抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織tgf

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1、抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織TGF作者:陳俊紅王繼孟令權(quán)郭文有【摘要】  目的探討抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響。方法采用四氯化碳(CCl4)法復(fù)制大鼠肝纖維化模型,應(yīng)用免疫組化方法觀察抑肝纖及拆方對肝纖維化模型大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1表達(dá)的影響。結(jié)果各組動物治療后,肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)量均有不同程度的降低,其中抑肝纖全方組較其他用藥組下降明顯。結(jié)論中藥復(fù)方抑肝纖及拆方可有效防治大鼠肝纖維化,尤以抑肝纖全方作用最佳,其作用機(jī)

2、制可能是通過抑制肝纖維化組織TGF-β1,PAI-1蛋白的表達(dá)實現(xiàn)的。【關(guān)鍵詞】肝纖維化中醫(yī)治法TGF-β1PAI-1免疫組化  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofYiganxiandecoctionanditsseparateddecoctionontheexpressionofTGF-β1andPAI-1protEininlivertissueofhepaticfibrosisinrats.MethodsLiverfibrosismod

3、elratsethodofimmunohistochemistry.ResultsAftertreatmentedication,thepositiveexpressionofTGF-β1andPAI-1protEIninlivertissueodel.Yiganxiandecoctionisthemosteffective.Itsmechanismmayberelatedmunohistochemistry  肝纖維化是肝臟對各種因素所致的慢性損傷的一種修復(fù)反應(yīng),是大多數(shù)慢性肝病所共有的病理過

4、程,也是各種慢性肝病向肝硬化過度的中間環(huán)節(jié),其特征是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,ECM)在肝內(nèi)過度沉積[1]?! ≈兴帍?fù)方抑肝纖是王繼教授治療肝病的經(jīng)驗方,我們在前期實驗研究中業(yè)已證實抑肝纖對肝纖維化有一定抑制、逆轉(zhuǎn)作用[2]。本實驗按中醫(yī)治療原則進(jìn)行拆方研究,觀察抑肝纖全方及拆方對肝纖維大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響,旨在從更深層次上探討抑肝纖方的抗肝纖維化作用機(jī)理及組方規(guī)律?! ?材料  1.1動物  健康雄性IAS病理圖像分析系統(tǒng)檢測陽性表達(dá)的面密

5、度。檢測方法嚴(yán)格按照說明書操作?! ?.5統(tǒng)計學(xué)處理  計量資料的各變量均采用±s表示,應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-WayANOVA)。組間兩兩比較用LSD法?! ?結(jié)果  2.1肝組織TGF-β1免疫組織化學(xué)染色及圖像半定量分析TGF-β1在正常肝細(xì)胞中極少量表達(dá);模型組大鼠肝組織TGF-β1表達(dá)明顯增強(qiáng),陽染細(xì)胞數(shù)目增多,呈棕黃色胞漿型分布;經(jīng)治療后,各治療組陽染程度較模型組均明顯減輕,陽染細(xì)胞數(shù)目明顯減少,以抑肝纖全方組減輕最明顯。免疫組化圖像半定量分析結(jié)果見表

6、1。表1各組大鼠肝組織TGF-β1蛋白表達(dá)結(jié)果比較(略)  2.2肝組織PAI-1免疫組織化學(xué)染色及圖像半定量分析N組大鼠肝組織中PAI-1微弱表達(dá);模型組大鼠肝組織PAI-1表達(dá)明顯增強(qiáng),陽染細(xì)胞數(shù)目增多,PAI-1陽性染色為棕黃色。經(jīng)治療后,抑肝纖組、丹參、川芎組、黃芪、白術(shù)組陽染程度較模型組明顯減輕,以抑肝纖全方組減輕最明顯。鱉甲、牡蠣組減輕不明顯。免疫組化圖像半定量分析結(jié)果見表2。表2各組大鼠肝組織PAI-1蛋白表達(dá)結(jié)果比較(略)  3討論  中醫(yī)整體觀認(rèn)為,人體是一個有機(jī)的整體,“肝病

7、傳脾”“肝腎同源”及“肝膽表里”等臟腑關(guān)系,決定了肝臟病的中醫(yī)臟腑病機(jī)是以肝為中心、肝脾腎膽胃功能的失調(diào)。在治療肝臟疾病時,不能單純考慮肝之一臟,而應(yīng)注意調(diào)整肝臟與其他臟腑的關(guān)系,多層次多角度地考慮治肝方法?! ∫指卫w針對慢性乙型肝炎肝纖維化本虛標(biāo)實,虛淤共存,肝脾不和,氣滯血淤的病機(jī),主要由益氣活血、軟堅散結(jié)等藥物組成。方中黃芪、白術(shù)益氣健脾,取“肝病實脾”之意;丹參為活血化淤良藥,古云:“一味丹參飲,功勝四物湯”,其活血作用可解肝郁,使血能養(yǎng)肝,正針對肝血淤這一肝纖維化關(guān)鍵;川芎辛散溫通,既

8、能活血祛淤,又能行氣開郁,為血中之氣藥?!毒V目》謂川芎“肝苦急,以辛補(bǔ)之,故血虛者宜之,辛以散之,故氣郁者宜之”;柴胡舒肝解郁,宣暢氣血;鱉甲、牡蠣軟堅散結(jié)。方中各藥協(xié)同作用,用后使正氣旺盛,血行通暢,積塊自消?! 「涡菭罴?xì)胞(HSC)是調(diào)控肝臟ECM沉積的最重要細(xì)胞,其激活是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。TGF-β1是HSC產(chǎn)生ECM的主要刺激物。TGF-β1不僅促成HSC轉(zhuǎn)化為肌成纖維母細(xì)胞(MFB),而且能誘導(dǎo)ECM基因的表達(dá)上調(diào),刺激ECM的合成,而刺激肝纖維化進(jìn)程,如果阻斷TGF-β1合成可

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