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《栽培甘草群體中不同單株甘草酸的含量差異研究 》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、栽培甘草群體中不同單株甘草酸的含量差異研究：牛小宇，劉春生，崔浩然【摘要】目的通過(guò)測(cè)定相同生長(zhǎng)環(huán)境下栽培甘草不同單株甘草酸含量差異，探討其變異機(jī)制，找到高含量變異個(gè)體，為優(yōu)質(zhì)甘草的品種選育提供初步依據(jù)。方法隨機(jī)選取同一地塊相同生長(zhǎng)年限的甘草100株，采用高效液相色譜法測(cè)定了該100株個(gè)體甘草主根的甘草酸含量。按《中國(guó)藥典》對(duì)甘草酸的含量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的2%為界，將數(shù)據(jù)分為高含量甘草酸組及低含量甘草酸組。結(jié)果100株甘草的主根中的甘草酸含量最高的個(gè)體達(dá)到4.941%，最低的為1.201%，RSD為27.77%。高低含量?jī)蓚€(gè)組甘草酸含
2、量差異性顯著(P<0.0001)。結(jié)論隨機(jī)篩選的栽培甘草單株間甘草酸含量存在變異，推測(cè)其為遺傳因素導(dǎo)致。高低含量組甘草酸含量具有顯著性差異，說(shuō)明相同環(huán)境下甘草含量變異很大，則可以在高含量組中選取優(yōu)良單株，以甘草酸為指標(biāo)選育甘草優(yōu)良品種。【關(guān)鍵詞】栽培甘草群體;單株;甘草酸 Abstract：ObjectiveTostudythevariationofglycyrrhizincontentthroughanalyzingdifferentGlycyrrhizauralensisFischrootsfromasingle
3、farmandtoprovidereferenceforselectionofthehighqualityvariety.MethodsHPLCanalysislysampled2-year-oldrootsfromasinglefarmfortheglycyrrhizincontent.AccordingtotheglycyrrhizincontentstandardabidingbythePharmacopeia，the100plantsely，highandloongthe100plants,thehighestval
4、ueongG.uralensisFischrootsamplescollectedfromthesamefarm,icalconstituents. Keyple;Glycyrrhizincontent 甘草是常用大宗藥材，臨床用量大。目前野生甘草資源匱乏，栽培甘草已經(jīng)成為甘草藥材的主流，但是栽培品質(zhì)量不穩(wěn)定，甘草酸含量多達(dá)不到《中國(guó)藥典》規(guī)定的不低于2%的標(biāo)準(zhǔn)[1]，故提高栽培甘草藥材質(zhì)量已成為當(dāng)務(wù)之急?！ 「什菟崾歉什葜饕行С煞种?，是衡量甘草質(zhì)量的重要指標(biāo)，探討其變異機(jī)制對(duì)提高甘草質(zhì)量有重大意義。影響甘草酸含量變
5、異的因素可以歸結(jié)為外在的環(huán)境因素和內(nèi)在的遺傳因素，前人做了大量的工作，發(fā)現(xiàn)在不同的產(chǎn)地、不同的季節(jié)以及不同的生長(zhǎng)條件等環(huán)境因素下，甘草中甘草酸含量存在變異[2]，但是在遺傳因素方面研究較少。本實(shí)驗(yàn)在生長(zhǎng)環(huán)境一致的栽培群體中取材，運(yùn)用高效液相的方法對(duì)生長(zhǎng)年限相同的不同單株進(jìn)行甘草酸含量測(cè)定，闡明相同環(huán)境下不同單株甘草酸含量是否具有差異，探討其變異機(jī)制，為以甘草酸含量為指標(biāo)的甘草優(yōu)良單株系統(tǒng)選育提供依據(jù)?！ ?材料和儀器 隨機(jī)挖取100株北京密云甘草人工種植基地同一地塊的2年生栽培甘草，經(jīng)劉春生鑒定為豆科甘草Glycyrriz
6、auralensisFisch.;截取同樣的根段(主根蘆頭下10cm至尾部)陰干備用。 實(shí)驗(yàn)采用Agilent1100型高效液相色譜儀(配有G1314A紫外檢測(cè)器、1315BDAD檢測(cè)器、G1311A四元梯度泵、G1322A在線脫氣裝置、G1316A柱溫箱);Agilent1100化學(xué)工作站;SartoriusBS110S、BP211D電子分析天平;KL3120D超聲清洗機(jī)?！ 」┖繙y(cè)定用甘草酸銨(編號(hào)：110731)購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;CALEDON色譜純乙腈;分析純甲醇、甲酸、磷酸;市售的娃哈哈純凈水?！ ?
7、方法 2.1色譜條件色譜柱為DIKMADiamonsil-C18分析柱(4.6mm×250mm，5μm)和Daiso-C18分析柱(4.6mm×250mm，5μm，UnimicroTechnologies.Inc.公司);柱溫25℃;流動(dòng)相A為0.1%磷酸水溶液，B為乙腈;梯度程序、流速及檢測(cè)波長(zhǎng)變化見(jiàn)表1。甘草酸色譜峰理論塔板數(shù)為16萬(wàn)。進(jìn)樣10μl。以上方法為建立甘草指紋圖譜所使用的條件，本文主要報(bào)道利用該方法測(cè)定甘草酸的結(jié)果[3]。表1色譜梯度洗脫溶劑和檢測(cè)波長(zhǎng)的時(shí)間程序流動(dòng)相由磷酸(A)，乙腈(B)組成 2.2供
8、試液的制備精稱(chēng)甘草粉末(60℃干燥12h，粉碎過(guò)60目篩)0.1g，于25ml容量瓶中，加入近25ml67%甲醇冷浸24h，超聲30min，放冷到室溫，加提取液至刻度，搖勻后過(guò)0.45μm濾膜，取續(xù)濾液備用?！ ?.3線性關(guān)系考察精密稱(chēng)取對(duì)照品甘草酸銨10.75mg，用甲醇定容于25ml容
