峰)百分比法;校正歸一化法;外標法和內(nèi)標法。HBTW純度分子方法:本實驗采用反相液相色譜法,它是以極性物質(zhì)做流動相,非極性物質(zhì)作固
5、定相的一種色譜方法。反相液相色譜分析中常用的流動相宥甲醇、乙腈、四氫呋喃和水。本實驗采用四氫呋喃/水為流動相。三、實驗步驟實馬僉材$斗:純凈水(用前須過濾);甲醇(分析純,用前須過濾);四氫呋喃(分析純,用前須過濾);HBIW(自制)。儀器設(shè)備:高效液相色譜;色譜柱:填料SinoChromODS-BP,不銹鋼柱(M.6鵬X高效液相色譜分析HBIW產(chǎn)品純度一、實驗?zāi)康?.理解高效液相色譜原理;2.了解島效液相色譜站工作原理;3.掌握HBIW的純度分析方法。二、實驗原理高效液相色譜(highperformanceliquid
6、chromatography,HPLC)是20世紀60年代末,在經(jīng)典也想色譜和氣象色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種具有商靈敏度、島選擇性的島效快速分離分析技術(shù)。與經(jīng)典液相色譜相比較,HPLC采用微球填料(5-10um),使用了高壓輸液泵,所以傳質(zhì)快、柱效高(可達20000-80000塔板/米),能分離多組分復(fù)雜混合物或性質(zhì)及相近的同分異構(gòu)體,并可實現(xiàn)快速分離。高效液相色譜還可以稱為高壓液相色譜(highpressureliquidchromatography),高速液相色譜(highspeedliquidchromatogra
7、phy)、髙分力度液相色譜(highresolutionliquidchromatography)或現(xiàn)代液相色譜(modernliquidchromatographyHPLC法原理:一固液色譜法為例。固定相是固相吸附劑,它們是一些多孔性的極性微粒物,如硅膠、氧化鋁等。它們的表面存在著分散的吸附中心,溶質(zhì)分子流動相分子在吸附劑表面呈現(xiàn)的吸附活性中心上進行競爭吸附,這種作用還存在于不同榮哲分子間,以及同一溶質(zhì)分子中不同官能M之間。巾于這些競爭作用,便形成不同洛質(zhì)在吸附劑表而的吸附、解吸平衡,這就是液相色譜具有選擇性分離能力的
8、基礎(chǔ)。本實驗所采用的HPLC就是液相色譜。HPLC色譜儀簡介:高效液相色譜儀分為分析型和制備型,雖然它們的性能各異,應(yīng)用范圍不同,但其基本組件類似。主要部件如下:儲液罐、高壓輸液泵、進樣裝置、色譜柱、檢測器數(shù)據(jù)處理裝置等。HPLC法的特點:商效液相色譜采用液體流動相,流動相也影響分離過程,這對分離的控制和改善提供了額