音樂對大鼠學(xué)習(xí)和記憶以及海馬nmda受體表達(dá)的影響

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1、音樂對大鼠學(xué)習(xí)和記憶以及海馬NMDA受體表達(dá)的影響作者:王增賢,王曉亞,王懷經(jīng),李振中,王越,邢子英【Abstract】AIM:TostudytheeffectofmusiconthespatiallearningandmemoryandtheexpressionofNMDAreceptorinhippocampusofrats.METHODS:ThenonmatchedpositiontaskintheMorris'azeinethebehaviorchangesoflearningandmemory,andimmunohistochemistryandPCRtechniqu

2、esployedtomeasuretheexpressionofNMDAreceptoranditsmRNAinhippocampusinDAreceptoranditsmRNAinhippocampusstrengthened.CONCLUSION:MusiccanimprovethespatialmemoryofratsandincreasetheexpressionofNMDAreceptoranditsmRNAinhippocampus.  【Keyemory;receptors,NMethylDAspartate;music;rats  【摘要】目的:研究音樂對大鼠空

3、間學(xué)習(xí)和記憶及海馬內(nèi)NMDA受體表達(dá)的影響.方法:用Morris水迷宮行為檢測法,檢測音樂刺激后大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的變化;免疫組化和PCR技術(shù),檢測海馬NMDA受體及編碼NMDA受體mRNA的表達(dá).結(jié)果:音樂刺激后,大鼠信息游泳和選擇游泳的逃避潛伏期縮短,選擇游泳選擇正確率提高,其變化以持續(xù)音樂刺激組最明顯,生后音樂組次之,對照組最小;音樂刺激后海馬神經(jīng)元NMDA受體及其mRNA表達(dá)增加.結(jié)論:音樂刺激能提高大鼠空間記憶能力,增強(qiáng)海馬神經(jīng)元NMDA受體及編碼NMDA受體的mRNA表達(dá).  【關(guān)鍵詞】學(xué)習(xí);記憶;受體,N甲基D天冬氨酸;音樂;大鼠  0引言  學(xué)習(xí)和記憶是哺乳類動(dòng)

4、物生存的重要基礎(chǔ).參與學(xué)習(xí)和記憶的腦結(jié)構(gòu)因?qū)W習(xí)和記憶的類型不同,呈現(xiàn)出復(fù)雜的多樣性.關(guān)于化學(xué)物質(zhì),如藥物、神經(jīng)活性物質(zhì)等對學(xué)習(xí)和記憶的作用研究,已經(jīng)取得了大量的資料,但是環(huán)境對學(xué)習(xí)和記憶影響的研究資料尚少見報(bào)道.本研究中我們用orris水迷宮中對大鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測,并對大鼠海馬、杏仁核和中腦中央灰質(zhì)等處NMDA受體的免疫組織化學(xué)反應(yīng)強(qiáng)度和海馬組織編碼NMDA受體的mRNA表達(dá)進(jìn)行定量檢測,以探索音樂刺激對大鼠學(xué)習(xí)和記憶以及與學(xué)習(xí)和記憶相關(guān)的腦區(qū)NMDA受體表達(dá)的影響,為環(huán)境因素干預(yù)學(xué)習(xí)和記憶能力的機(jī)制研究提供資料.  1材料和方法  11材料  取定時(shí)妊娠orris氏水迷宮(M

5、orrisaze)進(jìn)行大鼠學(xué)習(xí)和記憶的行為學(xué)訓(xùn)練和檢測[1,2].訓(xùn)練方案為,預(yù)訓(xùn)練3d,學(xué)習(xí)訓(xùn)練9d,休息2L/LH2O2室溫15min,抗原封閉液室溫1h,一抗?jié)窈袃?nèi)4℃過夜,羊抗兔IgG室溫2h,SABC室溫2h,DAB顯色10min.上述步驟中除加一抗前一步驟外,第一步和以后各步驟后都用001mol/LPBS沖3次,每次10min.染色完成后,常規(guī)脫水、透明、封片,觀察照相.對照組用血清代替一抗,其余步驟相同.  圖像分析:在每組所做的切片中,選取5張切片用Proplus圖像分析儀分析處理.對海馬組織CA1、CA3和齒狀回神經(jīng)元NMDA受體的免疫染色強(qiáng)度進(jìn)行分析.各片上

6、均以其胼胝體染色作為參照,求得目標(biāo)區(qū)和胼胝體光密度差值后,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理.1.24海馬組織NMDA受體mRNA的PCR分析取各組大鼠海馬組織,25mg/L胰蛋白酶消化方法分離細(xì)胞后,以cacaggagcgggtaaacaacagc作為上游引物,gcttcagtccctttggccgattc作為下游引物.提取總mRNA,進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄.加入上游、下游引物、βactin和Taq酶等,94℃,40s;55℃,40s;72℃,50s,循環(huán)35次.用15mL/L瓊脂糖凝膠電泳檢測,SmartVieRNA表達(dá)的相對值.  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:除選擇游泳中的選擇正確率用χ2檢驗(yàn)外,其余各參數(shù)組間比較

7、用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.  2結(jié)果  21大鼠的一般行為學(xué)觀察在音樂播放過程中,鼠崽活動(dòng)減少,安靜地聚集在一起.當(dāng)被放回動(dòng)物房后,鼠崽活動(dòng)活躍,打斗頻繁,對人的觸抓逃避反應(yīng)敏感.未接受音樂刺激的鼠崽,活動(dòng)、打斗較少,對觸抓反應(yīng)不很敏感.在訓(xùn)練過程中,起初大鼠游泳時(shí)沿著迷宮和隔板貼壁游動(dòng),隨著訓(xùn)練的進(jìn)行,大鼠通過觀察后或直接游到平臺所在位置,所用時(shí)間逐漸縮短,選擇正確率不斷提高.  22訓(xùn)練過程中大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的變化  221信息游泳(informations,IS)逃避潛伏期訓(xùn)練初期和

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