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1、大豆苷元對離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用論文張生枝，鐘星明，黃虎龍，陳潔玲，冒宸，葉麗娟，曾靖【摘要】目的研究大豆苷元（DD）對離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法應(yīng)用大鼠離體心肌缺血再灌注損傷模型，在灌流液中加入高、低劑量的大豆苷元。測定冠脈流量、心率、左心室收縮壓、左心室內(nèi)壓最大變化速率及心肌組織乳酸脫氫酶(LDH)和心肌肌酸激酶（CK）活性的變化。結(jié)果與溶劑組比較.freelyocardialischemia/reperfusioninjury.MethodsAratmyocardialischemia
2、/reperfusioninjurymodeladeandent,theisolatedmyocardialtissueshoaticactivitiesofLDHandCKinmyocardialtissueincreased.Thecoronaryarterybloodfloyocardialischemia/reperfusioninjurybecauseitdilatestheenhancesmyocardialcontractileforce,strongthenthetheleftventricula
3、rdiastolicpressure'schangingspeedandlimitsthereleaseofCKandLDH.Keyia/reperfusioninjury大豆苷元(Daidzein，DD)系葛根中的主要成分之一，葛根的有效成分為大豆苷元、染料木苷、黃豆黃苷、染料木素、黃豆黃素。葛根素的臨床應(yīng)用非常廣泛，對心腦血管疾?。?,2］、視網(wǎng)膜疾?。?］等具有良好療效；大豆苷元也具有抗心律失常［4］、抑制膽囊收縮［5］、耐缺氧［6］、影響免疫器官［7］等作用。本實(shí)驗(yàn)通過Langendorff心臟灌流裝置研
4、究DD對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。1材料與儀器1.1藥物大豆苷元由沈陽藥科大學(xué)植化教研室提供，純度為98%，實(shí)驗(yàn)前用二甲基亞砜（DMSO）溶解，使用時(shí)用K-H液稀釋至所需濃度，LDH和CK檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所。1.2動(dòng)物SD大鼠購自江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體質(zhì)量220～250g，雌雄各半（動(dòng)物中心許可證號：2005-0001，動(dòng)物合格證號：JZD6240BD型多道生理信號采集處理系統(tǒng)，HSS-1（B）型恒溫裕槽及10KPa壓力換能器，均購自成都儀器廠。2方法2.1心臟灌流及給藥的方法健康SD
5、大鼠24只，體質(zhì)量220～250g，隨機(jī)分為4組，每組6只，分別為心臟缺血再灌注模型組，溶劑對照組(DMSO)，DD高、低劑量組（0.3，0.1μmol·L-1）。大鼠10％水合氯醛(3ml/kg)腹腔麻醉后，開胸迅速取出心臟，置于4℃改良K-H液（每升含下列物質(zhì)：氯化鈉6.90g，氯化鉀0.35g，硫酸鎂0.30g，碳酸氫鈉2.10g，磷酸二氫鉀0.16g，氯化鈣0.28g，葡萄糖2.0g）中。迅速將主動(dòng)脈套上Langendorff心臟灌流裝置，以37℃新鮮K-H液（充于95%O2+5%CO2飽和)逆行恒壓(5
6、.86kPa)灌流心臟，左心室內(nèi)置乳膠水囊和換能器相連，通過RM6240BD型生物信號采集處理系統(tǒng)(成都儀器廠)記錄左心室內(nèi)壓的變化。心臟灌流20min，待各項(xiàng)生理指標(biāo)穩(wěn)定后，停灌30min，模型組用K-H液再灌注40min；給藥組用含不同濃度DD的K-H液再灌注40min。各組在灌流過程中及灌流結(jié)束后測定以下指標(biāo)。2.2灌流量、左心室內(nèi)壓、左心室內(nèi)壓最大變化速率的測定用生物信號采集處理系統(tǒng)記錄并測定停灌前及再灌后第5，10，15，20，25，30min各組心臟的心率（HR）、左心室收縮壓（LVSP）、左心室內(nèi)壓
7、最大變化速率(±dp/dtmax)。用量筒測定同時(shí)間點(diǎn)各組的灌流量（ml·min-1）。每個(gè)樣本以心臟停灌前各項(xiàng)指標(biāo)為1，計(jì)算出各時(shí)段的心臟灌流量、HR、LVSP及±dp/dtmax與心臟停灌前的比值。2.3心肌組織生化指標(biāo)測定心臟灌流結(jié)束后，將心肌組織制成10%的勻漿，于-80℃保存。按試劑盒說明，測定各組心肌組織乳酸脫氫酶(LDH)、心肌肌酸激酶(CK)活性。2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用Prism4.0統(tǒng)計(jì)軟件，對各劑量藥物處理組與模型組之間進(jìn)行單因素方差分析。3結(jié)果3.1DD對心臟缺血再灌注時(shí)LVSP，±dp/dt
8、max的影響如圖1～3所示，各劑量的DD均能在一定程度上增大LVSP和左心室內(nèi)壓最大變化速率。兩種濃度的DD對灌流量及心率無明顯影響。3.2DD對心臟缺血再灌注時(shí)心肌LDH的影響高、低劑量DD再灌注后，心肌LDH的活性較模型組均升高。結(jié)果見圖4。3.3DD對心臟缺血再灌注損傷時(shí)心肌CK的影響低劑量DD再灌注后，心肌CK的活性升高。結(jié)果見圖5。4討論心臟疾病是目前危害人類健
