《植物器官培養(yǎng)》ppt課件

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1、2021/9/191第四章植物器官培養(yǎng)第一節(jié)概述第二節(jié)營養(yǎng)器官培養(yǎng)第三節(jié)繁殖器官培養(yǎng)2021/9/192植物器官培養(yǎng)（OrganCulture）是指對植物某一器官的全部、部分或器官原基進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)。分為營養(yǎng)器官（根、莖、葉）和繁殖器官（胚胎、種子、花器官）培養(yǎng)。第一節(jié)概述2021/9/193植物器官培養(yǎng)營養(yǎng)器官培養(yǎng)繁殖器官培養(yǎng)根培養(yǎng)莖培養(yǎng)（包括莖尖、莖段）葉培養(yǎng)（包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉）花培養(yǎng)（包括花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花藥）種子培養(yǎng)（包括成熟與未成熟）胚胎培養(yǎng)（包括幼胚、成熟胚、胚珠、子房、胚乳培養(yǎng)）外植體形態(tài)發(fā)生形成完整植

2、株的途徑（一）外植體-愈傷組織-完整植株。具體又可分為三種：1、愈傷組織-同時(shí)長芽和根-植株。2、愈傷組織-莖-根-植株。3、愈傷組織-根-芽-植株。4、愈傷組織-體細(xì)胞胚-植株第二節(jié)營養(yǎng)器官培養(yǎng)2021/9/196一、離體根的培養(yǎng)二、莖尖的培養(yǎng)*三、莖段的培養(yǎng)四、離體葉的培養(yǎng)*一、離體根的培養(yǎng)（一）意義：①生理代謝研究的優(yōu)良實(shí)驗(yàn)體系②研究器官分化形態(tài)建成的良好體系③建立快速生長的根無性系④進(jìn)行誘變育種2021/9/1971.培養(yǎng)基選擇White培養(yǎng)基；2/3或1/2MS和B5培養(yǎng)基注：離體根生長要求提供全部必需元素，蔗糖、硝態(tài)氮效果好，加入VB1、V

3、B6最重要，生長素對離體根影響不一致。培養(yǎng)溫度25－27℃，暗光培養(yǎng)。2021/9/198（二）培養(yǎng)方法離體根生長的營養(yǎng)要求1、無機(jī)成分要求培養(yǎng)基中有全部必要元素，因?yàn)樗请x體生長所需要的，一般的為MS、B5培養(yǎng)基。2、氮源氮源有銨態(tài)氮、硝態(tài)氮和可溶性有機(jī)氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝態(tài)氮的效果最好。加入含各種氨基酸的水解酪蛋白，能促進(jìn)離體根的生長。3、碳源以蔗糖的效果最佳，幾乎為葡萄糖的10倍。蔗糖的濃度為2—3%。4、維生素維生素以B1和B6最為重要，缺少它根的生長受到阻礙，而加入它可使根的生長成倍的加快。B1的使用濃度為0.1-1.0mg/L為宜。

4、5、生長物質(zhì)對離體根的生長而言，生長素的效應(yīng)最為明顯，在一般情況，加入適量的生長素能促進(jìn)根的生長，其反應(yīng)和需要量因植物種而異：6、溫度和光照黑暗有利于根的形成，溫度一般在16-25℃7、PH根發(fā)生和生長所需的PH范圍一般為5.0-6.02.無性繁殖系的建立種子消毒→→接種→→待根伸長后從根尖一端切取長1.2cm的根尖→→接種于培養(yǎng)基→→發(fā)育出側(cè)根→→待側(cè)根生長約1周后切取側(cè)根的根尖進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)→→又迅速生長并長出側(cè)根→→切下進(jìn)行培養(yǎng)，如此反復(fù)→→得到從單個(gè)根尖衍生而來的離體根的無性系。3.培養(yǎng)條件暗光和溫度25-27℃。2021/9/19114、根的間

5、接增殖第一步在脫分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)形成愈傷組織，如胡楊的根段培養(yǎng)，可誘導(dǎo)形成白色愈傷組織。第二步在再分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)形成芽的分化，如胡楊從綠色愈傷組織分化出小植株。一、離體根的培養(yǎng)胡蘿卜根培養(yǎng)5、培養(yǎng)方式離體根的培養(yǎng)方式有三種類型。第一種固體培養(yǎng)法，即將根尖接種在固體培養(yǎng)基上，根依靠培養(yǎng)基中的養(yǎng)分和生長物質(zhì)而不斷生長。第二種是液體培養(yǎng)法，把根尖接種在無瓊脂的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)常振蕩使根獲得充足的氧氣。第三種是固體-液體培養(yǎng)法，就是把根基部插入固體瓊脂培養(yǎng)基中，根尖浸在液體培養(yǎng)基中，根尖生長而根不斷的伸長和分枝。2021/9/1915二、莖尖的培養(yǎng)*（一）莖

6、尖培養(yǎng)概念及類型（二）病毒在植物體內(nèi)的分布（三）莖尖培養(yǎng)方法及步驟(一)莖尖培養(yǎng)概念及類型莖尖培養(yǎng)：切取莖的先端部分或莖尖分生組織部分，進(jìn)行無菌培養(yǎng)。莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為：①微莖尖培養(yǎng):帶有1-2個(gè)葉原基的生長點(diǎn),其長度不超過0.5mm。2021/9/1916②普通莖尖培養(yǎng)：較大的莖尖(如幾mm到幾十mm)、芽尖及側(cè)芽。這里主要講普通莖尖培養(yǎng)。這種培養(yǎng)技術(shù)簡單，操作方便，莖尖容易成活，成苗所需時(shí)間短。莖尖培養(yǎng)的意義：普通莖尖培養(yǎng)技術(shù)簡單，操作方便，易成活，成苗時(shí)間短，加快繁殖。微莖尖培養(yǎng)可獲得脫毒苗；2021/9/1917病毒侵染植株的

7、葉片后，經(jīng)過一段時(shí)間，即向附近的細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)移速度很慢，每小時(shí)只有幾微米。當(dāng)葉片內(nèi)病毒濃度增大到一定量時(shí)，就轉(zhuǎn)移到韌皮部，隨后通過維管束轉(zhuǎn)移到其它部分。由于病毒轉(zhuǎn)移速度慢，加上莖尖分生組織無維管束，病毒只能通過胞間連絲傳遞，趕不上細(xì)胞分裂和生長的速度，所以生長點(diǎn)的病毒數(shù)量極少，幾乎檢測不出。莖尖培養(yǎng)時(shí)，切取的莖尖越小，帶病毒的可能性就越小?！o尖脫毒的基本原理(二)病毒在植物體內(nèi)的分布（三）莖尖培養(yǎng)方法及步驟2021/9/1920取材材料處理及消毒培養(yǎng)接　種馴化移栽①直接取材：在生長旺盛、枝條健壯、無病的母株上選生長不久、雜菌污染少的頂梢（1－2

8、cm）（取前可噴殺菌藥，可頂芽或側(cè)芽）。②從試管苗獲取。2021/9/19211、取材取1-2