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1、金屬硫蛋白對(duì)仔豬抗氧化功能及SOD基因表達(dá)的影響作者:李麗立,劉云華,侯德興,印遇龍,張彬,侯振平,邱細(xì)敏【關(guān)鍵詞】金屬硫蛋白;抗氧化酶;基因表達(dá);仔豬【Abstract】AIM:ToinverstigatetheeffectsofexogenousZnmetallothionEin(ZnMT)onantioxidativefunctionandgeneexpressionofSODinly.Thepigletsg/kg,respectively.Threeand6hlater,3pigletseachgrouprandomlyandslaugh
2、teredtogetliversamples.ThebiochemicalindexesrelatedtoantioxidationandthelevelofSODgeneexpressioninliverined.RESULTS:AfterZnMTinjection,theactivitiesofSODandGSHPXincreasedsignificantly(P<0.05),thecontentofMDAdecreasedsignificantly(P<0.05),andthelevelofantireactiveoxygens
3、peciesandantisuperoxideanionhadthetrendofimprovement.SixhoursafterZnMTinjection,thelevelofSODgeneexpressioningroup2and3increasedsignificantlyasparedentstimulatedSODmRNAexpressioninatimeanddosedependentmanner.CONCLUSION:ActivityofantioxidasecanbeincreasedbysupplementofZnMT,the
4、rebyimprovingthepoetallothionein;antioxidativeenzyme;geneexpression;piglet【摘要】目的:用仔豬作模型,研究經(jīng)鋅元素誘導(dǎo)的外源性金屬硫蛋白(ZnMT)對(duì)機(jī)體抗氧化功能和超氧化物歧化酶(SOD)基因表達(dá)的影響.方法:選用杜長(zhǎng)大雜交仔豬18頭,隨機(jī)分為3組(1,2和3).分別肌肉注射經(jīng)生理鹽水溶解的豬肝ZnMT0mg/kg(1組),0.8mg/kg(2組),1.6mg/kg(3組),讓仔豬運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生應(yīng)激.注射MT后3h和6h,分別從每組取3頭仔豬屠宰取肝臟,測(cè)定肝臟中與抗氧化有關(guān)的
5、生化指標(biāo),檢測(cè)肝臟SOD基因表達(dá)水平.結(jié)果:在應(yīng)激條件下,補(bǔ)充外源性ZnMT一段時(shí)間后,仔豬肝臟SOD,GSHPX活性顯著升高(P<0.05),MDA含量顯著降低(P<0.05),肝臟抗活性氧和抗超氧陰離子水平也有提高的趨勢(shì).在注射ZnMT后6h,0.8mg/kg,1.6mg/kg組仔豬肝臟SOD基因表達(dá)水平比對(duì)照組顯著提高(P<0.05).0.8mg/kg組和1.6mg/kg組6hSOD基因表達(dá)水平比3h顯著增加,表明MT對(duì)SOD基因表達(dá)的誘導(dǎo)與時(shí)間和劑量關(guān)系密切.結(jié)論:補(bǔ)充外源性ZnMT可提高應(yīng)激機(jī)體的抗氧化物酶活性,從而提
6、高機(jī)體的抗應(yīng)激能力.【關(guān)鍵詞】金屬硫蛋白;抗氧化酶;基因表達(dá);仔豬0引言應(yīng)激可使機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng),繼而通過產(chǎn)生自由基造成組織損傷,致生物體病變,生產(chǎn)力下降,甚至死亡[1].金屬硫蛋白(metallothionein,MT)是分子量低、富含半胱氨酸的金屬結(jié)合蛋白.研究表明,MT具有顯著的清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化和增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用[2-3].因此,MT通過清除自由基,可增強(qiáng)抗氧化酶的活性,阻斷脂質(zhì)過氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng),減少膜脂質(zhì)過氧化損傷,減少DNA損傷.因而將MT應(yīng)用于動(dòng)物,完全有可能達(dá)到緩解氧化應(yīng)激,提高生長(zhǎng)速度,減少疾病的發(fā)生,減緩鮮肉氧化
7、速度,延長(zhǎng)動(dòng)物利用年限,提高經(jīng)濟(jì)效益的目的.但以往有關(guān)金屬硫蛋白的抗氧化、抗應(yīng)激研究以內(nèi)源性為主,而且大都僅從抗氧化酶的活性變化來(lái)探討金屬硫蛋白清除自由基、抗氧化的作用.有關(guān)MT在豬體內(nèi)的研究鮮見報(bào)道.基于此,我們以杜長(zhǎng)大雜交仔豬為對(duì)象,通過注射外源性ZnMT,測(cè)定肝臟與自由基有關(guān)的生化指標(biāo)以及肝臟中SOD基因表達(dá)水平,從蛋白和基因水平探討外源性ZnMT在應(yīng)激狀態(tài)下對(duì)抗氧化酶的影響.1材料和方法1.1材料選用胎次、日齡相同并且體質(zhì)量相近的杜長(zhǎng)大三元雜交雄性仔豬18頭,14d一次性斷奶,單欄飼養(yǎng),自由采食和飲水.試驗(yàn)前體質(zhì)量(4.42±0.24)k
8、g.屠宰前1d停食,不斷水.梯度PCR儀:德國(guó)Eppendorf生產(chǎn),型號(hào)為5331055888;穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀:北京六一儀器廠生產(chǎn),型