益腦顆粒對(duì)亞急性衰老大鼠慢性腦缺血模型腦組織中hsp70表達(dá)的影響

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1、益腦顆粒對(duì)亞急性衰老大鼠慢性腦缺血模型腦組織中HSP70表達(dá)的影響：鐘麗紅魏春敏李魯楊【摘要】目的觀察益腦顆粒對(duì)慢性腦缺血大鼠腦組織中HSP70表達(dá)的影響，探討益腦顆粒治療慢性腦缺血的作用機(jī)制。方法采用Dgal注射誘導(dǎo)亞急性衰老大鼠模型，永久性雙側(cè)大鼠頸總動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)(2VO)制備亞急性衰老大鼠慢性腦缺血模型。給予高、低劑量益腦顆粒灌胃，并以尼莫地平為對(duì)照，免疫組化法觀察大鼠腦組織中HSP70表達(dá)。結(jié)果模型組腦組織中HSP70表達(dá)無(wú)明顯改變(P>0.05)，益腦顆粒高、低劑量組表達(dá)升高(P<0.01)，尼莫地平組無(wú)明顯改變(P>0.05)。結(jié)論益腦顆

2、粒能通過(guò)增加缺血腦組織中HSP70的表達(dá)，改善慢性腦缺血?！娟P(guān)鍵詞】補(bǔ)腎活血方;慢性腦缺血;衰老大鼠;HSP70　　【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofYinaogranuleontheHSP70expressioninbrainofchroniccerebralischemiamodelofsubacuteagingrats.MethodsHealthymaleodel,highdose,loodipinegroups.Subacuteagingmodeliamodeladebyligationofbilateralart

3、eriacarotis.TheexpressionofHSP70easuredbyimmuohistochemicalmethod.ResultsThereodelandcontrolgroup(P>0.05).Thereodipinegroup.ConclusionsYinaogranulecanimprovetheHSP70expressioninbrainofischemiccerebraltissue,andpretectbraincellbypreventingoxidationandinhibitingapoptosisofnervecells.　　

4、【Keyia;Rats;HSP70　持續(xù)性腦血流量下降引起多種細(xì)胞因子及抗凝因子比例失衡，是血管性癡呆、Alzheimer病和Binswanger病等多種疾病發(fā)展過(guò)程中的一個(gè)共同病理過(guò)程，盡快改善和恢復(fù)缺血損傷腦組織的血液供應(yīng)是慢性腦缺血治療的關(guān)鍵。細(xì)胞在受到缺氧、氧化損傷、病毒感染和免疫紊亂等各種應(yīng)激因素?fù)p傷時(shí)，為適應(yīng)周圍微環(huán)境的改變，會(huì)暫時(shí)性下調(diào)多種細(xì)胞自身產(chǎn)物和選擇性上調(diào)熱休克蛋白(HSP)的表達(dá)〔1〕。HSP的誘導(dǎo)表達(dá)具有保護(hù)細(xì)胞免受微環(huán)境中各種有害因素的損傷，減小組織的梗死面積，減輕臟器損傷，以及降低致死性應(yīng)激狀態(tài)下動(dòng)物死亡率的作用〔2〕。正常腦組織中HSP

5、70含量極少，缺血缺氧時(shí)表達(dá)增多，沙土鼠腦缺血后，HSP70的表達(dá)主要位于海馬及大腦皮層〔3〕。益腦顆粒是以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果擬定的，由黃芪、制首烏、銀杏葉、大黃、莪術(shù)、水蛭、三七粉等多味中藥組成，具有健脾益腦、補(bǔ)腎活血之功效。本研究應(yīng)用衰老大鼠慢性腦缺血模型，觀察益腦顆粒對(duì)腦組織HSP70表達(dá)的影響，闡明本方改善慢性腦缺血的作用機(jī)制?！　?材料與方法　　1.1動(dòng)物及分組6周齡清潔級(jí)健康雄性SD大鼠60只，體重(200±20)g，由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分成正常組、模型組、益腦顆粒高、低劑量組、尼莫地平組，每組12只?！　?.2藥品與儀器

6、黃芪、何首烏、銀杏葉、大黃、莪術(shù)、水蛭、三七粉等中藥飲片購(gòu)自山東省醫(yī)藥采購(gòu)供應(yīng)站;D半乳糖(Dgal)由北京拜爾迪生物公司提供(批號(hào)：00637);尼莫地平片由山東新華制藥股份有限公司生產(chǎn)(批號(hào)：0605173)?！　?.3.2制備益腦顆粒黃芪、何首烏、銀杏葉、大黃、莪術(shù)等粗粉按5∶5∶2∶2∶2比例，分別加入10、8、8倍量水，煎煮提取3次，靜置沉淀24h，上清液濃縮成膏，烘干、粉碎成細(xì)粉，加入水蛭粉(水蛭低溫烘干粉碎)和三七粉(投藥量均為黃芪的1/10)混勻，平鋪一薄層，紫外燈照射45min，加入95%酒精，用12目篩制粒，60℃～80℃干燥，整粒，每克益腦顆

7、粒相當(dāng)于生藥4.2g。　　1.3.3給藥益腦顆粒以蒸餾水稀釋成30和15mg/ml混懸液，高、低劑量組分別按0.6和0.2g·kg-1·d-1灌胃給藥，尼莫地平組以40mg·kg-1·d-1給予尼莫地平混懸液(2mg/ml)灌胃，模型組和正常組灌服等量蒸餾水，每天兩次給藥，4atchmakers〔J〕.JLabClinMed，1991;124(1):317.　　4李旺輝,李開榮,蕭洪文,等.IGF1對(duì)大鼠局灶性腦損傷HSP70表達(dá)的影響〔J〕.陜西醫(yī)學(xué)雜志,2009;38(1):113.　　5張輝,牛書雷,王發(fā)亮,等.缺血再灌注大鼠額葉皮質(zhì)內(nèi)B