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《白花丹素的體外肝毒性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、白花丹素的體外肝毒性研究【摘要】目的觀察白花丹素在體外對(duì)4種腫瘤細(xì)胞的作用及其在體外對(duì)人胚肝細(xì)胞L-O2的毒性作用。方法采用MTT法檢測(cè)不同濃度白花丹素對(duì)腫瘤細(xì)胞和人胚肝細(xì)胞L-O2的毒性,比較其IC50值；采用紫外分光光度法測(cè)定白花丹素作用后肝細(xì)胞培養(yǎng)上清液中SOD,MDA,LDH值的變化。結(jié)果白花丹素在體外具有較強(qiáng)抗腫瘤作用，同時(shí)對(duì)人胚肝細(xì)胞L-O2有一定的毒性作用。結(jié)論白花丹素是優(yōu)良的抗腫瘤藥物，對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯毒性作用，同時(shí)具有一定肝毒性，使用時(shí)應(yīng)注意監(jiān)測(cè)肝功能?！娟P(guān)鍵詞】白花丹素；人胚肝細(xì)胞L-O2；肝
2、毒性 Abstract:ObjectiveTodetecttheantitumoreffectofplumbaginandthetoxicityofplumbaginonhumanlivercellL-O2invitro.MethodsMTTassayedtotestthetoxicityofplumbaginontumorcellandhumanlivercellL-O2.ThecontentsofSOD,MDAandLDHinculturalsupernateeasuredbyultravioletspec
3、trophotometry.ResultsPlumbaginhadstrongtoxicityontumorcells.PlumbagininhibitedtheproliferationofhumanlivercellL-O2inadose-dependentmanner.ConclusionPlumbaginisanexcellentantitumordrug.Plumbaginhastheinhibitoryeffectonproliferationoflivercells. Keybagin；Human
4、livercellL-O2；Toxicityoflivercell白花丹來源于藍(lán)雪科藍(lán)雪屬，主要分布于西南省份，廣西民間用于散瘡、消腫、通經(jīng)活絡(luò)，并治蛇傷、風(fēng)濕乳腺炎以及慢性氣管炎等癥。韋金育等［1］采用體外抗腫瘤藥物篩選MTT法對(duì)50種廣西常用中草藥、壯藥進(jìn)行抗腫瘤篩選，在稀釋1∶10時(shí)白花丹對(duì)肝癌細(xì)胞呈現(xiàn)明顯抑瘤作用，稀釋1∶100時(shí)白花丹仍有明顯抑瘤作用，在29種有抑瘤作用的藥物中，白花丹是具有明顯抑瘤作用的5種藥物之一，白花丹素(plumbagin5-羥基-2-甲基-1，4-萘醌)是白花丹的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，
5、近年的研究結(jié)果表明白花丹素是白花丹中具有抗腫瘤作用的主要成分［2,3］。一般來說，抗腫瘤作用強(qiáng)的藥物毒性也大，其對(duì)肝的毒性如何，未見有 2.5MTT法測(cè)定白花丹素的肝毒性按“2.4”項(xiàng)下方法在96孔培養(yǎng)板中加入人胚肝細(xì)胞L-O2懸液。待細(xì)胞完全貼壁后，實(shí)驗(yàn)孔加入系列濃度白花丹素20μl每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔，并設(shè)陰性對(duì)照孔和空白對(duì)照孔。培養(yǎng)箱孵育24，48h，同法測(cè)定白花丹素對(duì)人胚肝細(xì)胞L-O2的抑制率，計(jì)算平均抑制率及IC50值。 2.6紫外分光光度法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的SOD，MDA，LDH值取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的
6、人正常胚肝細(xì)胞L-O2用胰酶消化后，用RPMI-1640培養(yǎng)液吹打制成細(xì)胞懸液加入6孔培養(yǎng)板，每孔1.9ml，在5％CO2,37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h待細(xì)胞完全貼壁后，實(shí)驗(yàn)孔加入125μg·ml-1白花丹素標(biāo)準(zhǔn)品0.1ml，另設(shè)空白對(duì)照組。在藥物作用的12，24，48h后，取培養(yǎng)液的上清液按SOD，MDA，LDH試劑盒中所述方法進(jìn)行SOD，MDA，LDH的測(cè)定?！ ?.7統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS13.0軟件進(jìn)行處理。采用Bliss法求算IC50值?！ ?結(jié)果 3.1MTT法測(cè)定結(jié)果白花丹素組與
7、空白對(duì)照組比較，在31.25～500μg/ml濃度范圍內(nèi)，吸收度A值隨藥物濃度的增加逐漸減小，說明白花丹素對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖有顯著抑制作用，且具有劑量相關(guān)性。結(jié)果見表1。同時(shí)白花丹素具有一定的肝毒性。結(jié)果見表2。表1白花丹素對(duì)腫瘤細(xì)胞的IC50值（略）表2不同時(shí)間白花丹素L-02細(xì)胞株的毒性測(cè)定結(jié)果（略） 3.2SOD，MDA，LDH測(cè)定結(jié)果用紫外光光度法測(cè)定培養(yǎng)上清液中的SOD、MDA、LDH值。結(jié)果見表3。表3紫外分光光度法測(cè)定白花丹素對(duì)肝細(xì)胞的毒性作用（略） 4討論肝臟是外源性化學(xué)物質(zhì)代謝的重要器官，在藥物
8、眾多靶器官中無疑是最重要的，因此研究外源性化學(xué)物質(zhì)對(duì)肝的影響是毒理學(xué)研究的重要組成部分［4］。研究藥物肝毒性的傳統(tǒng)方法多采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需樣品和動(dòng)物量大，提取、分離并純化大量中藥成分比較困難，實(shí)驗(yàn)成本高。近年來，多種體外細(xì)胞培養(yǎng)體系已成為研究的有力工具，用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行體外毒性分析已發(fā)展為早期毒性評(píng)價(jià)的重要替代方法，在中藥新藥開發(fā)早期建立有效的體外評(píng)價(jià)體系更是高通
