血清反復凍融對hbsag和抗hbs抗體檢測的影響

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1、血清反復凍融對HBsAg和抗HBs抗體檢測的影響　　0引言　　ELISA技術已在乙肝標志物的檢測中已普遍應用，一般認為收集的血清應及時檢測.而在基層單位或在流行病學調查研究中，由于血標本收集不集中，或者有些標本常需檢測多個指標而持續(xù)時間較長，因此，血清必須低溫貯存一定時間或反復凍融后檢測，而血清凍融對ELISA檢測結果是否有影響尚不清楚.為此，我們對183份血清標本凍融前、凍融3次、凍融6次后的HBsAg和抗-HBs進行了檢測和分析比較.　　1材料和方法　　1.1材料　　1999-05收集西京醫(yī)院門診乙肝5項檢測血清183份，年齡、性別、診斷不限.　　1.2

2、方法　　于初次檢測HBsAg和抗-HBs后置-20℃過夜，連續(xù)凍融3次、凍融6次后分別檢測HBsAg和抗-HBs，試劑盒為上?？迫A實業(yè)有限公司生產，3次檢測采用同一批號，實驗由同一人在同一實驗室嚴格按照說明書進行，結果在華東電子管廠生產的DG3022A型酶標儀上讀取，波長為450nm.標本A值/陰性對照平均A值≥2.1（S/N值）判斷為陽性.　　2結果　　HBsAg凍融前共檢測血清183份，陽性67份，陽性率為36.6%，陽性平均S/N值為18.1;凍融3次后檢測血清183份，陽性64份，陽性率為34.9%，陽性平均S/N值為17.1;凍融6次后共檢測血清1

3、83份，陽性62份，陽性率為33.9%，陽性平均S/N值為20.4.三次檢測結果經t檢驗，P>0.05，無顯著性差異.抗-HBs凍融前共檢測血清183份，陽性107份，陽性率為58.5%，陽性平均S/N值為11.5;凍融3次后共檢測血清183份，陽性110份，陽性率為60.1%，陽性平均S/N值為11.9;凍融6次后共檢測血清183份，陽性99份，陽性率為54.1%，陽性平均S/N值為11.6.三次檢測結果經t檢驗，P>0.05，無顯著性差異.HBsAg凍融前、凍融6次后均陽性61份，均陰性115份，凍融前陰性凍融6次后陽性者1份，凍融前陽性凍融

4、6次后陰性者6份，符合率為96.2%，χ2=2.28，P>0.05，無顯著性差異.抗-HBs凍融前和凍融6次后均陽性97份，均陰性10份，凍融前陰性凍融6次后陽性者2份，凍融前陽性凍融6次后陰性者10份，符合率為93.4%，χ2=4.45，P<0.05，有明顯差別.3討論　　李恩民等［1］人曾研究了血清凍融次數對水溶性脂質過氧化物測定值的影響，認為血清反復凍融4次，水溶性脂質過氧化物的測定值仍十分穩(wěn)定，龍憲和［2］，吳曉蔓等［3］也就溶血標本對乙肝標志物檢測的影響進行過探討，發(fā)現高度溶血可明顯降低HBsAg的陽性程度，可能導致部分HBsAg弱陽性

5、者漏檢.我們在對183份血清凍融前、凍融3次、凍融6次后分別進行HBsAg、抗-HBs檢測并進行統(tǒng)計分析后，結果表明:血清反復凍融對HBsAg的檢測沒有影響，凍融3次和凍融6次與凍融前相比，無論陽性率和S/N值均無明顯差別（P>0.05）.抗-HBs凍融3次與凍融前沒有顯著差別，而凍融6次后與凍融前相比，其陽性率有明顯下降，經對凍融前和凍融6次后抗-HBs檢測相關性進行分析，發(fā)現凍融6次后和凍融前無相關性，凍融前陽性標本107份，而凍融6次后下降至99份（P<0.05），說明凍融對血清抗-HBs的檢測結果確有影響，血清凍融6次后抗-HBs陽性率有

6、明顯下降，其原因尚不清楚.基于以上結果，我們認為，在臨床上或血清流行病學調查研究中，血清可以放置在-20℃貯存，反復凍融將不會影響HB-sAg的檢測結果;而對抗-HBs的檢測，應盡量避免反復凍融，進行多指標檢測時，應提前將所有試劑盒準備好，短時間內完成.