不孕不育患者解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌感染狀況調查

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1、不孕不育患者解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌感染狀況調查[摘要]目的:探討解脲支原體、沙眼衣原體、淋病奈瑟氏菌感染與不孕不育的相關性。方法:選取2012年8月至2015年8月于我院診治的不孕不育癥患者800例納入不孕不育組,另選取同期于我院健康體檢或產檢者800例納入健康對照組。采用熒光定量PCR儀測定兩組患者解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌DNA。結果:與健康對照組相比,不孕不育組患者解脲支原體感染、沙眼衣原體感染、解脲、沙眼衣原體同時感染、淋病奈瑟氏菌感染率明顯較高(P[關鍵詞]解脲

2、支原體;沙眼衣原體;淋病奈瑟氏不孕不育;相關性解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌通過性接觸傳播引起的泌尿生殖系統(tǒng)感染在臨床上越來越常見。由于這些病原體對人類生殖健康有著重要的不良影響,因此感染者往往容易出現(xiàn)不孕不育癥。隨著分子生物學及分子診斷學的快速發(fā)展,泌尿生殖系統(tǒng)感染病原體的檢測方法由傳統(tǒng)的培養(yǎng)法、普通免疫法、PCR逐漸發(fā)展為實時焚光定量PCR法。實時焚光定量PCR法除了有高效、靈敏度高、特異性高等PCR特點不孕不育患者解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌感染狀況調查[摘要]目的:探討解脲

3、支原體、沙眼衣原體、淋病奈瑟氏菌感染與不孕不育的相關性。方法:選取2012年8月至2015年8月于我院診治的不孕不育癥患者800例納入不孕不育組,另選取同期于我院健康體檢或產檢者800例納入健康對照組。采用熒光定量PCR儀測定兩組患者解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌DNA。結果:與健康對照組相比,不孕不育組患者解脲支原體感染、沙眼衣原體感染、解脲、沙眼衣原體同時感染、淋病奈瑟氏菌感染率明顯較高(P[關鍵詞]解脲支原體;沙眼衣原體;淋病奈瑟氏不孕不育;相關性解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌

4、通過性接觸傳播引起的泌尿生殖系統(tǒng)感染在臨床上越來越常見。由于這些病原體對人類生殖健康有著重要的不良影響,因此感染者往往容易出現(xiàn)不孕不育癥。隨著分子生物學及分子診斷學的快速發(fā)展,泌尿生殖系統(tǒng)感染病原體的檢測方法由傳統(tǒng)的培養(yǎng)法、普通免疫法、PCR逐漸發(fā)展為實時焚光定量PCR法。實時焚光定量PCR法除了有高效、靈敏度高、特異性高等PCR特點及精確定量的光譜技術特點外,由于該技術全程檢測反應均為全封閉,使PCR擴增產物污染的問題得到了根本的解決,因此還有污染小的特點,該技術的應用使泌尿生殖系統(tǒng)感染病原體

5、DNA檢測具有劃時代的意義,使臨床檢測及基礎研究的數(shù)據(jù)來源更加及時、可靠。本研宄應用實時熒光定量PCR法測定不育不孕癥患者解脲支原?w、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌DNA探討這些病原體感染予不孕不育的相關性。1.資料及方法1.1一般資料選取2012年8月至2015年8月于我院診治的不孕不育癥患者,階段整群抽樣選取800例,納入不孕不育組,納入標準:(1)1年未采取任何避孕措施,性生活正常而沒有成功妊娠;(2)所有患者自愿參加本研究并簽署知情同意書。排除標準:(1)合并嚴重器官功能障礙;(2)有精神障

6、礙或不配合檢查者。年齡20-45歲,平均(28.9±3.5)歲,男425例,女375例;其中有130對為不孕不育夫妻。另選取同期于我院健康體檢或產檢者800例納入健康對照組,年齡18?47歲,平均(29.3±3.8)歲,男452例,女348例。性別、年齡在不孕不育組與健康對照組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有良好的可比性。1.2檢測儀器與試劑盒采用ABI-7500全自動熒光定量PCR儀及中山大學達安基因股份有限公司生產的試劑盒測定解脲支原體、沙眼衣原體及淋病奈瑟氏菌DNA(生產批號:

7、S20150093)。1.3取標本及處理所有取標本操作均由婦產科及泌尿外科醫(yī)生完成。(1)女性標本:先用干凈棉簽抹掉子宮頸外口分泌物,在用一次性女性專用無菌棉簽在宮頸管內旋轉3取宮頸管內分泌物于配套管內。(2)男性標本:將一次性男性專用拭子伸入尿道內3cm后旋轉幾圈,停留半分鐘后取出置于配套管內。標本取好后立即封閉并送檢。標本處理及提取DNA過程由檢測專業(yè)人員嚴格按照說明書進行:將棉拭子從生物安全柜中取出后置于EP管內,加入1.5mL無菌生理鹽水充分混勻懸浮后去掉棉拭子,將EP管放入離心機內以1

8、2000r/min離心3min,去掉上清留取沉淀備用。1.4擴增DNA及判定結果將2uL標本DNA、陽性定量參考物及質控品DNA先后加入擴增管內,置于離心機以8000r/min離心5s后放進全自動熒光定量PCR儀進行擴增,每次檢測均分為空白對照、陰性及陽性。PCR儀參數(shù)設定:93°C3min預變;93°C45s后進入55°Clmin持續(xù)10個循環(huán)當作熒光本底信號;93°C30s后進入55°C45s持續(xù)30個循環(huán),在55°C時可收集熒光。用ct值代表擴增結果,為使標準曲線效果最佳,需根據(jù)陽性定量參

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