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《熊果酸對(duì)原代肝星狀細(xì)胞活化過(guò)程中nox-hedgehog信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406520512375南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文熊果酸對(duì)原代肝星狀細(xì)胞活化過(guò)程中NOX-Hedgehog信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的影響EffectsofursolicacidontheNOX-HhsignalpathwayinducedbyTGF-βduringtheactivationofQ-HSC陳標(biāo)培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：朱萱教授申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門(mén)類(lèi)：醫(yī)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱：內(nèi)科學(xué)（消化）論文答辯日期：2015年6月答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2015年6月I一、
2、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫(xiě)）：簽字日期：年月日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電
3、子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)北京萬(wàn)方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊（光盤(pán)版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫(xiě)）：導(dǎo)師簽名（手寫(xiě)）：簽字日期：年月日簽字日期：年月日論文題目姓名學(xué)號(hào)論文級(jí)別博士□碩士□院/系/所專(zhuān)業(yè)E_m
4、ail備注：□公開(kāi)□保密（向校學(xué)位辦申請(qǐng)獲批準(zhǔn)為“保密”，年月后公開(kāi)）I摘要摘要背景：肝纖維化是由多種病因所引起的慢性肝臟疾病的共同病理過(guò)程，其主要特征為細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix,ECM）增生與降解失衡，導(dǎo)致肝臟內(nèi)ECM過(guò)度沉積。活化的肝星狀細(xì)胞（hepaticstellatecells,HSCs）是ECM產(chǎn)生的主要細(xì)胞來(lái)源，因此，原代肝星狀細(xì)胞（Quiescenthepaticstellatecells,Q-HSCs）的激活、增殖并轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞樣肝星狀細(xì)胞（myofibrob
5、lastichepaticstellatecells,MF-HSCs）在肝纖維化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用。Hedgehog（Hh）信號(hào)通路在肝臟胚胎發(fā)育以及成熟肝臟的損傷修復(fù)過(guò)程發(fā)揮著重要的作用。越來(lái)越多研究表明，Hh信號(hào)通路的持續(xù)激活促進(jìn)Q-HSC轉(zhuǎn)化為MF-HSC，進(jìn)而促進(jìn)肝纖維化發(fā)展。NADPH氧化酶（NADPHoxidase，NOX）參與介導(dǎo)一系列促纖維化信號(hào)通路，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，NOX亞基Rac1參與了對(duì)Hh信號(hào)通路的調(diào)控，它能激活Hh通路，進(jìn)而促使Q-HSC激活轉(zhuǎn)化為MF-HSC。我們前期研
6、究發(fā)現(xiàn)熊果酸能顯著抑制瘦素誘導(dǎo)的HSC-T6中NOX亞基Rac1蛋白表達(dá)，進(jìn)而抑制Hh信號(hào)通路活性?；谝陨涎芯考扒捌谘芯砍晒狙芯繉⑦M(jìn)一步以原代HSC為研究對(duì)象，觀察Q-HSC轉(zhuǎn)化過(guò)程中NOX對(duì)Hh信號(hào)通路的調(diào)控作用及熊果酸對(duì)該信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的的影響。目的：觀察Q-HSC活化轉(zhuǎn)化過(guò)程中NOX對(duì)Hh信號(hào)通路的調(diào)控作用，明確熊果酸對(duì)NOX-Hh信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的影響及機(jī)制。方法：取分離提取長(zhǎng)至第5天的原代肝星狀細(xì)胞，隨機(jī)分成以下各組：正常對(duì)照組；熊果酸組（40μM）；TGF-β組（5μg/L）；熊果酸干預(yù)組（TGF-β+
7、熊果酸）；DPI干預(yù)組（TGF-β+DPI10μM）。干預(yù)組分別給予熊果酸和DPI（NOX特異性抑制劑）預(yù)處理半小時(shí)之后再加入TGF-β，各組經(jīng)相應(yīng)藥物作用12h后，提取細(xì)胞總RNA，用qRT-PCR法檢測(cè)藥物處理后HSC對(duì)I型膠原和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）mRNA表達(dá)以及Hh信號(hào)通路中Shh、Smo、Gli2和NOX亞基Rac1II摘要的mRNA表達(dá)；藥物作用24小時(shí)后，提取每組HSC總蛋白，采用Westernblotting分別檢測(cè)Rac1、Shh、Smo、Gli2及α-SMA蛋白表達(dá)。結(jié)果：1
8、.熊果酸對(duì)Q-HSC活化過(guò)程中I型膠原mRNA、α-SMAmRNA表達(dá)的影響TGF-β刺激原代HSC12h后，I型膠原和α-SMAmRNA的表達(dá)比空白對(duì)照組明顯增加（P<0.01）；熊果酸自身對(duì)照組I型膠原和α-SMAmRNA表達(dá)明顯低于空白對(duì)照組（P<0.05；P<0.01）；在TGF-β刺激原代HSC之前加入熊果酸進(jìn)行干預(yù)后其I型膠原和α-SMAmRNA水平較TGF-β刺激組顯著降低（P<0.01），并且與N
