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1、振通膠囊對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的影響作者:滿偉,王敬蘭,占戈,王鑫國(guó),曹剛【摘要】目的觀察振通膠囊對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的影響。方法采用夾閉大鼠兩側(cè)頸總動(dòng)脈(同時(shí)腹腔注射硝普鈉)缺血45min,再灌注30min的方法復(fù)制大鼠腦缺血再灌注損傷模型。結(jié)果振通膠囊(0.07,0.14g/kg)可明顯升高腦缺血再灌注大鼠血清SOD,6ketoPGF1α含量,降低MDA,ET,TXB2及腦鈣含量。結(jié)論振通膠囊對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷有明顯保護(hù)作用。【關(guān)鍵詞】振通膠囊;腦缺血再灌注損傷 振通膠囊是我們研制
2、的治療中風(fēng)后遺癥的中藥復(fù)方制劑,由馬錢子等中藥組成。臨床試用取得了良好的療效。為探討其作用機(jī)制,我們觀察了其對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的影響?,F(xiàn)報(bào)道如下?! ?材料與方法 1.1藥物和試劑振通膠囊(0.5g/粒),由課題組提供,用0.5%的纖維素鈉制成混懸液,備用;硝普鈉,北京制藥工業(yè)研究所實(shí)驗(yàn)廠,用無(wú)菌蒸餾水溶解;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒,南京建成生物工程公司;血栓素B2(TXB2)、6酮前列腺素F1α(6ketoPGF1α)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)試劑盒
3、,解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所?! ?.2動(dòng)物雄性DA含量的測(cè)定模型成功后,腹主動(dòng)脈取血2ml,3000r/min,4℃離心10min,取血清按說(shuō)明書方法測(cè)定其中SOD,MDA含量?! ?.4.2NO,ET含量測(cè)定模型成功后,腹主動(dòng)脈取血2ml,注入含10%EDTA-鈉30μl和抑肽酶40μl的試管中,混勻,3000r/min,4℃離心10min,取血漿按說(shuō)明書用放免法測(cè)定其中NO,ET含量?! ?.4.3TXB2,6ketoPGF1α含量測(cè)定模型成功后,腹主動(dòng)脈取血2ml,放入加有消炎痛-
4、EDTA·Na2液的試管中,即刻混勻,3000r/min,4℃離心10min,取血漿按說(shuō)明書用放免法測(cè)定其中TXB2,6ketoPGF1α含量?! ?.4.4腦組織鈣含量測(cè)定灌注完畢后斷頭,開(kāi)顱取右側(cè)大腦皮層,用去離子水清洗后,烘干研末,經(jīng)優(yōu)級(jí)硝酸消化后按原子吸收分光光度法,以shimadzuAA680G型原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定腦組織鈣含量?! ?結(jié)果 2.1對(duì)腦缺血再灌注大鼠血漿SOD,MDA的影響表1所示,腦缺血再灌注后,模型對(duì)照組大鼠血清SOD含量明顯降低,MDA含量顯著增高,與偽手
5、術(shù)組相比差異顯著(P<0.01或P<0.05)。振通膠囊(0.07,0.14g/kg)組SOD含量均較模型對(duì)照組升高(P<0.01),而MDA含量均較模型對(duì)照組降低(P<0.01)。表明振通膠囊有升高腦缺血再灌注損傷大鼠血清SOD含量,降低MDA含量作用?! ”?對(duì)腦缺血再灌注大鼠血清SOD、MDA的影響(略) 與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01 2.2對(duì)腦缺血再灌注大鼠血漿NO和ET含量的影響表2所示,腦缺血再灌注后,模型對(duì)照組大鼠血液中ET含量明顯升高,NO含量顯著降低,與偽手
6、術(shù)組相比差異顯著(P<0.05)。振通膠囊(0.07,0.14g/kg)均能顯著降低血液中ET含量,與模型對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.05)。振通膠囊(0.07,0.14g/kg)均有升高血液中NO含量的趨勢(shì),但與模型組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?! ”?對(duì)腦缺血再灌注大鼠血漿NO和ET含量的影響(略) 與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;n=8 2.3振通膠囊對(duì)腦缺血再灌注大鼠血漿TXB2和6-keto-PGF1α含量的影響表3所示:缺血再灌注后,模型對(duì)照組大鼠血液中6-keto-PG
7、F1α降低,同時(shí)伴有TXB2升高,與偽手術(shù)組相比差異顯著(P<0.01或P<0.05)。振通膠囊(0.07,0.14g/kg)均能顯著升高6-keto-PGF1α,同時(shí)均能顯著降低TXB2;與模型對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.05或P<0.01),且高劑量較低劑量效果為好,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?! ?.4對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織鈣含量的影響表5所示:缺血再灌注后,模型對(duì)照組大鼠腦組織鈣含量顯著高于偽手術(shù)組(P<0.01)。振通膠囊(0.07,0.14g/kg)均能顯著降低腦組織鈣含量(P<0.05或P<
8、0.01),且高劑量較低劑量效果為好。 3討論 腦缺血再灌注損傷是臨床上常見(jiàn)的病理現(xiàn)象,氧自由基介導(dǎo)的自由基連鎖反應(yīng)是導(dǎo)致腦缺血再灌注損傷的重要原因。腦缺血再灌注中氧自由基代謝異常,組織中氧自由基含量增多,過(guò)多的氧自由基主要作用于生物膜不飽和脂肪酸,發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),造成膜結(jié)構(gòu)和功能的破壞,引起神經(jīng)元損害[1]。MDA作為氧自由基與生物膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的代謝產(chǎn)物,其含量的變化間接反應(yīng)腦組織中氧自由基的變化[2]。SOD可清除超氧陰離子,使細(xì)胞免受毒性自由基的損