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1、腎白寧對(duì)糖尿病腎病模型大鼠腎臟CTGF表達(dá)的影響作者:黃吉峰,金祈卓,李顯筑【摘要】目的觀察腎白寧對(duì)大鼠糖尿病腎病模型CTGF表達(dá)的影響,并探討其作用機(jī)制。方法大鼠腹腔麻醉下進(jìn)行左側(cè)腎臟切除術(shù),術(shù)后2周按照50mg/kg劑量,予以STZ腹腔注射;72h后,尾靜脈取血,將空腹血糖≥16.7mmol/L者隨機(jī)分為模型組、中藥腎白寧組、洛汀新對(duì)照組,每組15只,另取15只為假手術(shù)組。CTGF檢測(cè)采用免疫組化的方法。結(jié)果12周后光鏡下可見(jiàn)模型組腎小球毛細(xì)血管球萎縮、球囊腔略增大、腎小球出入球小動(dòng)脈有輕度內(nèi)皮細(xì)胞增生及纖維化、基底膜略增厚,遠(yuǎn)曲小管擴(kuò)張,腎間質(zhì)充血、水腫、血細(xì)胞浸潤(rùn),
2、并有輕度間質(zhì)纖維化。模型組、中藥組、對(duì)照組腎組織CTGF陽(yáng)性表達(dá)較假手術(shù)組高,差異有顯著性(P<0.01),中藥組、對(duì)照組與模型組比較陽(yáng)性表達(dá)低(P<0.01),中藥組與對(duì)照組差異無(wú)顯著性(P>0.05)。結(jié)論具有滋補(bǔ)肝腎,益氣固精,祛瘀化濁解毒之功效的腎白寧通過(guò)抑制腎CTGF表達(dá),抑制細(xì)胞外基質(zhì)增加和腎臟纖維化保護(hù)了腎功能延緩了DN的發(fā)展?!娟P(guān)鍵詞】糖尿病腎病;腎白寧;CTGF糖尿病腎病是糖尿病的主要并發(fā)癥之一,已經(jīng)成為終末期腎病的首要病因。早期的病理特征是腎臟肥大,腎小球基底膜增厚和系膜基質(zhì)進(jìn)行性積聚。幾年來(lái),導(dǎo)師應(yīng)用腎白寧治療糖尿病腎病取得了較好的臨
3、床療效,因此我們以糖尿病腎病大鼠模型作為研究對(duì)象,探討腎白寧對(duì)糖尿病腎病大鼠腎損害的防治作用機(jī)制?! ?材料與方法 1.1藥物腎白寧:由哈爾濱世一堂研究所配制成浸膏(藥物組成:黃芪50g,熟地黃20g,山藥15g,山茱萸15g,牡丹皮15g,茯苓25g,澤瀉15g,桑螵蛸35g,水蛭10g,白花蛇舌草45g,當(dāng)歸15g,益母草15g等)。洛汀新(貝那普利,北京諾華制藥有限公司批號(hào):X1266)?! ?.2實(shí)驗(yàn)方法 1.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)健康SD雄性大鼠(200~240g)60只?! ?.2.2糖尿病腎病模型的建立動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)取15只為假手術(shù)組,假
4、手術(shù)組大鼠在腹腔麻醉狀態(tài)下,背部切口,剝離左腎脂肪包膜,關(guān)閉縫合切口。其余大鼠腹腔麻醉下進(jìn)行左側(cè)腎臟切除術(shù),術(shù)后恢復(fù)2周。將STZ溶于0.1mol/L檸 檬酸緩沖液(pH4.4)中,避光條件下迅速配成濃度為1%STZ溶液。動(dòng)物禁食12h后,按照50mg/kg劑量,予以STZ腹腔注射;72h后,尾靜脈取血,測(cè)定空腹血糖,空腹血糖≥16.7mmol/L作為DN大鼠成模標(biāo)準(zhǔn)?! ?.2.3分組與給藥造模成功后大鼠隨機(jī)分為模型組、中藥組、對(duì)照組及假手術(shù)組各15只,共60只。各組自造模成功第1天起開(kāi)始給藥。假手術(shù)組、模型組:給予每日1次蒸餾水1ml灌胃;中藥組:將腎白寧浸膏溶于生理
5、鹽水,配制成混懸液,以2.97g/(kg·d)(含生藥量)灌胃,每日1次;對(duì)照組:洛汀新(貝那普利)溶于生理鹽水,配制成混懸液,0.9mg/(kg·d)灌胃,每日1次。均給藥12周,每2周稱重調(diào)整劑量。給藥期間每組大鼠分籠飼養(yǎng),隨意飲水,食用標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼料?! ?.2.4觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(Connectivetissuegro. 2結(jié)果 12周后光鏡下可見(jiàn)模型組腎小球毛細(xì)血管球萎縮、球囊腔略增大、腎小球出入球小動(dòng)脈有輕度內(nèi)皮細(xì)胞增生及纖維化、基底膜略增厚,遠(yuǎn)曲小管擴(kuò)張,腎間質(zhì)充血、水腫、血細(xì)胞浸潤(rùn),并有輕度間質(zhì)纖維化。模型組、中藥組、對(duì)照組腎組織CTGF
6、陽(yáng)性表達(dá)較假手術(shù)組高,差異有顯著性(P<0.01),中藥組、對(duì)照組與模型組比較陽(yáng)性表達(dá)低(P<0.01),中藥組與對(duì)照組差異無(wú)顯著性(P>0.05),見(jiàn)表1。表1各組腎組織CTGF表達(dá)情況 注:與假手術(shù)組比較,*P<0.01;與模型組比較,△P<0.01 3討論 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(Connectivetissuegroaoftype1diabeticpatientsporalexpressionprofileanddistributionPatternindicatearoleofconnectivetissuegroice.AmJPhys
7、iolRenalPhysio,2006,290(6):F1344-F1354. 3RiserBL,CortesP,DenichiloM,etal.UrinaryC2(CTGF)asapossiblepredictorofdiabeticnephropathy:Preliminaryreport.KidneyInternational,2003,64:451-458. 4涂曉文.結(jié)締組織生長(zhǎng)因子:糖尿病腎病治療的新靶點(diǎn).國(guó)際泌尿系統(tǒng)雜志,2006,1:126-129. 5董明.結(jié)締組織生長(zhǎng)因子:糖尿病腎病治療的