玉樹獐牙菜對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)及肝糖原的影響

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1、玉樹獐牙菜對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)及肝糖原的影響作者:丁莉,陳志,金蘭,羅桂花【摘要】目的研究玉樹獐牙菜對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用。方法采用一次性腹腔注射四氯化碳花生油(0.12%)方法制作染毒小鼠模型,分別給予不同劑量玉樹獐牙菜對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行干預(yù)性保護(hù),測(cè)定不同實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的生化指標(biāo)。結(jié)果該藥能明顯降低四氯化碳引起的小鼠血清ALT,AST升高;提高肝糖原含量。結(jié)論玉樹獐牙菜對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷具有一定的保護(hù)作用?!娟P(guān)鍵詞】玉樹獐牙菜;四氯化碳;肝損傷;肝糖原  TheProtectiveEffectofHerbaSentalLiverInjuryandtheGlycoge

2、nContentofLiverinMice  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsofHerbaSice.MethodsThemodelofliverinjuryixedandlivertissueicalindexesexaminationALTandASTcausedbyCCl4;theglycogencontentofliverdamageussotllFranch,藏茵陳的一種,屬龍膽科(Gentianaceae)植物,生于海拔2800~4000m的高寒地區(qū),主要產(chǎn)于玉樹一帶。亦叫川西獐牙菜。一年生

3、草本,全草入藥,有清熱解毒,舒肝利膽之功效,對(duì)急慢性黃疸型肝炎、病毒型肝炎和黃疸型肝炎有很好的治療效果,為肝炎特效藏藥植物[1]。目前對(duì)藏茵陳的藥理和化學(xué)性質(zhì)的研究有諸多報(bào)道,而對(duì)川西獐牙菜的報(bào)道卻很少。本文通過(guò)觀察不同劑量的玉樹獐牙菜對(duì)四氯化碳性肝損傷模型血清ALT,AST和肝糖原的含量影響,研究該藥對(duì)動(dòng)物化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用,為玉樹獐牙菜在臨床上應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ),同時(shí)為開發(fā)利用這一天然高寒植物資源提供科學(xué)依據(jù)?! ?材料與方法  1.1材料  1.1.1動(dòng)物昆明種健康小鼠雌雄各一半,體重18~20g(由蘭州生物制品廠提供)?! ?.1.2藥品和試劑醇提取的玉樹

4、獐牙菜浸膏;四氯化碳試劑(分析純,在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用花生油配制成含CCl40.12%的試劑,由廣東西隴化工廠生產(chǎn));食用魯花花生油;吐溫80;谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALS)試劑盒(由南京建成生物工程研究所提供)?! ?.1.3儀器與設(shè)備721分光光度計(jì);高速冷凍離心機(jī);低溫冰箱;電熱水浴鍋等?! ?.2方法  1.2.1玉樹獐牙菜藥物的提取將該藥粉碎稱取1kg加8L食用酒精回餾煮2h,濾出提取液,再加8L的食用酒精重復(fù)3次合并提取液并濃縮(回收酒精)在60℃的烘箱里烘干,實(shí)驗(yàn)用時(shí)用花生油∶吐溫80∶水為1∶1∶8配制生藥:濃度為0.5,0.17,0.06g/ml?!?/p>

5、 1.2.2小鼠的處理將70只小鼠在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)2d后,按體重隨機(jī)分為A組(正常對(duì)照組)、B組(CCl4肝損傷組)、C組(低劑量玉樹獐牙菜組)、D組(中劑量玉樹獐牙菜組)、E組(高劑量玉樹獐牙菜組)。自由攝取常規(guī)顆粒狀飼料和自來(lái)水,空白對(duì)照組不做任何處理,CCl4模型組用藥物助溶劑以10ml/kg劑量按體重給藥1個(gè)星期,藥物組高、中、低3個(gè)劑量組分別按6.4,2.1,0.75g/kg體重灌胃給藥6周。末次給藥后2h,除空白對(duì)照組的小鼠外,其它各組均按以10ml/kg的劑量按體重一次性腹腔注射0.12%CCl4花生油溶劑,禁食不禁水,13h后斷頸取血,并取肝組織冷凍?! ?.

6、2.3血清樣處理在3500r/min,離心15min,取上清液低溫保存?! ?.2.4ALT活性測(cè)定參照改良賴氏法測(cè)定[2]血清中的ALT能與丙氨酸和α-酮戊二酸反應(yīng)生成丙酮酸及谷氨酸,丙酮酸與2,4-二硝基苯肼生成2,4-二硝基苯腙在堿性液中顯棕紅色,在505nm處有最大吸收值。先用丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)液作標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后測(cè)定樣品的吸光度,查閱標(biāo)準(zhǔn)曲線,并且乘以血清稀釋倍數(shù),計(jì)算ALT的活力。  1.2.5AST活性測(cè)定參照改良賴氏法測(cè)定[2]血清中的AST能與天冬氨酸和α-酮戊二酸反應(yīng)生成草酰乙酸和谷氨酸,草酰乙酸與2,4-二硝基苯肼生成2,4-二硝基苯腙在堿性液中顯棕紅色,在5

7、05nm處有最大吸收值。同上法計(jì)算AST的活力?! ?.2.6肝糖原的測(cè)定小鼠于末次給藥30min后,立即處死取出肝臟,經(jīng)生理鹽水空白漂洗,濾紙吸干,精確稱取肝臟100mg于試管內(nèi),加入8ml三氯醋酸勻漿1min,3000r/min,離心15min。取上清液于另一支試管內(nèi),用蒽酮法于650nm處測(cè)其吸光度測(cè)定肝糖原含量[3]?! ?.2.7數(shù)據(jù)處理所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示采用t檢驗(yàn)?! ?結(jié)果  2.1對(duì)血清中ALT和AST的含量的影響結(jié)果見(jiàn)表1?! ”?玉樹獐牙菜提取液對(duì)CCl4肝損傷小鼠血清ALT和AST的影響(略)  與空

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