不同強度+gz暴露對大鼠心肌細胞凋亡的影響

不同強度+gz暴露對大鼠心肌細胞凋亡的影響

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1、不同強度+Gz暴露對大鼠心肌細胞凋亡的影響作者:鄭軍,王永春,劉成剛,孫喜慶,石菲,衛(wèi)曉陽【關(guān)鍵詞】+Gz;心肌/細胞學;細胞凋亡;大鼠  Effectsofdifferent+Gzexposureoncardiocyteapoptosisinrats  【Abstract】AIM:Toexploretheeffectsofdifferent+Gzexposureoncardiocyteapoptosisinrats.METHODS:Tizedinto3groups:controlgroup,+6Gz/3mingroupand+10Gz/3mingroup.Theratsinaldeoxyn

2、ucleotidetransferasemediateddUTPnickendlabeling(TUNEL)method.RESULTS:Thecardiocyteapoptosisincontrolgrouperouslyinthe+Gzexposuregroups.paredberofcardiocyteapoptosisincreasedsignificantlyin+6Gzexposuregroup(P<0.05).Thenumberofcardiocyteapoptosisincreasedsignificantlyinthe+10Gz/3mingroupthanthatin

3、the+6Gz/3mingroupandcontrolgroup(P<0.05).CONCLUSION:Thecardiocyteapoptosiscanbeinducedberofcardiocyteapoptosisincreasesgradually.  【Keyyocardium/cytology;apoptosis;rats  【摘要】目的:探討不同強度的持續(xù)性正加速度(+Gz)對大鼠心肌細胞凋亡的影響.方法:12只SD大鼠隨機分為對照組、+6Gz暴露組、+10Gz暴露組,每組4只,+Gz暴露組分別給予+6Gz和+10Gz負荷刺激3min,于暴露后6h取大鼠心肌組織,用原位末

4、端標記法(TUNEL)檢測心肌細胞凋亡情況并計數(shù).結(jié)果:對照組大鼠偶見TUNEL陽性染色的心肌凋亡細胞;+6Gz暴露組大鼠心肌凋亡細胞數(shù)較對照組顯著增多(P<0.05);+10Gz暴露組大鼠心肌凋亡陽性細胞數(shù)較對照組及+6Gz組均明顯增多(P<0.05).結(jié)論:+Gz暴露可以引起大鼠心肌細胞凋亡,且隨著G值的增大,心肌凋亡細胞數(shù)目逐漸增多.  【關(guān)鍵詞】+Gz;心肌/細胞學;細胞凋亡;大鼠  0引言  現(xiàn)代高性能戰(zhàn)斗機在機動飛行中所產(chǎn)生的正加速度(+Gz)具有高G值、快增長率、持續(xù)時間長并可反復出現(xiàn)等特點,其加速度過載已遠遠超過飛行員的生理耐受限度,成為威脅飛行安全的主要因素.在

5、航空飛行中,+Gz幾乎對機體各個系統(tǒng)均產(chǎn)生不良影響,尤其是對心腦系統(tǒng)的影響最為明顯.有關(guān)+Gz暴露對心臟方面的影響及其機制,以往在整體和器官水平上已做過大量的研究,但有關(guān)在+Gz暴露后,細胞凋亡及其調(diào)控因子在心臟病理生理變化中的作用的研究還很少.本研究通過不同G值的+Gz暴露后,觀察大鼠心肌凋亡細胞的產(chǎn)生情況,以進一步探討+Gz暴露致大鼠心肌細胞的損傷機制,為+Gz暴露對心臟的損傷防護提供理論基礎(chǔ).  1材料和方法  1.1材料雄性SD大鼠12只(第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供),體質(zhì)量(225±25)g,隨機分為3組,即對照組、+6Gz暴露組、+10Gz暴露組,每組4只.  1.2方法  1

6、.2.1+Gz暴露方式采用動物離心機模擬+Gz暴露.利用自制的有機玻璃盒(內(nèi)徑15cm×5cm×4cm)承載大鼠,固定于動物離心機上.大鼠頭朝向離心機軸心.離心機半徑為2m,由計算機進行加速度程序控制.實驗組暴露條件為:G值分別為+6Gz和+10Gz,峰值持續(xù)時間為3min,加速度增長率為1G/s.對照組僅按上述方法固定3min,不進行+Gz暴露.動物+Gz暴露后6h斷頭法處死,取心肌組織在4%中性甲醛固定、石蠟包埋切片后,置于APES處理的載玻片上.  1.2.2原位末端標記(TUNEL)采用華美生物工程公司檢測試劑盒,具體流程:組織切片常規(guī)脫蠟至水后,分別經(jīng)蛋白酶K(20mg/L),1g

7、/LTritonX100溶液、平衡緩沖液處理后,滴加混合反應液37℃孵育60min,反應液中含末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT),生物素標記的核苷酸.再滴加鏈親和標記的過氧化物酶37℃孵育30min,經(jīng)DAB顯色后,蘇木素襯染,顯微鏡下觀察并拍照.以上各步驟間均用0.01mol/LPBS沖洗3×5min.實驗中設(shè)立不加TdT的陰性對照組.在10×10倍的光鏡視野下,分別對各組切片的TUNEL染色陽性細胞進行計數(shù),

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