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1、ACE基因多態(tài)性與運(yùn)動(dòng)耐力的相關(guān)性分析論文葉新鋼李澤龍劉家玉【摘要】目的探討血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)基因多態(tài)性與運(yùn)動(dòng)耐力的相關(guān)性。方法以多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)方法檢測(cè)68例長(zhǎng)跑運(yùn)動(dòng)員以及60例年齡、性別相匹配的健康對(duì)照者的ACE基因型，紫外線吸收法測(cè)定ACE活性，放射免疫法檢測(cè)血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)濃度。結(jié)果運(yùn)動(dòng)員組II基因型頻率為0.529，I等位基因頻率為0.721，顯著高于對(duì)照組(分別為0.333和0.575)，差異有顯著性(χ2=4.732、7.316，P0.05)。運(yùn)動(dòng)員組DD型ACE活性和血
2、漿AngⅡ濃度較II型顯著升高，差異有顯著性(F=3.93、5.15.freele(ACE)genepolymorphismandphysicalendurance.MethodsUsingpolymerasechainreactionmethod,ACEgenotypein68long-distancerunningathletes,and68healthycontrolsatchedinedbyultravioletabsorbtionmethod,andangiotensinⅡ(AngⅡ)levelsin
3、plasmabyradioimmunity.ResultsThefrequencyofgenotypeIIinathletegroupaAngⅡinathletsayhaveanassociationayhaveapreferabletrainingsensitivity.KEYgCl21.5μL，TaqDNA聚合酶0.5U，去離子水16μL。反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性120s，94℃變性60s，58℃退火120s，72℃延伸90s，共擴(kuò)增30個(gè)循環(huán);72℃延伸300s。1.2.4PCR反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)將PCR反應(yīng)產(chǎn)物
4、10μL加入6×LoadingBuffer2μL，置于20g/L的Agaro凝膠上電泳成像，在紫外線燈下顯影，通過凝膠照相及圖像分析系統(tǒng)確定基因型。1.2.5ACE活性及血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)濃度檢測(cè)ACE活性測(cè)定采用紫外線吸收法，試劑盒購(gòu)自中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院;血漿AngⅡ濃度檢測(cè)采用放射免疫測(cè)定法，試劑盒購(gòu)自北京原子能研究所。操作均嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用PPMS1.54統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，結(jié)果以±s表示。計(jì)量資料結(jié)果組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pear
5、son相關(guān)分析方法。2結(jié)果2.1ACE基因型的判斷和鑒定PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，位于ACE基因內(nèi)含子16的插入或缺失多態(tài)性可擴(kuò)增出兩種長(zhǎng)度的片段，即490bp插入擴(kuò)增片段(I)和190bp的缺失片段(D)，紫外線燈下可呈現(xiàn)3種帶型：僅有490bp條帶的為純合子插入型(II型)，僅有190bp條帶的為純合子缺失型(DD型)，有490bp和190bp兩個(gè)條帶的為雜合子插入或缺失型(I/D型)(圖1)。M：相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);①II型;②I/D型;③DD型。圖1ACE基因16內(nèi)含子I/D多態(tài)性PCR擴(kuò)增結(jié)果2.2ACE基因
6、型及I、D等位基因分布頻率68例運(yùn)動(dòng)員中，ACE基因II型36例(52.9%)，ID型26例(38.2%)，DD型6例(8.9%);I等位基因頻率0.721，D等位基因頻率0.279。對(duì)照組60例中，ACE基因II型20例(33.3%)，ID型29例(48.3%)，DD型11例(18.4%);I等位基因頻率0.575，D等位基因頻率0.425。經(jīng)χ2檢驗(yàn)符合Hardy-ONTGOMERRY等10研究顯示，ACEII基因型運(yùn)動(dòng)員表現(xiàn)出相對(duì)較高的能量節(jié)省。這些研究結(jié)果均支持ACEI等位基因與運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)耐力相關(guān)。目
7、前認(rèn)為，ACE活性和AngⅡ水平與心血管的形態(tài)、功能密切相關(guān)，ACE基因多態(tài)性通過影響ACE的表達(dá)，進(jìn)而影響AngⅡ水平，影響人體的心肺功能，從而影響人體的有氧耐力素質(zhì)和最大攝氧量。最大攝氧量是杰出耐力的重要限制性因素，因此ACE基因多態(tài)性影響到運(yùn)動(dòng)員的耐力素質(zhì)，它被認(rèn)為是運(yùn)動(dòng)員耐力素質(zhì)優(yōu)劣的決定性因素之一。本文結(jié)果顯示，ACE基因3種基因型之間ACE水平和AngⅡ水平差異有顯著性，并且二者呈顯著相關(guān)，推測(cè)ACE基因多態(tài)性影響著運(yùn)動(dòng)員的耐力素質(zhì)。AMIR等11研究顯示，ACE基因I/D多態(tài)性片段位于內(nèi)含子，為非
8、信息部分，該多態(tài)性不能影響此mRNA所編碼的ACE基因的表達(dá)，但有可能影響mRNA的轉(zhuǎn)錄和修飾，或通過連鎖不平衡來影響基因的變異。另外，由于ACE基因位于17q23，鄰近生長(zhǎng)激素基因17q22-24，ACE基因與生長(zhǎng)激素基因連鎖不平衡，可刺激胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在血管平滑肌細(xì)胞和腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，而IGF-Ⅰ有增加心肌細(xì)胞蛋白合成及心肌質(zhì)量的功能。盡管目前多數(shù)研
