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《花椒體內(nèi)外抗腫瘤作用及其機(jī)制的初步研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、花椒體內(nèi)外抗腫瘤作用及其機(jī)制的初步研究作者：袁太寧,王艷林,汪鋆植【摘要】目的研究花椒揮發(fā)油體內(nèi)外抗小鼠H22肝癌細(xì)胞作用及其免疫學(xué)機(jī)制。方法花椒揮發(fā)油按不同時(shí)間（24，48，72h）及不同濃度（0.5～8mg/ml）分別處理H22細(xì)胞，MTS法分析細(xì)胞的增殖速度，用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期。建立H22荷瘤小鼠模型，觀察小鼠腫瘤的生長情況,計(jì)算腫瘤生長抑制率；ELISA法檢測花椒揮發(fā)油處理后小鼠血清中IL-2和IL-12的活性。結(jié)果4mg/ml花椒揮發(fā)油處理H22細(xì)胞72h可顯著地抑制H22細(xì)胞增殖，1mg/ml花椒揮發(fā)油處理H22細(xì)胞72
2、h即可導(dǎo)致亞凋亡峰的出現(xiàn)，且G0/G1期細(xì)胞增多,S期和G2/M期細(xì)胞減少，花椒揮發(fā)油對(duì)小鼠實(shí)體瘤生長具有顯著抑制作用，但不能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL-12的水平。結(jié)論花椒揮發(fā)油可抑制H22細(xì)胞增殖并激發(fā)細(xì)胞凋亡，但不能通過提高機(jī)體的免疫功能發(fā)揮抗腫瘤作用?！娟P(guān)鍵詞】花椒；H22細(xì)胞；凋亡；免疫功能 Abstract：ObjectiveTostudytheanti-tumereffectanditsimmunologicalmechanismoftheessentialoilofzanthoxyluminvivoandinvitro.Me
3、thodsTreatingH22cellsatdifferenttimeand,MTSetryormodesoreffectofzanthoxylumorgroIL-2andIL-12inedbyELISAassay.ResultsTreatingH22cells72hby4mg/mlessentialoilofzanthoxylumresultedinremarkableinhibitionofthecellproliferation.TreatingH22cells72hby1mg/mlessentialoilofzanthoxylumresu
4、ltedinappearanceofsub-G1andincreaseG0/G1phasecellsanddecreaseSphaseandG2/Mphasecells.Theessentialoilofzanthoxyluminhibitedthegroorintumor-bearingmice.HocouldnotincreasethecontentsofmurineserumIL-2andIL-12.ConclusionTheessentialoilofzanthoxyluminhibitsproliferationandinducescel
5、lapoptosisofH22cells,butitcannotexerttheanti-tumorefficiencythroughrEinforcingtheimmunefunction. Key;H22cells;Apoptosis;Immunefunction 花椒屬一種溫?zé)犷愔胁菟?，?熱,有小毒，歸脾、腎兩經(jīng),功能溫中止痛,解毒殺蟲，常用于治療脾胃虛寒癥?；ń愤€是深受民眾喜愛的重要食用性香料，其資源在我國分布很廣,安全性高。國內(nèi)外研究報(bào)道花椒對(duì)消炎、鎮(zhèn)痛、殺菌、抗病毒、抗寄生蟲、抗真菌、抗氧化等均具有較強(qiáng)的作用［1～5］。隨著對(duì)花椒
6、提純和藥理作用的深入研究,發(fā)現(xiàn)花椒還具有抗腫瘤作用,但目前對(duì)花椒抗腫瘤的研究還不夠深入,其體內(nèi)的抗腫瘤作用研究則更少。為了認(rèn)識(shí)花椒在體內(nèi)外抗腫瘤作用的機(jī)制和特點(diǎn),我們選用小鼠H22肝癌細(xì)胞為研究對(duì)象,觀察了花椒在體內(nèi)外對(duì)該細(xì)胞的作用，以期探討花椒在體內(nèi)外抗腫瘤作用及其可能的機(jī)制?！ ?材料 成熟花椒,采于湖北宜都，經(jīng)汪鋆植博士鑒定為Zanthoxylumbungeanum。H22腹水型小鼠肝癌細(xì)胞由本院保存，清潔級(jí)BALB/C小鼠由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。MTS細(xì)胞增殖分析試劑由Promega公司提供。EPLCSXL流式細(xì)胞分析儀為Becman
7、Coulter公司產(chǎn)品,全波長酶標(biāo)儀為為Thermo公司產(chǎn)品，R206D旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器為上海申生科技有限公司產(chǎn)品?！ ?方法 2.1花椒揮發(fā)油制備使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器提取花椒果皮揮發(fā)油并過濾除菌，稱取適量揮發(fā)油加入5%Tin，用RMPI1640無血清培養(yǎng)基或生理鹽水稀釋成所需要的濃度?！ ?.2細(xì)胞增殖分析 將對(duì)數(shù)生長期的H22細(xì)胞以4×107/L細(xì)胞數(shù)接種于圓底96孔培養(yǎng)板,每孔50μl。37℃培養(yǎng)24h后,向孔內(nèi)直接加入含不同濃度（8，4，2，1，0.5mg/ml）花椒揮發(fā)油的RPMI1640培養(yǎng)基50μl。在加入藥物后選定的時(shí)間點(diǎn)(24，48，72h
8、),向每孔中加入20μlMTS試劑,37℃繼續(xù)保溫2h顯色,于490nm波長下讀取OD值?！ 〖?xì)胞生存率（％）=OD藥物/
