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《齒瓣石斛多糖提取及脫蛋白工藝研究論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、齒瓣石斛多糖提取及脫蛋白工藝研究論文趙俊凌，馬潔，李戈，段立勝【摘要】目的通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)齒瓣石斛多糖的提取工藝、脫蛋白條件進(jìn)行優(yōu)化研究。方法采用苯酚-硫酸法考察提取溫度、提取時(shí)間及溶劑體積等因素對(duì)多糖提取的影響,采用比色法考察樣品與萃取劑體積比、萃取劑體積比、振蕩時(shí)間等因素對(duì)多糖脫蛋白的影響。結(jié)果多糖提取的最佳條件，提取溫度100℃，提取時(shí)間2h，加水量200ml，提取2次.freelin。結(jié)論苯酚-硫酸法簡(jiǎn)單，易操作，可測(cè)定齒瓣石斛中多糖含量?！娟P(guān)鍵詞】齒瓣石斛;多糖;提取工藝;脫蛋白;正交實(shí)驗(yàn)
2、石斛屬Dendrobium是蘭科中的第二大屬，全球共有約一千五百多種，主要分布于亞洲的熱帶和太平洋島嶼的東亞、東南亞及澳大利亞等地區(qū)，我國(guó)有76種(74個(gè)種，2個(gè)變種)主要分布于華南及西南地區(qū)。石斛作為一種名貴中藥被《本草綱目》收錄，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中也被列為上品，其有養(yǎng)胃生津、滋陰清熱、明目的功能,用于陰傷津虧,口干煩渴,食少干嘔,病后虛熱,目暗不明等癥狀?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)石斛屬植物具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗血小板聚集、擴(kuò)張血管、降低血糖等多種活性1，同時(shí)在治療胃腸道疾病和治療白內(nèi)障方面也
3、有很好療效。齒瓣石斛DendrobiumdevonianumPaxt為石斛屬植物，又名紫皮石斛或紫皮蘭，主要分布于我國(guó)的云南、廣西、貴州等省，緬甸、越南、老撾、泰國(guó)也較多，具有“滋陰益胃，生津止渴”之功效。我國(guó)及許多其它亞洲國(guó)家一直把齒瓣石斛的莖當(dāng)作生產(chǎn)楓斗的原料,主要用其當(dāng)年生的幼嫩莖加工生產(chǎn)紫皮楓斗、細(xì)黃草，或者替代緊缺的鐵皮石斛生產(chǎn)鐵皮楓斗，產(chǎn)品銷售國(guó)內(nèi)外，深得國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者的青睞，其價(jià)格和質(zhì)量?jī)H次于鐵皮石斛。近年來其價(jià)格呈上升趨勢(shì)，鮮品價(jià)格已達(dá)160元/kg，而紫皮楓斗的價(jià)格也達(dá)到2000～
4、4000元/kg2。國(guó)內(nèi)外對(duì)齒瓣石斛的藥理和化學(xué)成分的研究都相對(duì)較少。李滿飛等3報(bào)道了用比色法測(cè)定石斛多糖時(shí)測(cè)定了齒瓣石斛，其多糖含量為21.09%;熊麗萍等4報(bào)道了紫皮石斛14.27%,其水體液對(duì)超氧陰離子有抗氧化作用;吳剛等5報(bào)道了云南文山產(chǎn)齒瓣石斛的多糖含量37.05%;黎英等6報(bào)道了齒瓣石斛的水提物具有清除活性氧的活性;鄭志新等7報(bào)道了齒瓣石斛含有石斛多糖、礦質(zhì)元素、氨基酸等有效成分。目前以齒瓣石斛(紫皮石斛)為主的產(chǎn)品較單一，具有很大的市場(chǎng)潛力。本實(shí)驗(yàn)對(duì)齒瓣石斛多糖的提取及純化工藝進(jìn)行研
5、究，為齒瓣石斛開發(fā)利用提供參考。1材料與儀器1.1材料齒瓣石斛Dendrobiumdevonianum產(chǎn)地為云南省，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所王云強(qiáng)助理研究員鑒定。1.2試劑與儀器苯酚、濃硫酸、石油醚、無水乙醇、氯仿、正丁醇、丙酮、乙醚等均為分析純。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器R-210(瑞士布奇)，TU-1901新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-4(常州國(guó)華電器有限公司)，GZX-9140恒溫?cái)?shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊設(shè)備有限公司)，METTLERTOLEDO
6、系列分析天平AB135-S，PL203。2方法與結(jié)果2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3精密稱取105℃干燥恒重的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖100.0mg，置100ml容量瓶中，加蒸餾水適量使溶解，稀釋至刻度，搖勻。精密吸取10ml置100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，每毫升含葡萄糖0.1mg。2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇精密吸取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液0.3ml，置于具塞比色管中，加蒸餾水至2.0ml，再加苯酚試液1.0，搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0ml，蓋好塞子，迅速搖勻，放置5min，置沸水浴中加熱15min，取出，冷水迅速冷卻至室溫，作
7、為供試溶液。另以2.0ml蒸餾水同樣操作，作為空白對(duì)照，在400～600nm范圍對(duì)供試溶液進(jìn)行掃描。葡萄糖溶液在490nm波長(zhǎng)處有最大吸收度,齒瓣石斛多糖溶液在490.50nm波長(zhǎng)處有最大吸收度,故選490.50nm作為樣品的測(cè)量波長(zhǎng)。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線制作精取葡萄糖對(duì)照液，0.1，0.2,0.3,0.4,.freell，分別加入具塞比色管中，加蒸餾水使成2.0ml，各加苯酚試劑1.0ml，在旋轉(zhuǎn)混勻器上搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻，放置5min，置沸水浴中加熱15min，冷水迅速冷卻至室溫。
8、另以蒸餾水2.0ml同法操作，作為空白對(duì)照，在490nm處測(cè)其吸收度。以吸收度值為Y,葡萄糖濃度為X，得回歸方程：Y=0.00811+0.01731X，r=0.9995，說明該工作曲線在5.00～35.00μg間的線性良好。2.4精密度實(shí)驗(yàn)精取供試溶液5份，每份0.3ml，加蒸餾水使成2.0ml,各加苯酚試劑1.0ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線操作,測(cè)定其吸收度。測(cè)定結(jié)果，葡萄糖RSD=1.23%，齒瓣石斛RSD=0.74%，精密度較好。2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精取干燥后的樣品6份，分別提取，每份供試溶
