熊果酸對肝星狀細胞Hedgehog信號通路的影響

《熊果酸對肝星狀細胞Hedgehog信號通路的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的桫t：究成果，也不包含為獲得南昌大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名(手寫)：降豁簽字日期：力肛年，二月彳日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允

2、許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數據庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數據庫》中全文發(fā)表，并通過網絡向社會公眾提供信息服務。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名(手寫)：靜硌導師簽名(手寫)：簽字日期：力肛年，2月歹鄉(xiāng)日簽字日期：o口雎年，三月彩日摘要背景：各種原因導致慢性肝損傷可造成肝臟纖

3、維化，甚至發(fā)展成為肝硬化。靜止型肝星狀細胞(Quiescenthepaticstellatecells，Q．HSCs)的活化、增殖并轉化為肌纖維細胞樣肝星狀細胞(Muscleimofibroushepaticstellatecells，MF．HSCs)是肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展的中心事件。Hedgehog(Hh)信號通路在肝臟損傷修復過程中發(fā)揮著重要作用，特別是介導MF．HSCs的活化、增殖。有文獻表明，在HSCs活化、增殖過程中，Hh信號通路組成分子Hh配體[Sonichedgehog(sty)，Deserthedgeh

4、og(Dhh)，Indianhedgehog(Ihh)]、受體蛋白Patched(Ptch)、跨膜蛋白Smoothened(Smo)及鋅指轉錄因子(Glioblastomal／2，Glil／2)表達是上調的，而Hh配體相互作用蛋白(Hhinteractingprotein，Hhip)表達下調。新近研究發(fā)現NOX參與對Hh信號通路的調控，NOX亞基Racl能激活Hh信號通路，促進Q．HSC向MF．HSCs轉化。而我們前期研究發(fā)現熊果酸能顯著抑制瘦素誘導的NOX亞基p22Phox和RaclmRNA的表達。本研究將基于前期的

5、研究結果，進一步觀察熊果酸對瘦素誘導的Hh信號通路的影響。目的：探索熊果酸對大鼠肝星狀細胞(HSC．T6)Hh信號通路的影響及機制。方法：將處于對數生長期的HSC．T6細胞分為6組：正常對照組；瘦素組(100ng／m1)；熊果酸(50／aM)；DPI組(20“M)；熊果酸干預組(瘦素+熊果酸50I，tM)；DPI干預組(瘦素+DPl20LtM)。在藥物作用12h后，提取總RNA，采用RT-PCR法檢測Shh、smo、Glil／2的表達；藥物作用HSC．T6細胞24小時后，提取總蛋白，采用Westernblotting分

6、別檢測Racl和Gli2的表達；藥物作用12h、24h及48h后，采用MTT法檢測HSC．T6細胞的增殖情況。結果：1．熊果酸對HSC．T6細胞ShhmRNA表達的影響瘦素刺激HSC—T6細胞12h后ShhmRNA表達較正常對照組升高，但差異無統(tǒng)計學意見(P>0．05)；熊果酸干預后ShhmRNA表達明顯低于瘦素組及正常對照組(均P<0．05)；DPI干預組ShhmRNA表達明顯低于瘦素組及正常對照組摘要(均P<0．0t)。上述結果表明熊果酸、DPI均能下調瘦素介導的HSC．T6細胞ShhmRNA的表達，而且DPI的抑

7、制作用強于熊果酸。2．熊果酸對HSC—T6細胞SmomRNA表達的影響瘦素刺激HSC．T6細胞12h后SmomRNA表達較正常對照組升高(P<0．05)；熊果酸干預后SmomRNA表達明顯低于瘦素組及正常對照組(P

8、SC．T6細胞GlilmRNA的表達無影響，而熊果酸及DPI干預也不影響HSC．T6細胞GlilmRNA的表達。4．熊果酸對HSC．T6細胞Gli2mRNA表達的影響瘦素刺激HSC．T6細胞12h后Gli2mRNA表達較『F常對照組升高，但差異無統(tǒng)計學意見(P>O．05)；熊果酸、DPI干預后Gli2mRNA表達均明顯低于瘦素組(