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1、重組人生長(zhǎng)激素對(duì)裸鼠人胃癌移植瘤細(xì)胞周期的影響作者：梁道明 張毅 張熒熒 袁勇 周東 陳嘉勇【摘要】目的：研究重組人生長(zhǎng)激素（rebinanthumangroone,rhGH）對(duì)裸鼠人胃癌移植瘤細(xì)胞周期的影響。方法：將24只實(shí)驗(yàn)裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、順鉑（DDP）組、rhGH組和DDP+rhGH組，每組6只，將體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞MKN45接種于裸鼠右臀部皮下，裸鼠胃癌移植瘤模型成功建立后開始連續(xù)給藥6d，給藥結(jié)束后處死裸鼠。取出移植瘤，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，并分析細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖指數(shù)（PI）及DNA抑制率。結(jié)果：給藥結(jié)束后DDP+rhGH組和DD
2、P組S期細(xì)胞明顯減少，而rhGH組和對(duì)照組比較增多（P<0.05）；G0-G1期、G2-M期的細(xì)胞增殖指數(shù)（PI）和DNA抑制率各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。rhGH組細(xì)胞凋亡率增加而對(duì)照組、DDP組和DDP+rhGH組減少（P<0.05）。結(jié)論：未發(fā)現(xiàn)rhGH對(duì)裸鼠人胃癌移植瘤細(xì)胞有明顯促進(jìn)分裂增殖作用?！娟P(guān)鍵詞】重組人生長(zhǎng)激素·裸鼠·胃腫瘤·細(xì)胞周期Effectsofrebinanthumangrooneoncellcycleofhumangastriccarcinomaxenograftinnudemice【AB
3、STRACT】Objective:Tostudytheeffectsofrebinanthumangroone（rhGH）oncellcycleofhumangastriccarcinomaxenograftinnudemice.Methods:ThenudemiceofthisexperimentangastriccarcinomacellsMKN45iceandcarcinomaxenograftmodeliceinthefolloalsentorinhibitionrateeasuringtumorvolume.Cellcycleofhumang
4、astriccancerMKN45,cellproliferationindex（PI）andDNAinhibitionalrateetry（FCM）.Results:ThecellsinSphaseofDDP+rhGHgroupandDDPgroupdecreasedobviouslyparedongcellsinG0-G1phase,G2-Mphase,PIandDNAinhibitionrate.TheapoptosiscellsinrhGHgroupincreasedremarkably（P<0.05）. 近年來，生長(zhǎng)激素（groone
5、,GH）作為一種與合成代謝有關(guān)的物質(zhì)已受到廣泛的關(guān)注，臨床應(yīng)用GH可糾正手術(shù)及創(chuàng)傷后的負(fù)氮平衡狀態(tài)，能顯著改善患者的營(yíng)養(yǎng)狀況,促進(jìn)胃腸道管壁細(xì)胞的增殖和修復(fù)。已有研究證實(shí)GH在氮平衡時(shí)水平升高，而在傷口感染及術(shù)后下降［1］。但術(shù)后應(yīng)用GH在促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)的同時(shí)是否會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，目前仍缺乏實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究通過在裸鼠體內(nèi)建立移植瘤模型來研究重組人生長(zhǎng)激素（rebinanthumangroone,rhGH）對(duì)人胃癌細(xì)胞是否具有增殖作用，為臨床胃癌患者術(shù)后是否能應(yīng)用rhGH提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)材料 6周齡Nunu裸鼠，均為雌性，體質(zhì)量
6、13～22g，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，在昆明醫(yī)學(xué)院天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室SPF級(jí)條件下飼養(yǎng)；人低分化胃癌細(xì)胞株MKN45，購(gòu)于中科院上海細(xì)胞生物所細(xì)胞庫(kù)；rhGH為安徽安科生物工程（集團(tuán)）股份有限公司產(chǎn)品；順鉑（DDP）為云南個(gè)舊生物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；碘化丙啶由上海求德生物化工有限公司生產(chǎn)；流式細(xì)胞儀由COULTER公司生產(chǎn)，EPICXP型。1.2 實(shí)驗(yàn)方法1.2.1 腫瘤模型制作 取培養(yǎng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人胃癌細(xì)胞MKN45，用0.25%胰蛋白酶消化，錐蟲藍(lán)染色計(jì)數(shù)細(xì)胞，細(xì)胞活力100%，用10%小牛血清1640液配成密度為2.0×107mL
7、-1的細(xì)胞懸液。隨機(jī)選取2只裸鼠，以每只0.2mL將細(xì)胞懸液接種于裸鼠的右側(cè)臀部皮下組織，3d后形成綠豆大小的腫塊。裸鼠胃癌移植瘤體內(nèi)傳代：裸鼠胃癌移植瘤生長(zhǎng)至直徑約0.5cm，處死裸鼠，消毒皮膚，取出移植瘤，未見瘤體壞死，將瘤體切取成2mm×2mm×2mm的包塊，接種于臀部，按此方法瘤體在裸鼠體內(nèi)傳2代。然后，將包塊接種于24只裸鼠臀部，術(shù)后全部存活，無不良反應(yīng)。7d后腫瘤形成，成瘤率100%，成功建立裸鼠胃癌移植瘤模型，裸鼠臀部均形成綠豆大小腫塊。1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法 測(cè)量裸鼠的體重和胃癌移植瘤長(zhǎng)短徑，待移植瘤生長(zhǎng)至0.5cm3左右，隨機(jī)
8、分為對(duì)照組、順鉑組（DDP）、rhGH組和DDP+rhGH組，每組6只。分組后連續(xù)給藥6d：對(duì)
