杜仲葉中綠原酸的提取研究

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1、杜仲葉中綠原酸的提取研究劉軍海，任惠蘭，裘愛泳【摘要】　　目的研究以丙酮為溶劑提取杜仲葉綠原酸的最佳工藝條件。方法通過單因素實(shí)驗(yàn)研究各因素對提取率的影響，應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件。結(jié)果丙酮提取杜仲葉綠原酸最佳工藝條件為：丙酮濃度40%，提取溫度65℃，料液比1∶13，提取時間2h，提取兩次。結(jié)論在最佳條件下，綠原酸提取率和得率分別為2.25%，17.15%，純度達(dá)到13.12%?！娟P(guān)鍵詞】綠原酸；提?。欢胖偃~；丙酮　　Abstract：ObjectiveTheextractiontechnologyofchlorogenicacidfromEumiaulmoid

2、esleaftheleavesofEumiaulmoidesents,andthentheoptimizedconditionsfortheextractionofchlorogenicacidizedconditionsperature65℃;materialtosolvent1:13,extractiontime3h,andextractiontizedconditions.　　KeylaUlmoides；Acetone綠原酸是植物體在有氧呼吸過程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物〔1〕。綠原酸是一種具有廣泛生理活性和藥理活性的物質(zhì)，具有利膽、抗菌、降壓

3、、增加白血球及興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)、抗腫瘤、降脂、清除自由基等多種藥理作用，對消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病均有顯著療效〔1～6〕。因此，綠原酸在醫(yī)藥制劑上應(yīng)用越來越廣泛，是目前國際公認(rèn)的“植物黃金”。綠原酸主要存在于杜仲、金銀花、葵花籽粕、元寶楓等植物中〔7，8〕。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉Eumiaulmoidesleaves中含有較高的綠原酸，其葉中含量為1%～5.5%〔9，10〕。杜仲是我國的特殊經(jīng)濟(jì)林，在我國栽培面積相當(dāng)廣泛，全國約有杜仲林28萬ha，每年可產(chǎn)葉400萬噸〔11〕，而杜仲葉的利用率僅占可采集葉的10%～20%。因此利用杜仲葉生產(chǎn)綠原酸具有巨大

4、的社會效益和經(jīng)濟(jì)意義?！　≡谥胁菟幱行С煞痔崛∵^程中，常用乙醇為溶劑。我們在提取杜仲葉綠原酸研究中發(fā)現(xiàn)，乙醇提取雖然得率相對較高，但在提取過程中醇溶性蛋白質(zhì)、黏液、樹脂、鞣質(zhì)、色素、油脂等雜質(zhì)析出量大，過濾較困難，尤其是當(dāng)溶劑中含水量高時更加明顯，同時給以后的分離純化工序造成很大困難。因此有必要尋找更好的提取劑提取。綠原酸屬酚酸類化合物〔12〕，也屬植物多酚類物質(zhì)〔13〕。有資料報(bào)道〔14〕，丙酮和丙酮-水體系對植物多酚具有很強(qiáng)的溶解性，而且用丙酮提取杜仲葉中主要活性成分的工藝未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用丙酮-水體系對杜仲葉中綠原酸提取工藝進(jìn)行研究?！　?器材與方法

5、　　1.1材料與儀器杜仲葉，購于北京某地區(qū)，為初秋采集葉。綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品和生物制品鑒定所）；丙酮、正丁醇、冰乙酸均為分析純（上海試劑公司）；實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。Unic-2100型紫外可見光分光光度計(jì)（上海龍尼柯儀器有限公司）；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；365nm紫外分析儀（上?？扑嚬鈱W(xué)儀器廠）；SHZ-III循環(huán)水多用真空泵（上海亞榮生化儀器廠）?！　?.2方法　　1.2.1杜仲葉中綠原酸含量的測定采用紙層析-紫外分光光度法〔15〕。　　1.2.2提取單因素實(shí)驗(yàn)隨機(jī)稱取5g干燥的杜仲葉粉（20目），置于250ml平底燒瓶中，采用

6、不同的實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)進(jìn)行提取。改變提取條件以確定提取因素變化范圍以及各因素的較佳值。每次提取液過濾，真空蒸發(fā)去除丙酮后，用去離子水定容至100ml，測定綠原酸的含量，并折算為每100g干葉中的提取得率?！　?.2.3正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在提取單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件。以丙酮濃度、浸提溫度、浸提時間、料液比4個因素作為考察對象，每個因素選用3個水平。選用L9（34）表，并安排實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化工藝條件。　　2結(jié)果　　2.1丙酮濃度對提取率的影響　　在提取溫度35℃，料液比1∶12，提取時間2h，丙酮濃度對綠原酸提取率的影響見圖1。由圖1可以看出，當(dāng)濃度低于40%

7、時，隨著丙酮濃度的增加，綠原酸的提取率升高，用40%丙酮的提取，其提取率最高。隨后，綠原酸的提取率隨丙酮的濃度的升高而降低?！　?.2溫度對提取率的影響　　不同提取溫度對綠原酸提取率的影響見圖2。從圖2可以看出，隨著提取溫度的升高，其提取率增加，當(dāng)溫度高于55℃時，不再增加。這是由于溫度升高，分子運(yùn)動加快，有利于分子的擴(kuò)散，有利于活性物質(zhì)的溶出；當(dāng)溫度過高時，丙酮?dú)饣焕诨钚猿煞值奈龀?，而且溫度過高，雜質(zhì)溶出量也相應(yīng)增大，活性成分易分解破壞?！　?.3料液比對提取率的影響　　不同料液比對綠原酸提取率的影響見圖3。隨著溶劑量的增加，浸提效果也隨之增高，但提高幅

8、度減小。當(dāng)料液比超1∶1