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《乙醛刺激對大鼠肝星狀細胞wnt信號通路的影響及其意義》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、乙醛刺激對大鼠肝星狀細胞wnt信號通路的影響及其意義楊斌邛崍醫(yī)療中心醫(yī)院內三科，四川成都611530摘要：目的通過觀察乙醛刺激的肝星狀細胞生長速度的變化以及細胞中Wnt信號通路中主要下游分子及目的基因mRNA表達的改變，探討乙醛刺激對肝星狀細胞活化的作用機制。方法用乙醛刺激大鼠肝星狀細胞，與同時正常培養(yǎng)的大鼠肝星狀細胞為對照［1］。由MTT法繪制細胞生長曲線并對比。同時釆用RT-PCR從mRNA水平觀察Wnt信號通路相關指標的變化。結果從細胞生長曲線的對比可以清晰發(fā)現(xiàn)：大鼠肝星狀細胞在乙醛刺激后的生長和增殖速度明顯高于正常細胞組。
2、在乙酸刺激的大鼠肝星狀細胞中，Wnt信號通路中β-catenin(β—鏈蛋白)的mRNA表達增強［2］。結論乙醛通過對大鼠肝星狀細胞中Wnt信號通路的活化刺激大鼠肝星狀細胞的增殖。關鍵詞乙醛；肝星狀細胞；Wnt信號通路。Abstract：ObjectiveWeexploredtheinfluenceofacetaldehydetorathepaticstellatecellsbyobservetheproliferationinrathepaticstellatecellsandthediversityofdo
3、wnstreammolecules’mRNAexpressioninwntsignalingpathway.Methodswepretreattherathepaticstellatecellwithacetaldehyde，usingnormalrathepaticstellatecellascontrol.DrawnthecellgrowthcurveusingthemethodMTT，meanwhileRT-PCRmethodswereusedinthestudyofdownstreammolecules&rsq
4、uo;mRNAexpressioninwntsignalingpathway.ResultsFromthecontrastofthecellgrowthcurve，wefoundclearlythatgrowthandproliferationrateofrathepaticstellatecellsstimulatedbyacetaldehydeisfasterthannormalrathepaticstellatecellascontrol..Wealsofoundthatβ-catenin(β-caten
5、in)geneexpressionareenhancedinrathepaticstellatecellstimulatedbyacetaldehyde.ConclusionTheacetaldehydecanenhancetherathepaticstellatecell’sproliferationthroughstimulatingthewntsignalingpathwayincell.KeyWords：hepaticstellatecells；WntSignalingpathway；salidroside肝星
6、狀細胞的活化是肝纖維化的核心環(huán)節(jié)，是臨床肝纖維化的基礎。長期大量飲酒是肝纖維化其至肝硬化的重要病因，探討乙醇的體內主要分解產物乙醛對肝細胞的刺激作用對臨床上找到治療灑精性肝纖維化的有效方法有重要意義。近年研宄發(fā)現(xiàn)Wnt信號通路與肝星狀細胞（HSC）活化及肝纖維化發(fā)生相關［3］。當Wnt經典通路活化吋，Wnt與受體蛋白Frizzled結合并使未磯酸化的β-catenin在胞質中積累并轉運到核中，從而激活轉錄因子，進-步激活細胞周期蛋白Cyclin-D基因等開始進行轉錄，刺激細胞增殖、永生化，去分化和轉化等［4,5］。本實驗
7、運用RT-PCR的方法，在RNA水平上，對經乙醛刺激的人鼠肝星狀細胞中經典Wnt信號通路的代表分子β-catenin進行檢測和比對。進一?步探討乙醛對大鼠肝星狀細胞活化的影響。1、材料和方法1.1實驗材料大鼠HSC-T6細胞株，DMEMF-121：1培養(yǎng)基、小牛血清購自HyClone（Thermo）,40%乙醛購自成都市科龍化工試劑廠，RT-PCR試劑盒購至Takan公司，β-catenin弟克隆抗體購自SantaCruze公司。1.2實驗方法1.2.1細胞的復蘇和培養(yǎng)將大鼠HSC-T6細胞復蘇。用DMEMF-
8、121:1完全培養(yǎng)基（20%小牛血清）培養(yǎng)，待細胞覆蓋90%瓶底吋，分瓶傳代，用25ml培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)細胞，備實驗使用。1.2.2實驗分組大鼠HSC-T6細胞傳代24小吋后供實驗，分為二組，為正常組、乙醛處理組。每組四瓶細胞。正常組用DMEMF-1
