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1、TIP30在胃癌組織中的表達(dá)及其對(duì)胃癌血管生成的影響作者：徐忠凱 鄭春寧 孫少川 姜永勝 趙東【摘要】目的:研究Tat作用蛋白30(Tat-interactiveprotEin30,TIP30)基因在胃癌組織中的表達(dá)及其對(duì)胃癌血管生成的影響。方法：運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)52例胃癌組織及47例癌旁正常組織中TIP30蛋白的表達(dá)水平，同時(shí)檢測(cè)CD34標(biāo)記的微血管密度(microvesseldensity，MVD)。結(jié)果:TIP30在胃癌和癌旁正常組織中的陽(yáng)性率分別為53.8%和85.1%，兩者相比
2、較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.22，P﹤0.01)，TIP30表達(dá)水平與患者年齡、性別、病理分化程度及腫瘤大小無(wú)關(guān)，與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)。胃癌組織和癌旁正常組織中MVD值分別為27.37±2.68和21.87±4.11，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.95，P<0.01)，胃癌組織中TIP30表達(dá)陽(yáng)性者較陰性者M(jìn)VD值顯著降低(t=-3.18，P=0.003)。結(jié)論:TIP30在胃癌組織中表達(dá)降低，其可能通過(guò)抑制胃癌血管生成影響胃癌的發(fā)生發(fā)展?！娟P(guān)鍵詞】胃腫瘤·新生血管化,
3、病理性·Tat作用蛋白30基因 【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheexpressionofTIP30ingastriccancertissuesandanalyzeitsimpacticrovesseldensity(MVD)easuredbyimmunohistochemicalstainingin52casesofgastriccarcinomasand47casesofPara-cancertissues.Results:thepositiverat
4、eofTIP30(χ2=11.22,P<0.01).TheexpressionofTIP30ingastriccancerphnodemetastasisandTNMstage,butnotrelateda.TheMVDuchloa.TheeffectofTIP30genefortumorgenesisandgroaybepartiallypletedthroughdepressionofvesselformation. 【KEYVD)的關(guān)系，探討TIP30在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其對(duì)胃
5、癌血管生成的影響。 1 資料與方法 1.1 一般資料 收集山東大學(xué)附屬濟(jì)南市中心醫(yī)院普外科2006年5月—2008年3月手術(shù)切除的胃癌組織標(biāo)本共52例，其中男39例，女13例，中位年齡54.5歲。所有患者術(shù)前均未接受放療或化療，均經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診。所有標(biāo)本術(shù)后均按照美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)(AJCC)2002年制定的胃癌TNM臨床分期法進(jìn)行分期。其中Ⅰ～Ⅱ期20例，Ⅲ～Ⅳ期32例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的40例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例。病理組織學(xué)分級(jí)：高、中分化17例，低分化35例。病理組織學(xué)檢查皆為腺癌。
6、取距腫瘤組織邊緣≥5cm的癌旁正常組織標(biāo)本47例作對(duì)照?！ ?.2 主要試劑與儀器 TIP30羊抗人單克隆抗體購(gòu)自SantaCruz公司，兔抗羊第二抗體購(gòu)自生物晶美工程有限公司。鼠抗人CD34單克隆抗體和通用型免疫組織化學(xué)試劑盒均購(gòu)自福州邁新公司。OLYMPUS-BX50顯微鏡為日本OLYMPUS產(chǎn)品，TD2000圖文處理系統(tǒng)由北京天地公司提供。 1.3 免疫組織化學(xué)染色 4%多聚甲醛固定組織。常規(guī)石蠟切片脫蠟至水，3%H2O2室溫孵育，醫(yī)用微波爐高溫抗原修復(fù)15min，采用免疫組織化學(xué)SP法
7、，血清封閉，分別加入抗TIP30一抗(工作濃度1：100)及CD34一抗、二抗，DAB顯色劑顯色。所有切片均經(jīng)蘇木精復(fù)染，封片?！ ?.4 結(jié)果判定 TIP30染色結(jié)果根據(jù)相關(guān) 本研究發(fā)現(xiàn)TIP30蛋白在胃癌組織中的表達(dá)顯著降低。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床TNM分期較晚的患者的胃癌組織中TIP30降低程度更明顯?！ ∥赴┑陌l(fā)生、發(fā)展及其轉(zhuǎn)移灶的形成與新生血管密切相關(guān)。MVD能夠反映腫瘤血管的新生化水平，被認(rèn)為是腫瘤的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)之一[10]。TIP30蛋白是否通過(guò)影響血管生成來(lái)實(shí)現(xiàn)胃癌的轉(zhuǎn)移呢?本研究
8、通過(guò)對(duì)CD34標(biāo)記的MVD進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)胃癌組織的MVD值較癌旁正常組織顯著升高，TNM分期越晚的腫瘤組織中MVD值越高。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，TIP30蛋白表達(dá)陽(yáng)性的胃癌組織的MVD顯著低于陰性者，提示TIP30蛋白的高表達(dá)能夠抑制胃癌新生血管生成。TIP30蛋白對(duì)血管生成的抑制作用可能通過(guò)調(diào)節(jié)血管生成調(diào)節(jié)因子抑制一系列血管刺激因子的表達(dá)，同時(shí)誘導(dǎo)一系列血管生成抑制因子的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。Nicamhlaoibh等[11]發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染了TIP30基因的v-SCLC細(xì)胞培養(yǎng)基可以顯著抑制人臍血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。張霞等
