血液療法論文寫作：研究冰凍保存后紅細(xì)胞沉降去甘油的方法

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1、血液療法論文寫作：研究冰凍保存后紅細(xì)胞沉降去甘油的方法-->現(xiàn)代戰(zhàn)爭中約有25%的傷員需要緊急輸血救治,輸血是降低傷員傷死率的首要措施。在野戰(zhàn)條件下,惡劣的戰(zhàn)場環(huán)境給戰(zhàn)時(shí)的血液儲(chǔ)備與供應(yīng)造成極大困難,迫切要求戰(zhàn)時(shí)血液儲(chǔ)存供應(yīng)的技術(shù)能夠有效地適應(yīng)復(fù)雜多變的戰(zhàn)場環(huán)境,做到簡便、快速、便攜、高效。冰凍保存紅細(xì)胞簡化洗滌的研究,既保證足夠的血液供應(yīng),又可以縮短血液的處理時(shí)間,對(duì)戰(zhàn)時(shí)和突發(fā)事件情況下輸血治療起到積極作用。1　材料與方法1•1　儀器與試劑　RC3C離心機(jī)(美國SORVALL公司)

2、,CD1200血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(美國ABBOTT),l3300型晶體滲透壓儀(美國ADVANCEDINSTRUMENTS),紅細(xì)胞變形儀(上海世帝公司),723型分光光度計(jì)(上海醫(yī)療儀器廠),ATP試劑盒購置于Sigma公司。復(fù)方甘油購自北京血液中心,按文獻(xiàn)[1]方法配制。1.2方法　實(shí)驗(yàn)分為保存前組、離心組和沉降組。6份200ml全血采自307醫(yī)院志愿獻(xiàn)血者,ACD-A抗凝。冷凍紅細(xì)胞的制備及保存方法按文獻(xiàn)[1]進(jìn)行。甘油化紅細(xì)胞在-80℃條件下保存7d,42℃水浴下解凍。分離心組和沉淀組進(jìn)行洗滌

3、去甘油。離心組:①加入9%NaCl80ml和6%羥乙基淀粉100ml,1500g離心10min,棄上清;②加入6%羥乙基淀粉100ml,0.9%NaCl150ml,1500g離心10min,棄上清;③加入0.9%NaCl50ml,1500g離心10min,棄上清,重復(fù)步驟③。④0.9%NaCl補(bǔ)足原體積。沉降組洗滌包括①加入9%NaCl80ml、6%羥乙基淀粉120ml和5%羧甲基淀粉鈉(CMS)70ml,沉降30min,棄上清;②加入6%羥乙基淀粉100ml、0.9%NaC120ml和5%CM

4、S80ml,沉降20min,去除上清;③加入0.9%NaCl20ml,5%CMS40ml,沉降15min,重復(fù)步驟③。④0.9%NaCl補(bǔ)足原體積。1.3　檢測　透射電鏡觀察紅細(xì)胞形態(tài);細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測紅細(xì)胞數(shù)及血紅蛋白含量;苯息丁法檢測游離血紅蛋白的含量;晶體滲透壓法檢測甘油殘留量,當(dāng)懸浮紅細(xì)胞上清液中的晶體滲透壓低于420mOsm,認(rèn)為上清液中甘油的含量不超標(biāo)[2];用變形儀檢測紅細(xì)胞的變形指數(shù);ATP含量的測定:參照試劑盒的說明書進(jìn)行;體外溶血實(shí)驗(yàn):參照國家血液質(zhì)量管理手冊(cè)方法[3]。2　結(jié)

5、果2•1　保存前、冰凍保存離心后、冰凍保存沉降后紅細(xì)胞的形態(tài)與保存前紅細(xì)胞相比較無顯著差別,無畸形細(xì)胞,見附圖。2.2　兩種去甘油方法,細(xì)胞的回收率及上清液中甘油殘留量比較結(jié)果見表1,采用SAS軟件,erymanHT.Cryoprotectiveagents.Cryobiology,1971,8:1732FrancesKanualoftheAmericanAssociationofBloodBanks.美國血庫協(xié)會(huì)技術(shù)手冊(cè)委員會(huì)編.肖星甫等譯,1981,341~3453中華人民共和國

6、衛(wèi)生部•中國輸血技術(shù)操作規(guī)程•血站部分•天津:科學(xué)技術(shù)出版社,1997,42~434羅慶良,梁德明,于振羧•甲基淀粉鈉分離循環(huán)血白細(xì)胞血小板的研究•軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊,1987,2:1505　劉　安,韓　穎,靳　鵬,等•一種簡便準(zhǔn)確的保存紅細(xì)胞甘油殘留量的檢測方法•臨床醫(yī)學(xué)與預(yù)防醫(yī)學(xué)•成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,2000,10,185摘要:目的　研究冰凍保存后紅細(xì)胞沉降去甘油的方法。方法　6份全血采自健

7、康獻(xiàn)血者,ACD抗凝,4℃保存1d,離心獲壓積紅細(xì)胞,加入甘油到終濃度為40%,-80℃保存7d。42℃條件下凍融紅細(xì)胞;分兩組進(jìn)行洗滌去甘油,離心組:常規(guī)法洗滌紅細(xì)胞4遍。沉降組加入9%NaCl、6%羥乙基淀粉和5%羧甲基淀粉鈉,沉降30min,棄上清;加入6%羥乙基淀粉、0.9%NaC1和6%CMS,沉降20min,去除上清;加入0.9%NaC1和5%羧甲基淀粉鈉,沉降15min,去除上清;重復(fù)步驟;以生理鹽水重懸紅細(xì)胞。結(jié)果　洗滌后紅細(xì)胞形態(tài)正常,離心洗滌和沉降洗滌醫(yī)學(xué)論文槍手后紅細(xì)胞的回

8、收率(%)分別為87.95±8.60和89.25±4.17、上清液中游離血紅蛋白的含量(g/L)為0.15±0.09和0.23±0.19,上清液中晶體滲透壓(mOsm)為290.83±4.17和295.67±8.07、ATP含量(μm/gHb)34.02±9.07和34.70±11.01,紅細(xì)胞的變形指數(shù)分別為0.59±0.09和0.61±0.06,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理上述各項(xiàng)指標(biāo),兩組實(shí)驗(yàn)比較,差異無顯著性。結(jié)論　冰凍保存后的紅細(xì)胞,以沉降法去甘油與常規(guī)離心法效果無顯著差-->別,細(xì)胞質(zhì)量符合血庫的質(zhì)量