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1、杜仲葉中綠原酸的提取研究作者：劉軍海，任惠蘭，裘愛泳【摘要】 目的研究以丙酮為溶劑提取杜仲葉綠原酸的最佳工藝條件。方法通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)研究各因素對(duì)提取率的影響，應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件。結(jié)果丙酮提取杜仲葉綠原酸最佳工藝條件為：丙酮濃度40%，提取溫度65℃，料液比1∶13，提取時(shí)間2h，提取兩次。結(jié)論在最佳條件下，綠原酸提取率和得率分別為2.25%，17.15%，純度達(dá)到13.12%?！娟P(guān)鍵詞】綠原酸；提取；杜仲葉；丙酮 Abstract：ObjectiveTheextractiontechnologyofchlorogenicacidfromEumiaulmoidesl
2、eaftheleavesofEumiaulmoidesents,andthentheoptimizedconditionsfortheextractionofchlorogenicacidizedconditionsperature65℃;materialtosolvent1:13,extractiontime3h,andextractiontizedconditions. KeylaUlmoides；Acetone綠原酸是植物體在有氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物［1］。綠原酸是一種具有廣泛生理活性和藥理活性的物質(zhì)，具有利膽、抗菌、降壓、增加白血球及興奮
3、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、抗腫瘤、降脂、清除自由基等多種藥理作用，對(duì)消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病均有顯著療效［1～6］。因此，綠原酸在醫(yī)藥制劑上應(yīng)用越來(lái)越廣泛，是目前國(guó)際公認(rèn)的“植物黃金”。綠原酸主要存在于杜仲、金銀花、葵花籽粕、元寶楓等植物中［7，8］。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉Eumiaulmoidesleaves中含有較高的綠原酸，其葉中含量為1%～5.5%［9，10］。杜仲是我國(guó)的特殊經(jīng)濟(jì)林，在我國(guó)栽培面積相當(dāng)廣泛，全國(guó)約有杜仲林28萬(wàn)ha，每年可產(chǎn)葉400萬(wàn)噸［11］，而杜仲葉的利用率僅占可采集葉的10%～20%。因此利用杜仲葉生產(chǎn)綠原酸具有巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)意義?！ ≡谥?/p>
4、草藥有效成分提取過(guò)程中，常用乙醇為溶劑。我們?cè)谔崛《胖偃~綠原酸研究中發(fā)現(xiàn)，乙醇提取雖然得率相對(duì)較高，但在提取過(guò)程中醇溶性蛋白質(zhì)、黏液、樹脂、鞣質(zhì)、色素、油脂等雜質(zhì)析出量大，過(guò)濾較困難，尤其是當(dāng)溶劑中含水量高時(shí)更加明顯，同時(shí)給以后的分離純化工序造成很大困難。因此有必要尋找更好的提取劑提取。綠原酸屬酚酸類化合物［12］，也屬植物多酚類物質(zhì)［13］。有資料報(bào)道［14］，丙酮和丙酮-水體系對(duì)植物多酚具有很強(qiáng)的溶解性，而且用丙酮提取杜仲葉中主要活性成分的工藝未見 2.6pH值對(duì)提取效果的影響 在固定料液比1∶12，提取溫度35℃，提取時(shí)間2h的情況下，用不同pH的40%丙酮提取，
5、浸提劑pH對(duì)提取效果的影響見圖6。從圖6可以看出，對(duì)于綠原酸的提取，當(dāng)pH值低于4時(shí)，隨著pH值的增加提取率增加；當(dāng)pH=4時(shí)，綠原酸的提取率達(dá)到最大；當(dāng)pH值再增加時(shí)，提取率下降。綠原酸是極性有機(jī)酸，在酸性介質(zhì)中比較穩(wěn)定，因此，綠原酸的提取，宜在酸性溶劑中進(jìn)行。但是，無(wú)論是堿性溶劑提取還是酸性溶劑提取，都會(huì)影響廢水的排放處理，從產(chǎn)業(yè)化和環(huán)境保護(hù)考慮，其均不宜在酸性或堿性溶劑中提取，宜在中性水溶液中進(jìn)行，因此，pH值對(duì)提取率的影響在以后的工藝條件優(yōu)化中不做考慮。 2.7丙酮-水溶液提取綠原酸工藝條件的優(yōu)化從以上單因素可知，杜仲葉綠原酸在提取過(guò)程中，受到浸提時(shí)間、溫度、丙酮
6、濃度和丙酮溶液用量等因素的影響。為探索最佳提取條件，在單因素的基礎(chǔ)上，對(duì)上述4個(gè)因素分別取3個(gè)水平，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行優(yōu)化，各因素和水平如表1。正交實(shí)驗(yàn)方案和結(jié)果見表2。各因素與綠原酸提取率的關(guān)系直觀圖見圖7。表1影響綠原酸提取率的因素及水平數(shù)（略）表2綠原酸提取正交實(shí)驗(yàn)表L9（34）（略）對(duì)正交實(shí)驗(yàn)有關(guān)數(shù)據(jù)作極差分析，結(jié)果見表2。由表2可知，各因素對(duì)綠原酸提取率的影響程度依次為C＞A＞B＞C。在4個(gè)影響因素中，料液比、溫度對(duì)提取率影響較大，其次是丙酮濃度，影響最小的是浸提時(shí)間。由圖7表明，以綠原酸提取率為考察指標(biāo)，依次最佳工藝條件是A3B2C2D3，各因素的
7、最佳水平分別是：浸提溫度65℃，濃度40%，料液比1∶12，浸提時(shí)間3h。說(shuō)明綠原酸提取率明顯受到溫度的影響，因?yàn)樯邷囟?，增加分子的熱運(yùn)動(dòng)，使溶劑和葉粉分子間的傳遞加速，有利于綠原酸的浸出。但綠原酸為熱敏性物質(zhì)，溫度過(guò)高，會(huì)造成綠原酸的分解，并引起丙酮汽化揮發(fā)損失。因此溫度控制在65℃以下。丙酮的濃度對(duì)提取率的影響次之，隨著濃度增加，溶劑極性降低，同綠原酸的極性差拉大，不利于綠原酸的浸出。料液比的增大，溶劑與葉粉固體溶質(zhì)間的濃度差增大，有利于傳質(zhì)，因此，綠原酸提取率增大。料液比增大，雖然有利于傳質(zhì)，但料液回收量增
