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《復(fù)合bfgf緩釋微球的制備與性能測定論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、復(fù)合bFGF緩釋微球的制備與性能測定論文劉銳，黃沙，金巖，吳紅，姜玲，劉濤【關(guān)鍵詞】,堿性成纖維細(xì)胞生長因子PreparationandcharacteristictestofbFGFimpregnatedmicrosphere【Abstract】AIM:Topreparethebasicfibroblastgropregnatedmicrosphereandtostudyitscharacteristics.METHODS:ThebFGFimpregnatedmicrosphereprovedemulsifiedcoldcondensatio
2、nmethod.Thephysicalproperties,drugcontentandencapsulationeasuredbyELISA.RESULTS:Theaveragediameterofmicrosphere,theaveragedrugcontentthesecondtothefifthdayand93.94%bytheseventhday.CONCLUSION:Thepreparationmethodissimple,rapidandaccurateandthereleaseofbFGFfromthemicrospheresc
3、anbesustainedforalongertime.【Keyicrosphere;sustainedrelease;encapsulation【摘要】目的：制備復(fù)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）的可降解緩釋微球，考察其各項性能，為進一步應(yīng)用于組織工程奠定基礎(chǔ).方法：采用改良的乳化冷凝法交聯(lián)制備復(fù)合bFGF的緩釋微球.freel；平均載藥率為0.24%，平均包裹率為96.82%.d1體外釋放28.23%，2~5d時累積釋放率達到57.19%,d7時釋放減慢且累計濃度為93.94%.結(jié)論：復(fù)合bFGF的緩釋微球制備工藝簡便，性能優(yōu)良；可在較
4、長時間內(nèi)持續(xù)釋放活性bFGF，與組織工程支架的結(jié)合應(yīng)用具有可行性.【關(guān)鍵詞】堿性成纖維細(xì)胞生長因子；微球；緩釋；包裹率0引言生長因子的應(yīng)用一直是組織工程領(lǐng)域的重要課題之一.它具有多種生物學(xué)活性，可提供有利于細(xì)胞生長的微環(huán)境，促進新生組織血管生成等［1］.但由于生長因子半衰期短，溶液進入體內(nèi)后迅速擴散、變性或酶解，難以保持其生物活性［2］.我們制備復(fù)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basicfibroblastgrog/L，等電點9.6，Sigma公司)，人bFGF定量EIA試劑盒（QuantiKineR,RDsystems），250g/L戊二醛，丙酮
5、，異丙醇，無水乙醚，液體石蠟，氨基乙酸為國產(chǎn)分析純，Span80(Sigma公司)為進E1分析純，水為雙蒸水，JJ1型精確電子攪拌器儀，TGL16G高速離心機，GENESIS凍干機(Virtis公司)，BX41數(shù)碼顯微鏡（Olympus).1.2方法1.2.1復(fù)合生長因子微球的制備將含有10g/LSpan80的液體石蠟30mL置于三口瓶中預(yù)熱至55℃，快速攪拌下滴加入同樣溫度的明膠水溶液4mL，并調(diào)節(jié)攪拌速度至450r/min，繼續(xù)攪拌10min；形成油包水乳劑后迅速改冰浴，繼續(xù)攪拌10min，使其完成固化；加入250g/L戊二醛0.1mL，攪
6、拌下預(yù)固化2h，4℃固化24h，用適量丙酮、異丙醇、乙醚洗滌，揮去乙醚，真空干燥，得淡黃色粉末狀微球，將200μL的bFGF溶液滴加在20mg的凍干明膠微球上，在室溫下保持30min以使bFGF完全融入微球.鈷60照射滅菌封存.以丙酮為分散劑將空白微球樣本及含有bFGF的微球樣本置于光鏡下，觀察其外形及分散度.同時測量500個微球的直徑計算其平均粒徑.以算術(shù)平均徑為微球的平均粒徑，計算公式為：平均粒徑=n1d1+n2d2+…+nndn/n1+n2+n3+…+nn式中n1,n2…nn為粒子數(shù)，d1,d2…dn為粒徑.1.2.2微球含量及緩釋性能測
7、定根據(jù)人bFGF定量EIA試劑盒說明書配置標(biāo)準(zhǔn)液，在492nm處測各孔A值.以標(biāo)準(zhǔn)品0，8，16，31，62，125，250和500ng/L之A值作出標(biāo)準(zhǔn)曲線并擬合線形回歸方程.取微球樣品20mg,放入PBS緩沖液中，加熱至完全溶解，冷卻后再用緩沖液稀釋定容.測出A492nm值，然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處相應(yīng)bFGF含量，并由此計算出微球的載藥率以及標(biāo)準(zhǔn)率.載藥率=（bFGF質(zhì)量/緩釋微球質(zhì)量）×100%.包裹率=（bFGF質(zhì)量/緩釋微球中bFGF理論質(zhì)量）×100%.取緩釋微球(2mg)，用PBS緩沖液100mL作為溶出介質(zhì).藥物體外溶出儀的溫度保
8、持在(37.0±0.5)℃．磁力攪拌轉(zhuǎn)速100r／min.分別于各時間點(1，2，3，4，5，6，7d)取樣100μL.每次取樣后，立即補充同溫度的P
