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1、迷迭香中熊果酸的提取工藝研究論文梁振益，王軍，陳祎平，鄧世明【摘要】目的研究溶劑提取法從迷迭香中提取熊果酸的最佳工藝。方法首先采用單因素實驗，以熊果酸提取率為評價指標(biāo)，采用溶劑提取法研究提取工藝，并通過正交實驗，對過程參數(shù)進行優(yōu)化。同時采用比色法和高效液相色譜法分別對提取物中熊果酸進行定性、定量分析。結(jié)果乙醇提取最佳工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)90%.freelalextractionprocessforursolicacidfromRosmarinusofficinalis.MethodsTheextractionentguidedbytheext
2、ractionrateofursolicacid.Colorimetryanceliquidchromatography(HPLC)ineursolicacidcontent.ResultsTheoptimalextractionprocessaterialtosolvent1∶20,extractiontemperature90℃,extractiontime3h，theextractionrateofursolicacidcouldgetto92.38%.ConclusionTheestablishedmodelandoptimized
3、resultsareprovedtobereasonableandtheextractionprocessisfeasible.Keyarinusofficinalis;Ursolicacid;Extractionprocess迷迭香RosmarinusofficinalisL.系唇形科迷迭香屬植物，是目前公認(rèn)的具有較高抗氧化作用的一種植物1，它具有消除胃脹氣、增強記憶力、提神醒腦、降低血糖、治療風(fēng)濕痛等功效2。迷迭香中的化學(xué)成分復(fù)雜，目前研究較多的抗氧化成分主要為迷迭香酚、表迷迭香酚、異迷迭香酚、迷迭香酸及黃酮等成分3。熊果酸(Ursol
4、icacid,UA)具有抗腫瘤、抗肝炎、降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗糖尿病、抗HIV、抗寄生蟲等作用4，其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，尚無合成品，主要靠從植物中提取獲得5。從迷迭香中提取熊果酸未見有關(guān)報道。本實驗采用溶劑提取法對迷迭香中熊果酸的最佳提取工藝進行了研究，同時采用高效液相色譜法準(zhǔn)確對提取物中熊果酸進行定量，為充分利用迷迭香資源提供科學(xué)依據(jù)。1材料干制迷迭香，由海南萬恒生物有限公司提供;熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品，中國藥品生物制品檢定所;甲醇為色譜純，水為超純水;無水乙醇、香草醛、高氯酸、乙酸均為分析純，廣州化學(xué)試劑廠出品。高效液相色譜Jasco-1586(雙泵)
5、，UV-1570紫外檢測器;CO-1560柱箱;LEO超聲波清洗器，大連華洋科技儀器有限公司產(chǎn)品;PPENDORF微量移液器(德國);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，德國HeidolphLABOROTA4000;UV-2450紫外可見分光光度計，日本島津株式會社公司產(chǎn)品。2方法2.1迷迭香中熊果酸的定性—高氯酸-香草醛法精密稱取熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品4.7mg，置于10ml容量瓶中，甲醇溶解，稀釋至刻度，作為對照品溶液。用微量移液器移取對照品溶液1.00ml于10ml容量瓶中，于100℃烘箱中烘干后，冷卻后加入0.5ml5%香草醛和0.8ml高氯酸，在60℃水浴保溫10
6、min，冷卻后加乙酸溶解并稀釋至刻度，搖勻，在546nm處測定吸光度。2.2熊果酸的含量測定2.2.1高效液相色譜法測定條件色譜條件：色譜柱為SymmetryshieldRP18(3.9mm×150mm,5μm);流動相為0.2%磷酸二氫鈉-甲醇(14∶86);流速為0.8ml/min;檢測波長為210nm;靈敏度為0.16AFUS;柱溫為室溫(25℃)。2.2.2供試品溶液的制備稱取迷迭香粉末適量，按L9(34)正交實驗表所列進行提取，提取過程保持溶劑回流狀態(tài)，過濾或抽濾除渣，減壓回收乙醇，得浸膏，將浸膏依次用石油醚、氫氧化鈉水溶液、水洗
7、至洗出液近無色，烘干。再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色，過濾。用熱乙醇反復(fù)洗滌殘渣，合并濾液及洗液，蒸去部分乙醇，放冷，靜置，得白色片狀結(jié)晶提取物。精密稱取提取物100.0mg于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為供試品溶液。2.3測定吸取上述對照品溶液和供試品溶液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，在上述色譜條件下進樣20μl進行分析，根據(jù)HPLC色譜圖中的峰面積，按外標(biāo)法定量，計算出樣品中熊果酸的含量和提取率。3結(jié)果與討論3.1單因素實驗結(jié)果分析3.1.1提取溶劑的選擇稱取迷迭香粉2.0g，分別用甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮作溶
8、劑，以1∶25的料液比，在60℃水浴中提取2h，按“2.1”項進行測定。結(jié)果見表1。由表1可以看出最佳的提取溶劑是乙醇。雖然丙酮的吸光度較大，但因為丙酮有毒，生產(chǎn)工藝要求較高，所
