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1、綿茵陳藥材高效液相色譜指紋圖譜研究論文王鳳云，江濱，曾元兒，張軍【摘要】目的建立綿茵陳藥材的HPLC指紋圖譜，為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法采用反相高效液相色譜法，并進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)考察，對(duì)不同產(chǎn)地和批次綿茵陳藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。結(jié)果采用KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱.freelL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)327nm；該方法穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性良好,可用于綿茵陳藥材的指紋圖譜測(cè)定；不同批次的綿茵陳藥材在圖譜上存在一定的差異。結(jié)論該結(jié)果可為綿茵陳藥材的質(zhì)量控制提供依據(jù)。【關(guān)鍵詞】綿茵陳；高效液相色譜法；指紋圖譜
2、Abstract:ObjectiveToestablishHPLCfingerprintsofHerbaArtemisiaescopariaeandoffersomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.MethodsandResultsThefingerprintsofHerbaartemisiaescopariaefromdifferenthabitatsandbatchesanceliquidchromatography.ThesampleasilC
3、18（250mm×4.6mm，5μm）columnundergradientelution.ThemobilephaseconsistedofacetonitrileandH2O(0.2%H3PO4)andthefloL·min-1.Thedetection.Thestability,accuracyandcredibilityofthismethodethodofferssomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.Keyisiaescopariae;H
4、PLC;HPLC;fingerprints茵陳為菊科植物濱蒿ArtemisiascopariaERCK公司）；其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1品種鑒定指紋圖譜所用的不同批次綿茵陳藥材均購(gòu)于廣州市藥材公司、廣州清平藥材市場(chǎng)、廣州致信藥業(yè)有限公司，其產(chǎn)地分別為江西（市售1）、山西（市售2）、山東（市售3）、安徽（市售4）、河南（市售5）、山西（市售6）、陜西（市售7）、山東（市售8）、寧夏（市售9）、安徽（市售10）。根據(jù)《中國(guó)藥典》2005版一部茵陳［性狀］項(xiàng)下的規(guī)定，與《中華人民共和國(guó)藥典中藥彩色圖譜集》、《新編中藥志》中照片
5、與描述，經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥鑒定教研室劉基柱老師鑒定為菊科植物濱蒿ArtemisiascopariaisiacapillariesThunb春季采收的干燥幼苗。2.2供試品溶液的制備取本品粉末約0.5g，精密稱定，加入體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇100mL，置水浴上加熱回流1h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)皿w積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶解，置25mL棕色量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。2.3對(duì)照品溶液的制備取綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定,置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。2.4色譜條件Krom
6、asilC18（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱，流動(dòng)相采用二元體系，流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為體積分?jǐn)?shù)為0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脫程序：0min（5％A）,10min（10%A），45min（25％A）；柱溫35℃，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)327nm。2.5指紋圖譜試驗(yàn)的方法學(xué)驗(yàn)證2.5.1綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取綠原酸對(duì)照品溶液（40.8μg/mL），分別進(jìn)樣2、4、6、8、10、16、20μL，按照上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以綠原酸質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程為：Y=2553.1X+2.8847,（
7、r=0.9999），表明綠原酸在0.0816～0.816μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.5.2穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份供試品溶液，分別在0、1、2、4、8和12h進(jìn)行檢測(cè)，直觀指紋圖譜全貌無(wú)明顯變化，經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件（國(guó)家藥典委員會(huì)2004A，以下同）計(jì)算，與對(duì)照?qǐng)D譜比較，相似度均大于0.9，各共有峰相對(duì)峰面積和相對(duì)保留時(shí)間的RSD分別為1.41％、1.22％，表明在12h內(nèi)供試品溶液具有良好的穩(wěn)定性。2.5.3精密度試驗(yàn)取同一份供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)行檢測(cè)，直觀指紋圖譜全貌無(wú)明顯變化，經(jīng)相似度評(píng)價(jià)，相似度均大于0.9，
8、各共有峰相對(duì)峰面積和相對(duì)保留時(shí)間的RSD分別為0.42％、0.31％，表明該方法精密度良好。2.5.4重復(fù)性試驗(yàn)取同一種藥材樣品6份，按照供試品溶液的制備和檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，直觀指紋圖譜全貌無(wú)明顯變化，經(jīng)相似度評(píng)價(jià)，相似度均大于0.9
