超濾膜純化當歸多糖的研究論文

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1、超濾膜純化當歸多糖的研究論文.freelAngelicasinensisbyultrafiltrationtechnology.MethodsExtractofpolysaccharideofAngelicasinensisembrane,theseparationparametersonmembraneseparationefficiencyofpolysaccharideofAngelicasinensisizedbyandorthogonaltest.ResultsPolysaccharideofAngelicasinensisembrane.Thecontentso

2、fpolysaccharideainponentofAngelicasinensispolysaccharideumconditionofultrafiltrationesofextractvolume,35℃,0.3MPa.ConclusionThetechnologypleandavailable,andthecontentofAngelicasinensispolysaccharideL,濃硫酸用量為6.0mL,放置于40℃的水浴中10min后,冰浴5min,檢測波長490nm。2.2標準曲線的繪制精密吸取標準葡萄糖溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分別

3、置10mL具塞試管中,分別加水至2.0mL,各精密加入5%苯酚溶液1.0mL,搖勻,迅速精密加入濃硫酸6mL,搖勻,置于40℃水浴10min,取出,置冰水浴中5min,取出,以相應的試劑為空白,照紫外-可見分光光度法2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅤA,立即在490nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線?；貧w方程為：A＝61.29C＋0.0015,r＝0.9991,葡萄糖濃度在0.0032～0.0159mg/mL間與吸光度呈良好的線形關系。2.3當歸多糖含量測定取經超濾的各組分約0.5g分別用蒸餾水溶解定容至25mL,精密吸取2mL

4、,加95%乙醇10mL離心,取沉淀置50mL容量瓶中,用蒸餾水定容,精密吸取樣品2mL,按“2.2”項下方法測定。2.4當歸多糖超濾提取工藝根據(jù)正交試驗確定制備工藝流程為：水提(8倍量水,回流提取3次,每次1.5h,合并濾液)→離心→微濾→超濾→截留液→除蛋白→醇析→噴霧干燥產品。該工藝路線能有效去除提取液中的微塵、粗纖維、膠質等大分子物質,經超濾裝置進行超濾,可得截留濃縮液。醇析中乙醇濃度對多糖含量有重要影響,根據(jù)正交試驗確定用70%乙醇進行醇沉,醇析效果最佳。2.5當歸多糖超濾工藝條件的優(yōu)選2.5.1不同孔徑膜分離效果比較膜的孔徑或截留相對分子質量的選擇雖然主要是根據(jù)被

5、分離物的相對分子質量大小來確定,但分子的實際尺寸與其構型、聚集狀態(tài)有關,而且還與溶液的濃度有關。由于提取得到的料液粘度較大,高分子膠體物質較多,膜污染現(xiàn)象嚴重,因此,采用0.1μm的膜先微濾,除去大分子雜質,再分別選用截留相對分子質量為200、100、50、20kD的4種膜,對有效成分截留率及產品多糖含量進行比較。綜合考慮,選用截留相對分子質量200kD的膜所得到產品中當歸多糖含量高。見表1。表1不同超濾膜的截留結果（略）2.5.2膜分離操作參數(shù)的選擇采用正交試驗法,以當歸多糖含量為指標,就加水量(A)、操作壓力(B)、料液溫度(C)對分離效果進行考察。正交設計因素水平見表

6、2,正交試驗結果及直觀分析見表3,方差分析見表4。表2因素與水平（略）表3膜分離當歸多糖的正交試驗結果和直觀分析（略）表4以當歸多糖含量為指標的方差分析（略）注：F0.05(2,2)＝19.00由直觀分析可見,影響因素的主次關系為：A＞B＞C。方差分析表明,A和B因素對當歸多糖含量有顯著影響,C因素對當歸多糖含量沒有顯著影響。因此,選擇膜分離最佳的操作參數(shù)為：加水倍數(shù)為1倍,壓力0.3MPa,料液溫度35℃。稱取藥材按A1B1C1進行驗證試驗,結果與正交試驗結果吻合,說明工藝可行。3討論綜合截留率、得率兩方面,選用截留相對分子質量200kD的膜較合適,截留物7.81g,當歸

7、多糖含量為65.42%。為了提高膜的工作效率,保持有效成分的穩(wěn)定性。膜分離最佳的操作參數(shù)為：加水倍數(shù)為1倍,壓力0.3MPa,料液溫度35℃。使用超濾純化無需有機溶劑,也不需要加熱,能根據(jù)所需的不同分子量范圍去除雜質,得到純度較高的多糖。當歸多糖經超濾后,與只用醇沉工藝的粗多糖比較,總提取物由約14.80g下降到7.81g,多糖純度由30.47%提高到65.42%。本試驗結果表明,對當歸水提液進行超濾較單純醇沉法能更有效地保留多糖成分,去除雜質,提高制劑的穩(wěn)定性。并且通過選擇適宜的超濾膜及膜分離參數(shù),可以達到比單用