紅辣椒中色素的分離與鑒定

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1、紅辣椒中色素的分離與鑒定一:授課知識點1.紅辣椒中的主要成份、應(yīng)用現(xiàn)狀紅辣椒中含有多種色素,已知的有辣椒紅色度、辣椒玉紅素和β-胡蘿卜素;辣椒色素具有安全無毒、抗癌美容等功效,因而被廣泛的應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和化妝品等領(lǐng)域。辣椒紅色度又名椒紅素,分子式為C40H56O3,純的辣椒紅色度為深胭脂紅針狀晶體,熔點181~182℃,易溶于極性大的有機溶劑。2.從天然產(chǎn)物中提取天然色素的方法、應(yīng)用現(xiàn)狀由于合成色素的安全性問題,不少合成色素在各國允許使用的程度被大大限制,尤其是在食品、醫(yī)藥和化妝品行業(yè),所以,天

2、然色素的提取和應(yīng)用是現(xiàn)在和未來發(fā)展的主要方向。到目前為止,主要有以下幾種提取方法:A,有機溶劑提取法這是目前從動植物中提取色素的一種普遍常用的方法。有機溶劑提取法萃取劑便宜,設(shè)備簡單,操作步驟簡單易行,提取率較高,其提取的某些產(chǎn)品的質(zhì)量較差,純度低,有異味或溶劑殘留,影響產(chǎn)品的應(yīng)用范圍。B,堿提取法主要是應(yīng)用了堿對多種生物物質(zhì)的影響作用。由于堿提取法加工過程需消耗大量酸堿,且廢液較難回收,近年來對堿提取法的研究也較少。C,微波萃取法微波萃取是用微波加熱,將待測物質(zhì)組分從樣品基體中提取出來的一種方法

3、,能在較短時間內(nèi)完成多種樣品組分的萃取,溶劑用量少,結(jié)果重現(xiàn)性好,變現(xiàn)出良好的發(fā)展前景和巨大的應(yīng)用潛力。D,超臨界二氧化碳流體萃取法此方法工藝簡單,能耗低,萃取劑便宜,提取的產(chǎn)品純度高、溶劑殘留少、無毒副作用等優(yōu)點,但一次性設(shè)備費用投入高。3.紅辣椒中色素提取方法;分離原理及方法本實驗采用有機溶劑提取紅辣椒中的色素,主要是利用色素在二氯甲烷中具有良好的溶解性。將紅辣椒粉末和二氯甲烷放于圓底燒瓶中回流后用水浴濃縮混合色度,再用柱層析分離色素。4.柱層析A,原理:吸附柱層析法是利用各組分在吸附劑與洗脫

4、劑之間的吸附和解吸能力的差異而達到分離的。B,層析柱的選擇(1)活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作,這樣可以不涂真空油脂,以免污染產(chǎn)品;如果用玻璃活塞,則真空油脂要小心涂薄均勻。(1)層析柱的尺寸根據(jù)被分離物的量來確定,其直徑與高度之比則根據(jù)被分離混合物的分離難易而定,一般在1:8到1:50之間。柱身細長,分離效果好,但分離的量小,且分離所需的時間長;柱身短粗,分離效果差,但一次可以分離較多的樣品,且所需的時間短。C,吸附劑的選擇(1)柱層析常用的吸附劑為氧化鋁或硅膠,其用量與待分離樣品的性質(zhì)和吸附劑的

5、極性有關(guān),通常吸附劑用量為被分離樣品量的30~50倍,對于難分離的混合物,吸附劑的用量可達100倍或更高。(2)氧化鋁有酸性、堿性和中性之分。酸性氧化鋁是用1%的鹽酸浸泡后,用蒸餾水洗到其浸出液的PH為4,適用用分離酸性物質(zhì);堿性氧化鋁PH值為9~10,用以分離胺類、生物堿及其他有機堿性化合物;中性氧化鋁的PH值為7.5,適用于醛、酮、醌、酯等化合物。(3)硅膠略帶酸性(能與強堿性有機物發(fā)生作用),所以適用于酸性和中性有機化合物的分離。(4)硅膠一般為80~200目,顆粒太粗,溶液流出太快,分離效

6、果不好;顆粒太細,表面積大,吸附能力高,但淋洗速度太慢,因此需根據(jù)實際需要選擇。D,淋洗劑的選擇(1)根據(jù)淋洗劑的極性和對分離物各組分的溶解度大小等因素選擇(2)根據(jù)在常溫至沸點的溫度范圍內(nèi)可與被分離物長期共存不發(fā)生任何化學(xué)反應(yīng),也不被吸附劑或被分離物催化而發(fā)生自身的化學(xué)反應(yīng)(2)毒性小,操作安全(3)適當(dāng)考慮價格是否合算,來源是否方便;(4)回收溶劑一般不應(yīng)作為最終純化產(chǎn)物的淋洗劑;(5)淋洗劑的用量往往比較大,故最好使用單一溶劑以利回收。1,實驗流程及操作注意點(具體操作參照實驗教材P53)A

7、,色素的萃取和濃縮(1)控制回流速度(約1滴/秒);(2)有機溶劑的過濾,需控制真空度不能過高;(3)蒸餾裝置的安裝(參照P147)(4)濃縮至看不到液體為止。B,薄層分析使用活化硅膠板。硅膠板活化:放在玻璃儀器干燥后進行。一定要待烘箱冷至室溫后再集中放入薄層板慢慢升溫于105-110℃活化半小時,活化期間不得開啟烘箱?;罨?,在烘箱中冷至不燙時取出使用。派一學(xué)生負責(zé)計時。薄層分析安排在裝好層析柱并用溶劑淋洗時進行。注:如果樣點分不開或嚴重拖尾,可酌減點樣量或用少量二氯甲烷稀釋樣品C,柱層析分離(

8、1)硅膠漿需在實驗前先用二氯甲烷浸泡起來(至少浸泡30min);(2)柱子不需要洗,也無需在活塞處涂凡士林,用少量二氯甲烷檢漏及檢驗其流速。用完后除去硅膠,不要用水洗交上來,統(tǒng)一由小丁處理。打壞到411室于海燕處登記。(3)裝柱時,要使柱子垂直(用兩個自由夾固定),砂芯孔里及附近的空氣要排除干凈,硅膠盡量一次性加入,柱子裝到3/4處,上部離磨口處約6cm左右;(4)柱子裝完后,表面要平整,無氣泡、斷層,然后加2min左右石英砂(用來防止淋洗劑沖洗柱子上表面)。(5)加樣:先打開柱下

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