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1、水通道蛋白1在鼻息肉中的表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制論文【摘要】研究水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)在鼻息肉組織中的表達(dá),探討其與鼻息肉水腫形成及發(fā)展的關(guān)系。方法：取鼻中隔偏曲矯正術(shù)患者下鼻甲黏膜30例和鼻息肉組織60例。鼻息肉組Ⅱ型1期10例,2期15例,3期25例，Ⅲ型10例。采用免疫組織化學(xué)檢測AQP1在不同類型及不同臨床分期鼻息肉和下鼻甲黏膜組織中的表達(dá)及在不同類型鼻息肉組織中的表達(dá)。結(jié)果：（1）鼻息肉上皮層AQP1陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于下鼻甲黏膜(Ｐ＜001);不同分型分期鼻息肉上皮層AQP1的陽性細(xì)胞數(shù)又有差異,Ⅱ型3期
2、和Ⅲ型鼻息肉顯著低于Ⅱ型1期鼻息肉(Ｐ＜001);而在鼻息肉血管內(nèi)皮及腺體細(xì)胞中的AQP1的表達(dá)明顯高于下鼻甲(Ｐ＜001);（2）Ⅱ型3期和Ⅲ型鼻息肉血管內(nèi)皮中AQP1陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于Ⅱ型1期鼻息肉和下鼻甲黏膜上皮下組織(Ｐ＜001)。結(jié)論：AQP1在鼻息肉組織中的異常表達(dá)可能與鼻息肉的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究?！娟P(guān)鍵詞】水通道蛋白1鼻息肉免疫組織化學(xué)［ABSTRACT］Objective:Toexploretheexpressionanddistributionofaquaporin1(AQP1)inthefo
3、rmationanddevelopmentofnasalpolyps.Methods:ThirtycasesofnormalinferiorturbinatesandsixtycasesofnasalpolypsinedbytheElivisionplusimmunohistochemistrytechnique.Results:(1)PositiveAQP1cellsintheepithelialcelllayerofnasalpolypsorethanthoseofthetypeⅢortypeⅡphase3(P＜0.01).(2)
4、PositiveAQP1cellsinboththevesselendotheliumandtheglandularepitheliumfromthetypeⅢ,typeⅡphase3ofnasalpolypsorethanthosefromthetypeⅡphase1nasalpolypsandtheinferiorturbinate(P＜0.01).Conclusion:AQP1mightplayanimportantroleintheformationanddevelopmentofnasalpolyps.Exploration
5、oftheregulationofAQP1contributestomunohistochemisty鼻息肉是耳鼻喉科常見病，發(fā)病率較高，復(fù)發(fā)性強(qiáng)［1］。臨床上最常見的病理類型是水腫型(約占總數(shù)的85%90%)，其具體發(fā)生機(jī)制尚不明確［2］?，F(xiàn)認(rèn)為鼻息肉的發(fā)病是多因素、多步驟的過程，涉及眾多復(fù)雜的病理機(jī)制。AQP1是上世紀(jì)80年代末由Agre發(fā)現(xiàn)的第一個水通道，被稱為原型水通道。AQP1在人體內(nèi)分布廣泛，存在于不同的組織器官中.freel厚，HE染色和ElivisionPlus二步法免疫組化染色。脫蠟、入水，3%甲醇過氧化氫液室溫處理
6、切片，微波修復(fù)抗原，滴加一抗AQP1單克隆抗體（1∶200）于切片上，4?℃過夜，嚴(yán)格按照ElivisionPlus二步法免疫組化染色操作，DNB顯色，蘇木精復(fù)染，脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片，顯微鏡下觀察。每批均以已知人腎曲小管陽性切片為陽性對照，用PBS液代替一抗同步染色作為陰性對照。1.3結(jié)果判斷采用雙盲法，每張切片由兩位病理醫(yī)生分別判定計(jì)數(shù)，兩人計(jì)數(shù)相差10%以上重新計(jì)數(shù)。AQP1蛋白定位于細(xì)胞漿內(nèi)，棕黃色或棕紅色顆粒為陽性細(xì)胞。每張切片在×200倍鏡下隨機(jī)選擇5個視野，計(jì)數(shù)鼻息肉中的陽性細(xì)胞，取其平均數(shù)作為陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)（
7、±s）。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS10.0軟件包,兩組均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較用方差分析。2結(jié)果2.1病理結(jié)果陰性對照均不著色，陽性對照片中見人腎曲小管胞漿呈明顯棕黃色。下鼻甲黏膜AQP1陽性表達(dá)主要位于黏膜上皮細(xì)胞和黏膜固有層腺體。在毛細(xì)血管內(nèi)皮及血竇內(nèi)皮表達(dá)較弱。在鼻息肉組織中AQP1蛋白多位于上皮下腺體及毛細(xì)血管、血竇內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中，染色較強(qiáng)，而在上皮細(xì)胞中則呈弱陽性表達(dá)或陰性表達(dá)（圖15）。根據(jù)Kakoi分型［5］：水腫型占89%，腺囊泡型占8%，纖維型占3%。鼻息肉Ⅲ型，黏膜上皮細(xì)胞中AQP1蛋白多陰性表達(dá)，黏膜下部
8、分嗜酸性粒細(xì)胞AQP1表達(dá)陽性（×400）鼻息肉Ⅲ型，AQP1蛋白在較多血管內(nèi)皮細(xì)胞中呈陽性表達(dá)（×200）鼻息肉Ⅱ型3期，AQP1蛋白在較多腺樣細(xì)胞中呈陽性表達(dá)（×200）鼻息肉Ⅱ型1期，AQP1蛋白在上皮層呈陽性表達(dá)
