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《長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠免疫功能的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠免疫功能的影響 InfluenceofLeavesofElaeagnusbockiiDielsonImmunefunctionsofMice Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofleavesofElaeagnusbockiiDielsonimmunefunctionsofmice.MethodsAftermiceountofphocytesreplicationusandspleen,promotedphagocyticfunctionofphagocytesofmice,en
2、hancedreplicationofTlymphocytes.ConclusionLeavesofElaeagnusbockiiDielscanobviouslyincreaseimmunefunctionsofmice. Keymunefunctions 胡頹子科Elaeagnaceae植物，全球共有3屬約80余種，我國(guó)有沙棘屬Hippophae和胡頹子屬Elaeagnus兩屬。沙棘屬我國(guó)只有4種［1］，已經(jīng)得到較好研究、開(kāi)發(fā)和利用，并取得了巨大的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)及社會(huì)效益［2］。胡頹子屬我國(guó)約有51種［1］，全國(guó)各地均產(chǎn)，但長(zhǎng)江流
3、域及以南地區(qū)更普遍，資源極為豐富，但其藥用、食用等作用至今研究較少。本課題組選用生長(zhǎng)于湖北省巴東縣的長(zhǎng)葉胡頹子ElaeagnusbockiiDiels研究其抗腫瘤作用。為探討其抗腫瘤作用及機(jī)理，我們做了長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究?！ ?材料 1.1動(dòng)物昆明種小鼠、雌雄各半，體重18~22g?！ ?.2主要試劑長(zhǎng)葉胡頹子葉采自湖北省巴東縣，四噻唑鹽（MTT），Sigma公司產(chǎn)品。BRMI1640細(xì)胞培養(yǎng)基，GIBCO公司產(chǎn)品。植物血凝素（PHA），Sigma公司產(chǎn)品。二甲基亞砜（DMSO），蘇州化工研究所產(chǎn)品。MK3型酶
4、標(biāo)儀，芬蘭雷勃中國(guó)總部產(chǎn)品。 2方法 2.1受試物及給藥長(zhǎng)葉胡頹子葉常規(guī)水煎2次，用紗布過(guò)濾后混合并濃縮至1g生藥/ml，4℃保存?zhèn)溆谩?shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分成4組，每組10只，正常對(duì)照組用生理鹽水灌胃0.4ml/d，共10d；實(shí)驗(yàn)1，2，3組分別用胡頹子葉水煎液10，20，30g/kg・d-1灌胃，連續(xù)10d后測(cè)定以下指標(biāo)。 2.2巨噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定實(shí)驗(yàn)第10天各組小鼠稱體重，然后每只小鼠腹腔注射5%淀粉肉湯1ml，致敏24h后，腹腔注射1ml，5%雞紅細(xì)胞懸液，4h后脫臼處死小鼠，并在腹腔注入5ml冷Hank液，按摩
5、腹部5min后，解剖小鼠，無(wú)菌吸取腹腔液涂片，晾干，甲醇固定5min，瑞姬氏復(fù)合染色劑染色，鏡檢，在油鏡下觀察，隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)吞噬細(xì)胞中吞噬雞紅細(xì)胞及吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)，并計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬百分率與吞噬指數(shù)?！ ?.3免疫器官臟體比的影響上述處死小鼠，無(wú)菌操作取胸腺，脾臟稱重，分別計(jì)算胸腺指數(shù)、脾指數(shù)。 2.4T細(xì)胞增殖反應(yīng)測(cè)定（MTT法）［3］無(wú)菌取脾臟制備小鼠脾細(xì)胞懸液，用RPMI1640I不完全營(yíng)養(yǎng)液流滌3次，10000r/min離心，然后用完全營(yíng)養(yǎng)液配成3.5×106ml，臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞存活率＞95%；取100ml加入9
6、6孔細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)（每孔含3.5×105ml個(gè)細(xì)胞，每個(gè)樣品做3個(gè)復(fù)孔），加入240mg/L的PHA20ml（使終濃度為40mg/L，同時(shí)設(shè)不加PHA對(duì)照孔），置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后，每孔加入MTT10ml（5g/L），再繼續(xù)培養(yǎng)4h，離心，棄上清，加入30%DMSO100ml充分振蕩后靜置20min，最后用酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)570nm處測(cè)OD值。結(jié)果以3個(gè)復(fù)孔的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。 3結(jié)果 3.1長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠免疫器官臟體比的影響結(jié)果見(jiàn)表1?！ ”?長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠胸腺和脾臟的影響(略) 與對(duì)照組比較,aP＜0.
7、05 3.2長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠吞噬細(xì)胞吞噬功能的影響結(jié)果見(jiàn)表2?！ ”?長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞活性的影響(略) 與對(duì)照組比較,bP＜0.01 3.3長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠T淋細(xì)胞巴增殖的影響結(jié)果見(jiàn)表3?！ ”?長(zhǎng)葉胡頹子葉對(duì)小鼠T細(xì)胞增殖的影響(略) 與對(duì)照組比較,bP＜0.01 4討論 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，長(zhǎng)葉胡頹子葉能增加小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，增強(qiáng)腹腔吞噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，且胡頹子葉對(duì)小鼠免疫功能增強(qiáng)作用的程度與胡頹子葉濃度之間有一定的依存關(guān)系，在一定范圍內(nèi)隨濃度增加而增強(qiáng)（實(shí)驗(yàn)2，3組比實(shí)驗(yàn)1組效果好）
8、，但到了一定劑量后其作用效果就不再繼續(xù)上升（實(shí)驗(yàn)2，3組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞0.05）。巨噬細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)生物學(xué)作用最為活躍的細(xì)胞，具有吞噬、殺傷及消化病原體、殺傷腫瘤細(xì)胞，并在特異性免疫應(yīng)答中參與抗原的提呈及免疫調(diào)節(jié)
