補腎益肺化淤法對大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影響

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1、補腎益肺化淤法對大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影響:梁喜章,曹勇,陳偉軍,譚碧珠【摘要】目的探討補腎益肺化淤法對慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型肺功能的影響。方法采用氣管內注射脂多糖合被動吸煙建立COPD大鼠模型,作血氣分析和肺組織切片行蘇木素-伊紅(HE)染色,觀察補腎益肺化淤法對COPD大鼠肺功能及形態(tài)學的影響。結果模型組出現(xiàn)咳嗽、氣急、喘息等COPD典型癥狀;血氣分析出現(xiàn)低氧血癥、高碳酸血癥;肺組織病理學可見支氣管表現(xiàn)出不同程度的慢性炎性細胞浸潤,肺泡擴大,肺泡壁斷裂,部分肺泡融合形成肺大泡。治療組給予中藥湯劑后,各項

2、指標得到改善,且高劑量組優(yōu)于低劑量組。結論補腎益肺化淤法可以改善COPD大鼠全身及呼吸系統(tǒng)癥狀,緩解肺功能下降?!娟P鍵詞】慢性阻塞性肺病;補腎益肺化淤法;血氣分析;肺組織切片 慢性阻塞性肺病(COPD),在我國每年造成的死亡可達100萬人,致殘人數(shù)高達500萬~1000萬,嚴重危害人們的生命健康及生活質量[1]。我們根據(jù)COPD的臨床特點和中醫(yī)理論,認為肺腎兩虛是本病的主要發(fā)病機制,外邪侵襲是其發(fā)病的外在條件,痰淤互結是其形成的重要病理基礎,于是針對本病擬定了補腎益肺化淤法。本實驗采用氣管內注射脂多糖合被動吸煙法建立大鼠C

3、OPD模型,觀察補腎益肺化淤法對大鼠COPD的作用效果和機制,以期為臨床補腎益肺化淤法治療COPD提供實驗依據(jù)。  1材料  1.1藥物補腎益肺化瘀中藥由補骨脂、菟絲子、黨參、山藥、赤芍、黃芪、葶藶子、法半夏單味中藥免煎顆粒組成,購于暨南大學附屬第一醫(yī)院(深圳三九醫(yī)藥股份有限公司生產),用滅菌溫蒸餾水配成相當于原生藥材濃度的2.7g/ml濃縮液,置4℃冰箱備用?! ?.2動物健康清潔級SD大鼠,體質量(180±20)g,3月齡,雌雄各半,購于中山大學實驗動物中心,合格證號:No.0033311.SCXK(粵):2004-0

4、011,粵監(jiān)證號:2008A010?! ?方法  2.1COPD大鼠模型的建立將大鼠隨機分成模型組,中藥高劑量治療組、低劑量治療組、空白對照組4組,每組8只,雌雄各半。采用氣管內注射脂多糖合被動吸煙方法分別對模型組、中藥高劑量治療組、低劑量治療組大鼠進行造模:①氣管內注射脂多糖:于第1,14天用1%戊巴比妥鈉(50mg/kg)對大鼠進行腹腔注射麻醉,將其仰臥位固定于大鼠固定板,在光線充足的條件下,暴露聲門,以拔除針芯的16號靜脈套管針快速插入氣管,取溶于生理鹽水的脂多糖200μl(1mg/ml)通過靜脈套管針快速注入氣管,

5、然后將大鼠固定板垂直旋轉,使脂多糖液能夠均勻分布于兩肺,再拔出套管針[2];②被動吸煙:將大鼠置于20cm×30cm×40cm熏箱內,隔天給予8支香煙煙熏20min,連續(xù)熏吸1個月,其中第1天和第14天不予熏吸,而進行氣管內注入脂多糖?! ?.2實驗方法造模后,中藥高劑量組按30g/kg(相當于成人常規(guī)臨床用量18倍)給予補腎益肺化瘀中藥灌胃;低劑量組按10g/kg(相當于成人常規(guī)臨床用量6倍)給予補腎益肺化瘀中藥灌胃;空白對照組和模型組,正常喂飼,灌服等容積生理鹽水1次/d,連續(xù)30d。  2.3實驗觀察與指標檢查  2

6、.3.1一般情況觀察每天定時觀察記錄大鼠活動度、精神、皮毛及飲食、呼吸、死亡等情況。  2.3.2血氣分析測定在灌藥治療結束后次日采清晨空腹血。先用100u/ml的肝素濕潤1ml注射器內壁。具體操作如下:將2ml的濃肝素(12500u/ml)全部加到100ml的生理鹽水瓶中混勻,用注射器吸取稀釋的肝素0.2ml,將肝素來回抽動,使針管全部濕潤,然后將多余的肝素全部排出,注射器死腔殘留的肝素即可抗凝。注意濕潤內壁后除殘留于死腔(包括針尖部分)外,應盡排棄出去,排盡空氣。對大鼠進行麻醉,剖開大鼠腹部,找取腹主動脈,隨后用肝素濕

7、潤后的1ml注射器抽大鼠腹主動脈血0.8ml左右,針頭迅速刺入橡皮塞,用手搓動針筒,使血液與肝素混合,放進冰袋迅速送血氣分析儀分析?! ?.3.3病理標本檢查進行完“2.3.2”項步驟后,腹主動脈放血處死大鼠,迅速剪下右肺中下葉,并放入中性福爾馬林中浸泡,石蠟包埋切片,作蘇木素-伊紅(HE)染色,再將制好的切片于光學顯微鏡觀察拍片?! ?.4統(tǒng)計學處理用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,實驗結果±s,q檢驗作統(tǒng)計學分析?! ?結果  3.1一般情況在造模過程中,大鼠出現(xiàn)咳嗽、氣促、喘息、呼吸道分泌物增多,以及體質量下降

8、、毛枯易脫、蜷臥少動、大便干硬等癥狀改變。經中藥治療后,氣喘、咳嗽癥狀不同程度減輕,口鼻分泌物減少??瞻讓φ战M大鼠精神正常,活潑好動,體肥,皮毛光澤無脫落?! ?.2補腎益肺化瘀中藥對COPD大鼠動脈血pH、PaO2、PaCO2的影響結果見表1。中藥高、低劑量組PaO2均顯著高于模型組(P<0.0

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