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《當(dāng)歸多糖的分離、純化及分析鑒定論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、當(dāng)歸多糖的分離、純化及分析鑒定論文.freelolL-1NaOH處理得到當(dāng)歸多糖亞組分AP-2;所剩上清,用乙酸處理后,再用乙醇沉淀,得到當(dāng)歸多糖亞組分AP-3.總糖含量測定采用改良苯酚-硫酸法;蛋白質(zhì)含量測定采用ServaBlue-G染料結(jié)合法;糖醛酸含量測定采用間羥基連苯法.采用新華中速濾紙紙色譜和硅膠G薄層色譜分析多糖各組分的單糖組成.高效凝膠過濾色譜和高效離子交換色譜分析多糖各組分的Mr分布和電荷性質(zhì).紅外光譜法分析多糖各組分的糖苷鍵構(gòu)成.結(jié)果AP-0總糖970gkg-1,其中糖醛酸210gkg-1,蛋白質(zhì)30gkg-1;AP-1總
2、糖970gkg-1.freelepolysaccha-ridesfractionsfromAngelicasinensis(Oliv.)Dielsandtoan-alyzeandtodeterminethecharactersofeachfraction.METHODSHotethodployedtoisolatetotalpolysaccharide(namedAP-0)fromfreshrootsofAngelicasinensis.BytreatingAP-0ethylammoniumBromid(CTAB),theAP-1thepr
3、ecipitate.AP-2theprecipitatebytreatingthesupernateleftfromprecedingstepolLNaOH.Aftertreatingtheleftsupernateountsoftotalcarbohydrates,proteinsanduronicacidsinedprovedphenol-sulfuricacid,ServaBlueGdyebindingandm-hydroxyldiphenylmethods,respec-tively.Themonosaccharidescontai
4、nedineachpolysaccha-ridesatographyandthin-layerchromatography.Highperformancegelfiltrationchro-matographyandhighperformanceanion-exchangechro-matographyployedtodeterminetherelativemolecu-larmassesandchargecharactersofeachpolysaccharides.In-fraredspectrophotometerple.RESULT
5、SFourAngeli-capolysaccharidesonosaccharidesconstituentsoftheFourAngelicapolysaccharidessuggestedthattheglucosidebondsbeα-D-glucopy┐ranose.CONCLUSIONMethodsofpurificationandanalysisicalcharacters.0引言多糖作為一類重要的生物大分子,具有廣泛的生物學(xué)作用[1,2],但由于多糖分離純化和結(jié)構(gòu)分析等多方面的限制,大多數(shù)多糖仍作為有效部位或條件提取物進(jìn)行應(yīng)用
6、.藥理學(xué)研究,要求所用藥物應(yīng)具有均一、可控的理化性質(zhì),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性和可比性.我們參考梅其炳等[3-6]和Yamada等[7-9]當(dāng)歸多糖的提取與分離方法,建立了從中國當(dāng)歸中分離提取出總多糖,并進(jìn)一步分離純化得到不同多糖組分的方法;并對所得到的多糖組分的理化性質(zhì)進(jìn)行分析.1材料和方法1.1材料新鮮中國當(dāng)歸[Angelicasinensis(Oliv)Diels],于霜降后3d,采自甘肅省岷縣城郊鄉(xiāng)疊藏河谷地.950gkg-1乙醇(AR),透析袋(截留Mr8000,購自華美生物工程公司),十六烷基三甲基溴化銨(AR,西安化學(xué)試劑采供站
7、),硼酸、氫氧化鈉、乙酸、濃硫酸、四硼酸鈉、正丁醇、乙酸乙酯、吡啶、乙酸苯胺、鄰苯二甲酸(均為AR,西安化學(xué)試劑廠生產(chǎn)).苯酚(AR重蒸餾,華美生物工程公司).間羥基連苯(AR,美國Sigma公司).ServaBlue-G(德國ServaFeinbochemic).牛血清白蛋白(華美生物工程公司).溴化鉀(GR,西安化學(xué)試劑廠).新華中速濾紙(杭州新華試紙廠).碳酸鋇(CP,天津化學(xué)試劑廠).D-葡萄糖(AR,西安化學(xué)試劑廠).L-阿拉伯糖(AR,Sigma),D-木糖(中國醫(yī)藥公司德國進(jìn)口分裝),D-甘露糖(上海試劑二廠),D-半乳糖(北
8、京市化學(xué)試劑研究所),D-鼠李糖(北京化學(xué)試劑公司),D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸(SigmaChemical),硅膠G、羧甲基纖維素(天津化學(xué)試劑廠),F(xiàn)lukaDextra