理肺通絡(luò)方對肺炎支原體肺炎大鼠肺泡灌洗液中sig

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1、理肺通絡(luò)方對肺炎支原體肺炎大鼠肺泡灌洗液中sIg【摘要】目的觀察肺炎支原體肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量及理肺通絡(luò)方的干預(yù)作用。方法將40只大鼠隨機分為正常組、模型組、中藥組、西藥組,每組10只。一次性滴鼻感染肺炎支原體國際標(biāo)準(zhǔn)株(MPFH)菌液(每毫升含肺炎支原體107變色單位)造成肺炎支原體肺炎模型。造模第11d起,除正常組外,其余各組分別灌服生理鹽水、理肺通絡(luò)方水煎劑、阿齊霉素溶液,2mL/只。中藥組連續(xù)服藥10d,西藥組前、后3d灌藥液,中間4d灌生理鹽水。在治療的第11d處死動物,觀察各組大鼠血清MP

2、IgM滴度及右肺組織

3、形態(tài)學(xué),采用放免雙抗夾心法檢測sIgA含量。結(jié)果模型組大鼠血清MP

4、IgM陽性,光鏡下顯示肺組織炎性細(xì)胞浸潤和組織損傷明顯;與正常組比較,模型組、中藥組、西藥組肺泡灌洗液中sIgA含量顯著降低,有高度統(tǒng)計意義(P<0.01);與模型組比較,中藥組、西藥組sIgA含量顯著升高(P<0.01);中藥組與西藥組比較有統(tǒng)計意義(P<0.05)。結(jié)論肺炎支原體肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA含量下降,理肺通絡(luò)合劑能提高呼吸道局部sIgA含量,且優(yōu)于西藥阿齊霉素,可能有助于降低再次感染的幾率?!娟P(guān)鍵詞】肺炎支原體肺炎;理肺通絡(luò)方;肺泡

5、灌洗液;分泌型IgA分泌型免疫球蛋白A(sIgA)廣泛存在于血液及各種分泌液中,它是分泌液重要的免疫蛋白種類,是機體特異性的防御因素。本實驗觀察了理肺通絡(luò)方對肺炎支原體肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA含量影響,探討本方對于增加sIgA含量、提高氣道局部防御功能方面的作用。1材料及方法1.1材料選擇6周齡SPF級雄性PFH)菌液(每毫升含肺炎支原體107變色單位)0.3mL/只,正常組予生理鹽水0.3mL/只滴鼻。造模第11d起,分別灌胃灌服生理鹽水、理肺通絡(luò)方水煎劑、阿齊霉素溶液,2mL/只。模型組、中藥組連續(xù)灌胃10d;西藥組前、后3d灌服

6、藥液,中間4d灌服生理鹽水。在治療的第11d處死動物,摘眼球取血,檢測正常組、模型組血清MP

7、IgM。暴露大鼠胸腔,結(jié)扎右肺,左肺用生理鹽水2mL行肺泡灌洗,灌洗液置-70℃冰箱中備用,檢測各組sIgA含量。取肉眼可見病變的右下葉肺組織,用10%福爾馬林固定、石蠟包埋、切片、HE染色,光學(xué)顯微鏡下觀察。1.2.2肺泡灌洗液sIgA檢測本試劑盒采用放免雙抗夾心法,可檢測血清及各種分泌液中的sIgA。采用的雙抗體均是針對sIgA中分泌成分SC的特異抗體。包被在聚苯乙烯球上的抗體與樣本中的sIgA形成免疫復(fù)合物“抗體-sIgA”,然后加入標(biāo)記

8、抗體125I-抗體,形成三層夾心免疫復(fù)合物“抗體-sIgA-125I-抗體”。測定每個小球上的125I放射性計數(shù)率(cpm)值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線或標(biāo)準(zhǔn)值cpm對照計算,即可知樣品中sIgA含量。檢測操作步驟首先對樣品進(jìn)行1∶10稀釋,具體步驟見表1。表1sIgA放射免疫操作步驟各管cpm值先減去S0cpm值后再計算,用雙對數(shù)直角坐標(biāo)作圖(橫坐標(biāo)為濃度,縱坐標(biāo)為cpm值),查出濃度應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)即為原標(biāo)本濃度。1.2.3統(tǒng)計學(xué)處理所有測定指標(biāo)均采用±s表示,組間比較采用t檢驗,以P<0.05、P<0.01表示有統(tǒng)計意義。2實驗結(jié)果2

9、.1大鼠血清Mp

10、IgM滴度及肺組織形態(tài)學(xué)檢查實驗結(jié)果顯示,模型組大鼠血清MP

11、IgM滴度顯著增高(見表2)。光鏡下HE染色,正常組肺組織僅個別大鼠小支氣管有少數(shù)淋巴樣細(xì)胞浸潤;模型組可見肺泡間隔增寬,支氣管、細(xì)支氣管周圍與肺泡間隔內(nèi)毛細(xì)血管明顯充盈,有程度不等的淋巴樣細(xì)胞,個別單核細(xì)胞及分葉核白細(xì)胞浸潤,間質(zhì)呈明顯的炎性改變(見圖1、圖2)。以上結(jié)果說明造模成功。表2大鼠不同稀釋倍數(shù)血清MP

12、IgM滴度陽性例數(shù)肺泡壁未見增厚,肺泡腔內(nèi)未見炎性滲出物。肺內(nèi)小支氣管及間質(zhì)小血管周圍未見明顯炎性病變。圖2光鏡下模型組肺組織形態(tài)學(xué)觀察×200

13、增寬的肺泡間隔內(nèi)毛細(xì)血管明顯充盈,可見程度不等的淋巴樣細(xì)胞,個別單核細(xì)胞及分葉核白細(xì)胞浸潤,間質(zhì)呈明顯的炎性改變。2.2各組大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量比較實驗結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組、中藥組、西藥組肺泡灌洗液sIgA含量顯著降低,有高度統(tǒng)計意義(P<0.01)。與模型組比較,中藥組、西藥組sIgA含量顯著升高(P<0.01),說明理肺通絡(luò)合劑和阿齊霉素均可不同程度地提高呼吸道局部sIgA含量;中藥組與西藥組比較有統(tǒng)計意義(P<0.05),提示理肺通絡(luò)合劑對于提高sIgA含量方面作用優(yōu)于阿齊霉素。見表3。表3各組

14、大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量比較注:與正常組比較#P<0.01;與模型組比較★P<0.01;與中藥組比較△P<0.053討論  肺炎支原體(MP)是呼吸道常見致病菌,主要通過飛沫或氣溶膠傳

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