大鼠離體心臟缺血再灌注過(guò)程的功能變化

《大鼠離體心臟缺血再灌注過(guò)程的功能變化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。

1、大鼠離體心臟缺血再灌注過(guò)程的功能變化【摘要】目的建立大鼠離體心臟缺血再灌注(I/R)損傷模型,觀察I/R過(guò)程心臟舒縮功能與冠脈流量變化。方法大鼠離體心臟采用Langendorff法灌流,對(duì)照組(n=8)心臟連續(xù)灌流80min;I/R組(n=8)心臟缺血40min再灌注40min。實(shí)驗(yàn)過(guò)程實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)心率(min-1)、心肌收縮幅度(g)與最大收縮速度(dT/dtmax,g/ms)、最大舒張速度(dT/dtmax,g/ms)、心肌靜息張力(g)、冠脈流量(液滴,min-1)。結(jié)果與對(duì)照組比較,I/R組心臟缺血后心搏停止

2、，20min后心肌靜息張力上升(P<0.05);再灌注后心肌張力仍高;心搏恢復(fù)但心率、心臟收縮幅度、最大收縮速度、最大舒張速度均降低(P<0.05~0.001);再?gòu)?fù)灌注初冠脈流量恢復(fù)正常,10min后呈下降性變化(P<0.05~0.001)。結(jié)論大鼠離體心臟缺血40min再灌注40min導(dǎo)致I/R損傷,該模型制備及功能評(píng)價(jià)方法簡(jiǎn)便可靠?！娟P(guān)鍵詞】心臟缺血心肌再灌注損傷收縮舒張期冠脈循環(huán)病模型物缺血再灌注(I/R)損傷是導(dǎo)致心臟病變的常見(jiàn)原因。建立簡(jiǎn)便可靠的心臟I/R損傷模型及評(píng)價(jià)指標(biāo),探討心臟I/R

3、損傷病變規(guī)律、機(jī)制及防治為人們所關(guān)注。筆者采用大鼠離體心臟缺血40min再灌注40min建立I/R損傷模型,觀察I/R過(guò)程心臟功能變化規(guī)律,為該模型應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料和方法1.1動(dòng)物雄性SD大鼠16只,體質(zhì)量250~300g[福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,合格證號(hào)SCXK(閩)20040002]。1.2方法1.2.1大鼠離體心臟灌流[1]術(shù)前30min腹腔注射肝素25mg/kg,術(shù)時(shí)腹腔注射20%氨基甲酸乙酯3mL/kg,快速開(kāi)胸取心置冰洛氏液中修剪,Langendorff法灌流離體心臟,灌流液采用氧飽和的37℃修正洛

4、氏液,成分為(g/L):NaCl9.0,KCl0.42,CaCl20.24,NaHCO30.15,葡萄糖2.5。pH7.4,灌注壓70cmH2O。1.2.2心率、心臟舒縮力、冠脈流量測(cè)定[1]帶系線(xiàn)的蛙心夾夾少許心尖組織,系線(xiàn)通過(guò)滑輪轉(zhuǎn)向后與肌張力傳感器相連。冠脈流出液由漏斗收集,滴落時(shí)與液滴換能器兩電極接觸。張力傳感器、液滴換能器輸出的心臟舒縮力、液滴信號(hào)由生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(BL420E,成都泰盟科技有限公司)記錄。調(diào)節(jié)系線(xiàn)松緊度,使心臟前負(fù)荷為3g。灌流20min后采集心搏、冠脈流出液液滴曲線(xiàn)(基礎(chǔ)值)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程每隔

5、10min采集心搏、流量曲線(xiàn)1min。測(cè)量各時(shí)點(diǎn)心率(min-1)、心臟收縮幅值(g)、最大收縮速度(dT/dtmax,g/ms)、心肌舒張力(g)、最大舒張速度(dT/dtmax,g/ms)及冠脈流量(min-1)。1.2.3分組對(duì)照組心臟連續(xù)灌流80min;I/R組心臟缺血(停止灌流)40min再灌注(恢復(fù)正常灌流)40min[2]。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以配對(duì)資料各時(shí)點(diǎn)值與基礎(chǔ)值比值的x±s表示。兩組各時(shí)點(diǎn)比值采用兩均數(shù)t檢驗(yàn),P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1心搏、冠脈流量變化對(duì)照組心臟連續(xù)灌流80

6、min,其心率、收縮幅度、冠脈流量維持穩(wěn)定,心肌靜息張力下降(圖1A)。I/R組心臟缺血40min心搏停止,心肌靜息張力升高;再灌注后心搏恢復(fù),但搏動(dòng)弱,冠脈流量減少(圖1B)。2.2對(duì)心率的影響對(duì)照組心臟灌流過(guò)程心率穩(wěn)定;I/R組心臟缺血后心搏停止,再灌注后心搏恢復(fù),但心率低于對(duì)照組(P<0.05,圖2)。2.3對(duì)心臟收縮功能的影響對(duì)照組收縮幅度、最大收縮速度維持穩(wěn)定。I/R組再灌注后收縮幅度、最大收縮速度均低于對(duì)照組(P<0.05~0.001),表明缺血40min再灌注心臟收縮功能低下(圖3)。2.4對(duì)心臟

7、舒張功能的影響對(duì)照組心臟灌流過(guò)程心肌張力下降;最大舒張速度灌流初60min增快(與穩(wěn)定值比較,P<0.05),之后維持穩(wěn)定,說(shuō)明離體心臟連續(xù)灌流80min舒張功能維持正常。I/R組心臟缺血20min心肌張力維持穩(wěn)定,之后開(kāi)始升高,缺血40min升高明顯(P<0.05);再灌注后心臟仍處于高張力狀態(tài)(P<0.05),最大舒張速度也明顯低于對(duì)照組(P<0.05~0.001),表明缺血40min再灌注40min造成心臟舒張功能不良(圖4)。2.5對(duì)心臟冠脈流量的影響對(duì)照組冠脈流量穩(wěn)定,I/R組再灌注初始

8、10min冠脈流量恢復(fù)接近正常(P>0.05),之后持續(xù)性下降(P<0.05~0.001),說(shuō)明再灌注導(dǎo)致冠脈損傷流量減少,提示再灌注后冠脈流量進(jìn)行性下降是本模型心臟再灌注損傷的征象(圖5)。2.6離體心臟標(biāo)本觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)束剪開(kāi)左心室觀察,對(duì)照組心肌溫暖柔軟,I/R組心肌冰涼攣縮;整體標(biāo)本狀態(tài)