表皮生長因子與胚胎發(fā)育和著床論文

表皮生長因子與胚胎發(fā)育和著床論文

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1、表皮生長因子與胚胎發(fā)育和著床論文關(guān)鍵詞:表皮生長因子胚胎發(fā)育著床摘要胚胎著床過程的調(diào)節(jié)十分復(fù)雜,近年來細(xì)胞生長因子參與胚胎發(fā)育和著床的功能研究十分熱門,在細(xì)胞生長因子發(fā)揮作用的網(wǎng)絡(luò)中,表皮生長因子起著舉足輕重的作用,是著床過程順利完成不可缺少的因子之一。本文就表皮生長因子改善胚胎發(fā)育、啟動(dòng)胚胎著床、調(diào)節(jié)植入過程等內(nèi)容進(jìn)行簡要綜述。關(guān)鍵詞:表皮生長因子胚胎發(fā)育著床自1962年Cohen從雄鼠頜下腺分離提純出表皮生長因子(epidermalgroRNA)含4800對堿基,翻譯出的EGF前體有1217個(gè)氨基

2、酸殘基,含數(shù)個(gè)糖基位點(diǎn),與低密度脂蛋白(LDL)序列相似,因而EGF前體可能是一種有受體功能的膜糖蛋白。成熟的EGF分子內(nèi)含3個(gè)二硫鍵,活性中心位于48~53個(gè)氨基酸殘基之間,分子量為6.045kd,等電點(diǎn)4.6,耐熱及耐胰蛋白酶、糜蛋白酶。不同種類的EGF雖然氨基酸數(shù)量和排列有差別,但存在一定的交叉反應(yīng)。,人EGF首次從尿液中提取出來時(shí),稱作尿抑胃素(urogastrine),其生物學(xué)活性及氨基酸序列與小鼠EGF相似。EGF-R是一種糖蛋白,廣泛分布于哺乳動(dòng)物的上皮細(xì)胞,是一條被質(zhì)膜分為內(nèi)、外兩個(gè)區(qū)

3、段的單一多肽鏈。EGF-R含1186個(gè)氨基酸殘基,分子量170kd,富含甘露糖。人的EGF-R基因位于第7號染色體短臂上。除細(xì)胞膜外,核內(nèi)也EGF-R分布,二者具有相同的抗原性。EGF-R的結(jié)構(gòu)和功能在不同種屬動(dòng)物中基本相似,分子進(jìn)化較保守。EGF-R本身具有蛋白激酶的活性,與配體的結(jié)合具有特異性、高親和性等特點(diǎn)1。EGF-R在胎盤的分布比在子宮內(nèi)膜、蛻膜等處要高1000倍,而且主要分布于合體滋養(yǎng)層4。EGF家族的成員為數(shù)不少,由于它們的受體相同,因此或多或少地參與了胚胎的發(fā)育和著床的過程,研究較為廣

4、泛而深入的是EGF,其次是轉(zhuǎn)化生長因子(TFG)和肝素結(jié)合表皮生長因子(HB-EGF),Amphiregulin、Cripto、Betacellulin、neu以及Epiregulin與著床的調(diào)節(jié)只有少量報(bào)道5。二、EGF與早期胚胎發(fā)展著床的先決條件是胚胎的正常發(fā)育和脫透明帶。Morita6用EGF處理體外培養(yǎng)的胚泡,然后移植入同步發(fā)情、處于假孕第4d受體母鼠的子宮內(nèi),結(jié)果著床率為77.9%,與在體內(nèi)胚泡的發(fā)育接近,為84.2%,而體外培養(yǎng)未加EGF有胚泡,移植后的著床率只有57.1%。其原因可能是E

5、GF顯著刺激小鼠胚泡滋養(yǎng)層細(xì)胞的外延生長,增加與子宮內(nèi)膜的粘附。Taga71992年的實(shí)驗(yàn)顯示,EGF對小鼠2細(xì)胞的發(fā)育不表現(xiàn)出明顯的效應(yīng),只在桑椹胚以后,EGF自分泌和旁分泌才對胚胎的發(fā)育起作用。然而Buyalos8發(fā)現(xiàn),將小鼠2細(xì)胞胚胎培養(yǎng)在EGF含量為2~100mg的培養(yǎng)液中,72h后,完全擴(kuò)展和正在孵化的胚泡的比例明顯高于對照組,且EGF的促進(jìn)作用可被抗EGF抗體所阻斷。Terual9將小鼠2細(xì)胞胚胎單獨(dú)培養(yǎng)時(shí),EGF可明顯增加胚胎的分化生長速率,證明EGF對小鼠2細(xì)胞胚胎的生長有促進(jìn)作用。E

6、GF是否作用于早期胚胎取決于胚胎EGF-R的有無及活性,免疫熒光測定出小鼠未受精卵細(xì)胞和2細(xì)胞胚胎中呈現(xiàn)很弱的EGF-R熒光,4細(xì)胞以后各期,熒光逐漸增強(qiáng)。除滋養(yǎng)層細(xì)胞外,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中也EGF-R的表達(dá),RT-PCR測出4細(xì)胞后EGF-RmRNA顯著長高,說明從8細(xì)胞開始合成的受體蛋白源自胚胎的mRNA,而受精卵和2細(xì)胞胚胎內(nèi)的mRNA則可能是母源性的10。Merriman11將未受精的小鼠卵細(xì)胞在EGF的培養(yǎng)液中進(jìn)行成熟處理,受精后分裂至2細(xì)胞階段的能力高于對照組,將這些2細(xì)胞胚胎移植人受體假孕小鼠后

7、,著床率為64%~78%,略低于正常著床率89%。Grupen12用EGF處理豬的卵細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)能提高進(jìn)行減數(shù)分裂的成熟卵細(xì)胞的比例,源于這些卵細(xì)胞受精后囊胚的形成率比對照組高,此結(jié)果表明,EGF對豬卵細(xì)胞的減數(shù)分裂和細(xì)胞質(zhì)成熟具有重要作用。EGF不僅對小鼠,而且在多種哺乳動(dòng)物中都表現(xiàn)出對著床前胚胎發(fā)育具有調(diào)節(jié)作用。Johnson13證實(shí)在大鼠妊娠4、5、6d的子宮腺上皮中存在EGF、TGF-α和EGF-R,EGF-R同時(shí)還存在于正在植入的胚胎和子宮基質(zhì)的蛻膜細(xì)胞上。Gharib4在綿羊圍著床期滋養(yǎng)層細(xì)

8、胞上也發(fā)現(xiàn)EGF-R存在,其分子量與小鼠EGF-R相同,為170kd,EGF和EGF-R的存在提示EGF參與了調(diào)節(jié)胚胎的發(fā)育。Zhang15從著床前的豬胚胎上同樣發(fā)現(xiàn)分子量為170kd的EGF-R,該受體蛋白在有EGF和ATP時(shí)發(fā)生磷酸化。此外,在兔16、牛17,18、貓19、馬20等動(dòng)物的滋養(yǎng)層細(xì)胞和子宮內(nèi)膜上都證實(shí)有EGF和EGF-R,EGF能夠刺激體外培養(yǎng)胚胎的卵裂,使之更快發(fā)育至囊胚期。停滯發(fā)育(arresteddevelopment)是斑點(diǎn)鼬(

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