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《乙醛刺激對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞wnt信號(hào)通路的影響及其意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、乙醛刺激對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞wnt信號(hào)通路的影響及其意義楊斌邛崍醫(yī)療中心醫(yī)院內(nèi)三科，四川成都611530摘要：目的通過觀察乙醛刺激的肝星狀細(xì)胞生長速度的變化以及細(xì)胞中Wnt信號(hào)通路中主要下游分子及目的基因mRNA表達(dá)的改變，探討乙醛刺激對(duì)肝星狀細(xì)胞活化的作用機(jī)制。方法用乙醛刺激大鼠肝星狀細(xì)胞，與同時(shí)正常培養(yǎng)的大鼠肝星狀細(xì)胞為對(duì)照［1］。由MTT法繪制細(xì)胞生長曲線并對(duì)比。同時(shí)釆用RT-PCR從mRNA水平觀察Wnt信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)的變化。結(jié)果從細(xì)胞生長曲線的對(duì)比可以清晰發(fā)現(xiàn)：大鼠肝星狀細(xì)胞在乙醛刺激后的生長和增殖速度明顯高于正常細(xì)胞組。
2、在乙酸刺激的大鼠肝星狀細(xì)胞中，Wnt信號(hào)通路中β-catenin(β—鏈蛋白)的mRNA表達(dá)增強(qiáng)［2］。結(jié)論乙醛通過對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞中Wnt信號(hào)通路的活化刺激大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖。關(guān)鍵詞乙醛；肝星狀細(xì)胞；Wnt信號(hào)通路。Abstract：ObjectiveWeexploredtheinfluenceofacetaldehydetorathepaticstellatecellsbyobservetheproliferationinrathepaticstellatecellsandthediversityofdo
3、wnstreammolecules’mRNAexpressioninwntsignalingpathway.Methodswepretreattherathepaticstellatecellwithacetaldehyde，usingnormalrathepaticstellatecellascontrol.DrawnthecellgrowthcurveusingthemethodMTT，meanwhileRT-PCRmethodswereusedinthestudyofdownstreammolecules&rsq
4、uo;mRNAexpressioninwntsignalingpathway.ResultsFromthecontrastofthecellgrowthcurve，wefoundclearlythatgrowthandproliferationrateofrathepaticstellatecellsstimulatedbyacetaldehydeisfasterthannormalrathepaticstellatecellascontrol..Wealsofoundthatβ-catenin(β-caten
5、in)geneexpressionareenhancedinrathepaticstellatecellstimulatedbyacetaldehyde.ConclusionTheacetaldehydecanenhancetherathepaticstellatecell’sproliferationthroughstimulatingthewntsignalingpathwayincell.KeyWords：hepaticstellatecells；WntSignalingpathway；salidroside肝星
6、狀細(xì)胞的活化是肝纖維化的核心環(huán)節(jié)，是臨床肝纖維化的基礎(chǔ)。長期大量飲酒是肝纖維化其至肝硬化的重要病因，探討乙醇的體內(nèi)主要分解產(chǎn)物乙醛對(duì)肝細(xì)胞的刺激作用對(duì)臨床上找到治療灑精性肝纖維化的有效方法有重要意義。近年研宄發(fā)現(xiàn)Wnt信號(hào)通路與肝星狀細(xì)胞（HSC）活化及肝纖維化發(fā)生相關(guān)［3］。當(dāng)Wnt經(jīng)典通路活化吋，Wnt與受體蛋白Frizzled結(jié)合并使未磯酸化的β-catenin在胞質(zhì)中積累并轉(zhuǎn)運(yùn)到核中，從而激活轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)-步激活細(xì)胞周期蛋白Cyclin-D基因等開始進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，刺激細(xì)胞增殖、永生化，去分化和轉(zhuǎn)化等［4,5］。本實(shí)驗(yàn)
7、運(yùn)用RT-PCR的方法，在RNA水平上，對(duì)經(jīng)乙醛刺激的人鼠肝星狀細(xì)胞中經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的代表分子β-catenin進(jìn)行檢測(cè)和比對(duì)。進(jìn)一?步探討乙醛對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞活化的影響。1、材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料大鼠HSC-T6細(xì)胞株，DMEMF-121：1培養(yǎng)基、小牛血清購自HyClone（Thermo）,40%乙醛購自成都市科龍化工試劑廠，RT-PCR試劑盒購至Takan公司，β-catenin弟克隆抗體購自SantaCruze公司。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1細(xì)胞的復(fù)蘇和培養(yǎng)將大鼠HSC-T6細(xì)胞復(fù)蘇。用DMEMF-
8、121:1完全培養(yǎng)基（20%小牛血清）培養(yǎng)，待細(xì)胞覆蓋90%瓶底吋，分瓶傳代，用25ml培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞，備實(shí)驗(yàn)使用。1.2.2實(shí)驗(yàn)分組大鼠HSC-T6細(xì)胞傳代24小吋后供實(shí)驗(yàn)，分為二組，為正常組、乙醛處理組。每組四瓶細(xì)胞。正常組用DMEMF-1
