霍山石斛多糖的分離純化及結構鑒定

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1、霍山右斛多糖的分離純化及結構鑒定摘要霍山石斛屬于蘭科,多年生草木植物,主要分布于中國安徽省霍山縣,是我國最早有記載的石斛類屮藥材,具有巨大的藥用價值和市場潛力。多糖是霍山石斛中最主要的活性成分之一,研究發(fā)現霍山石斛多糖貝有抗氧化、抗腫瘤、抗白內障以及提高機體免疫力等作用。本文以霍山石斛為材料,成功分離純化了一種多糖DHP-W2,對它的結構進行了詳細的解析,并對DHP?W2的抗糖基化活性進行了初步的研究。通過不同濃度TCA對多糖脫蛋白率和多糖損失率關系的比較,發(fā)現0.5%TCA脫蛋白效果較好且多糖損失率較低,因此釆用0.5%TCA對經熱水浸提得到的霍山石斛粗多糖進行脫蛋白?;羯?/p>

2、石斛粗多糖經DEAE■纖維素離子交換樹脂,SephacrylS-200分離純化得到一單一組分DHP?W2。經高液相凝膠滲透色譜測定其分了量為7.3x104Dao紅外光譜掃描分析表明它是典型的多糖類化合物,紫外光譜分析表明其不含蛋白質、核酸等雜質,全水解分析表明DHP?W2主要由葡萄糖(G1c)、木糖(Xy1)和半孚L糖(Gal)按1.1:1.0:0.5的分子摩爾比以及少量的半乳糖醛酸組成。甲基化分析和核磁共振波譜分析表明,DHP-W2的主鏈曲1,6■連接和1,4■連接的p-D-glucose組成,分枝點位于O-4/6;DHP-W2的枝鏈由1,4■連接的a-D-xylose.1

3、,2,4-連結的a-D-xylose以及末端殘基a-D-xylose>a-D-galactose和a-D-galacturonicacid組成。對DHP-W2的體外抗蛋白質非酶糖基化活性進行了初步的研究表明DHP?W2具冇明顯的體外抗蛋白質非酶糖基化活性。關鍵詞:霍山石斛;多糖;結構;抗糖基化活性PurificationandidentificationofpolysaccharidesisolatedfromDendrobiumhuoshanenseABSTRACTDendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng(Orchidaceousap

4、erennialherbalplantandmainlydistributeinHuoshancounty^AnhuiprovinceofChina>Z)./7wo5/z(7A?ez75eisoneoftheearliestrecordedmedicinalplantsinChina.andpossessesprominentmedicinalvalueandenormousmarketdemand.RecentresearchindicatesthatpolysaccharidesareoneofmajoractiveingredientsofZ)

5、7ew5eandpossessesavarietyofbioactivities,includingantioxidation,antitumour,immunityimprovementandanticataract.Inthispaper,DHP-W2wassuccessfullyisolatedfromD./zw^^/z^we/v^e.anditsstructurefeaturesandanti-glycatedactivitywereinvestigatedrespectively.Comparisonbetweenremovalrateofproteinandlos

6、srateofpolysaccharideindifferentconcentrationsofTCAindicatedthatl.5%TCAwasmostappropriatelyusedtoremoveprotein.ThccrudcpolysaccharidcofZ)./?w€>5/2t7wew5ewasfractionatcdbyDEAE-celluloseanion-exchangeandgelfiltrationchromatographyofSephacrylS-200,givingonepurefractionDHP-W2.Itsmolecularweight

7、wasdctcrmincdtobc7.3x104byhigh-pcrformanccgcl-pcrmcationchromatography.TheinfraredspectraanalysisrevealedthatDHP-W2wasatypicalpolysaccharideandtheultravioletanalysisindicatedthatDHP-W2didnotcontainproteinsandnucleicacids.DHP-W2wascomposedofglucose.xylose

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