資源描述：
《黃連解毒湯治療大鼠急性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、黃連解毒湯治療大鼠急性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究作者：尹兵祥馬喜桃蔡義勇扈曉宇鐘森【摘要】目的觀察黃連解毒湯對(duì)D-Galn誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷的治療作用及中藥的量效關(guān)系。方法32只SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為正常組，模型組，黃連解毒湯低劑組，高劑組；除空白組外，其余各組均以1000mg/kgD-Galn腹腔注射造模，空白組則以等量NS腹腔注射；造模后立即對(duì)中藥組給予相應(yīng)濃度中藥10ml/kg灌胃，每日一次，余組則以等量NS灌胃。染毒24h后，股動(dòng)脈取血，測(cè)血清ALT,AST,并解剖肝臟，光鏡下觀察其病理變化，操作同
2、前。結(jié)果模型組與正常組相比，模型組ALT、AST活性明顯增高；治療組與模型組相比，治療組轉(zhuǎn)氨酶活性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均p＜0.05）；兩治療組間相比，轉(zhuǎn)氨酶活性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肝臟病理組織學(xué)檢查顯示，治療組肝細(xì)胞壞死及炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度均較模型組減輕。結(jié)論對(duì)1000mg/kgD-Galn誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷，黃連解毒湯干預(yù)24h后，有一定的治療作用?！娟P(guān)鍵詞】黃連解毒湯急性肝損傷D-氨基半乳糖胺量效關(guān)系黃連解毒湯方出自《肘后備急方》，名見《外臺(tái)秘要》，由黃芩、黃連、黃柏、梔子四藥組成，有清熱燥濕、瀉火
3、解毒的功效，主治三焦火毒證，尤其對(duì)熱毒熾盛證型的急性肝炎，有一定的臨床效果[1]。有學(xué)者已對(duì)該復(fù)方進(jìn)行了研究[2]，但為預(yù)防性研究，與臨床實(shí)際應(yīng)用有一定的差距。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)觀察該方對(duì)D-Galn誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷的治療作用。1材料與方法1.1材料1.1.1藥物：D-氨基半乳糖（D-galactosanine,D-Galn）由sigma公司提供，批號(hào)7499531，黃連解毒湯的四味藥材為中藥免煎劑型，購(gòu)自成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房，各藥物的劑量比遵守《肘后備急方》原方比例，以蒸餾水煮沸沖為不同濃度的中藥湯
4、劑，其中低劑量組(T1組)濃度為0.49g/ml，高劑量組（T2組）濃度為0.99g/ml。1.1.2動(dòng)物：清潔級(jí)SD大鼠32只，體重200±20g，雌雄各半，由四川大學(xué)華西動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,飼養(yǎng)于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院病理生理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，自然明暗周期，室溫21～23℃。1.1.3主要試劑：肝功ALT、AST試劑盒購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)080211，10%福爾馬林緩沖液由華西醫(yī)科大學(xué)藥理實(shí)驗(yàn)室提供。1.1.4儀器：KDC-2046低速冷凍離心機(jī)（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司），Sart
5、orius,R180-D電子分析天平，日立7170全自動(dòng)生化分析儀，LEicaDM4000型顯微圖像分析系統(tǒng)。1.2方法1.2.1動(dòng)物分組及給藥量清潔級(jí)SD大鼠32只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，稱重編號(hào)。隨機(jī)分為4組，每組8只，即正常組（C組）、肝損傷模型組（M組，1000mg/kgD-Galn）黃連解毒湯低劑量組（T1組，0.49g/ml，臨床等效劑量）、黃連解毒湯高劑量組（T2組，0.99g/ml，2倍臨床等效劑量）。1.2.2操作過程：試驗(yàn)前一天對(duì)大鼠稱重，禁食不禁水。實(shí)驗(yàn)前D-Galn以無菌NS
6、配制為10%的濃度，根據(jù)離心取血清，全自動(dòng)生化分析儀以連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)血清ALT,AST，肝臟病理則送四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)中心藥理實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法制作HE切片，以LEica顯微圖像分析系統(tǒng)，以200×的放大率觀察。1.2.3統(tǒng)計(jì)方法據(jù)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以x-±s表示，采用Dunt’s檢驗(yàn)，α＝0.05。2結(jié)果2.1對(duì)血清ALT、AST的影響：24h時(shí)，兩治療組均有降低血清轉(zhuǎn)氨酶的作用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2.2肝組織病理學(xué)影響光鏡下觀察，C組：肝索排列整齊，小葉結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞無變性壞死
7、。M組：肝索排列欠齊，肝細(xì)胞脂肪樣變，點(diǎn)狀壞死，血竇內(nèi)充血，小葉內(nèi)廣泛炎性浸潤(rùn)。T1組:肝索排列整齊，肝細(xì)胞少量變性，血竇內(nèi)少量充血，小葉內(nèi)點(diǎn)灶狀炎性浸潤(rùn)。T2組：肝索排列較齊，肝細(xì)胞脂肪變性明顯，血竇內(nèi)少量充血，散在炎癥浸潤(rùn)，與T1組無明顯差別。3討論急性肝損傷是由多種病因引起并有多種因素參與的復(fù)雜過程，也是是所有肝病慢性化的始動(dòng)因素。急性肝損傷,特別是急性重型肝炎,發(fā)病急,進(jìn)展迅速,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)此尚無特效治療。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為其發(fā)病主要和熱毒有關(guān)，熱毒熾盛，加以濕邪穢濁之氣，凝膠成痰，或熱毒深入營(yíng)血而導(dǎo)致諸種
8、癥狀發(fā)生。黃連解毒湯便是清熱解毒，清熱除濕的代表方[1]。方中選用大苦大寒的黃連為君，清瀉心火及中焦之火，臣以黃芩以清上焦之火，佐以黃柏清下焦之火，梔子清三焦之火，導(dǎo)熱下行，引邪從小便出。四藥合用，苦寒直折，清熱解毒，泄?jié)嵬它S。D-Galn是一種間接肝毒劑，主要通過干擾肝細(xì)胞內(nèi)UTP代謝，影響物質(zhì)代謝而引起肝細(xì)胞變性，其誘導(dǎo)的急性肝損傷是公認(rèn)的研究肝炎發(fā)病機(jī)制及保肝新藥的模型[4,5]。ALT和AST是為最常見的診斷肝臟疾病的
