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《化瘀通絡(luò)中藥對糖尿病腎病大鼠腎組織ctgf mrna表達的影響論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、化瘀通絡(luò)中藥對糖尿病腎病大鼠腎組織CTGFmRNA表達的影響論文尹智煒高俊杰陳志強孫玉鳳丁奇峰王月華張江華【摘要】觀察化瘀通絡(luò)中藥—腎絡(luò)通對實驗性大鼠糖尿病腎病(DN)模型腎功能及腎組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)mRNA表達的影響。方法SD大鼠40只隨機分為正常組、模型組、對照組和中藥組,模型組、對照組和中藥組應(yīng)用鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg一次性腹腔注射制備大鼠糖尿病模型。中藥組給予腎絡(luò)通煎劑灌胃25g/(kg·d),對照組給予貝那普利水溶液10mg/(kg·d),正常組和模型組給予等量0.9%
2、氯化鈉注射液灌胃。檢測各組大鼠24h尿蛋白、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和腎組織CTGFmRNA的表達。結(jié)果模型組24h尿蛋白、BUN、Cr和腎組織CTGFmRNA的表達均顯著高于正常組(P0.01);對照組和中藥組24h尿蛋白、BUN、Cr和腎組織CTGFmRNA的表達與模型組相比顯著降低(P0.01)。結(jié)論化瘀通絡(luò)中藥能夠顯著減少DN模型大鼠24h尿蛋白,保護DN模型大鼠腎臟功能,并可從基因水平顯著降低腎組織CTGF的表達,提示下調(diào)CTGF的表達可能是化瘀通絡(luò)中藥保護DN模型大鼠腎功能的重要機制
3、。【關(guān)鍵詞】糖尿病腎病大鼠SD腎功能結(jié)締組織生長因子【Abstract】ObjectiveToobserveeffectsofdispersingbloodstasisanddredgingcollateral—ShenluotongonrenalfunctionandexpressionofCTGFmRNAindiabeticnephropathy(DN)rats’kidney.MethodsTheratslydividedintofourgroupsincludingnormalgroup,model
4、group,controlgroupandTraditionalChineseMedicine(TCM)group.TheDNmodelofratadethroughone-timeinjectionofperitonealofstreptozotocin(STZ)60mg/kg.TCMgroupinistratedodelgroupinistratedg/kg·d,NormalgroupandmodelgroupRNAinnephridialtissuealgroup,24hoururinaryprot
5、ein,Scr,BUNandtheexpressionofCTGFmRNAinnephridialtissueofmodelgroupodelgroup,thoseofTCMandControlgroupRNAinnephridialtissue.Itindicatedthatdoaybeanimportantatrix,ECM)增生.freelRNA表達的影響,從分子水平探討化瘀通絡(luò)中藥的可能作用機制,為中藥治療DN提供新的思路。1材料與方法1.1動物清潔級健康雄性Sprague-Dauley系大鼠40
6、只,體質(zhì)量(180±10)g,由河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供,動物合格證號:冀醫(yī)動管字07259號。1.2化瘀通絡(luò)中藥腎絡(luò)通,由地龍、烏梢蛇、丹參、黃芪等組成,按比例稱取后,水煎、過濾,濃縮至含生藥1.5g/mL。裝入瓶中密封保存于4℃冰箱中。飲片經(jīng)過鑒定均為正品,由河北醫(yī)科大學中醫(yī)院制劑室提供,并經(jīng)過鑒定均為正品。1.3造模與分組大鼠自由飲水,常規(guī)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,進行尿蛋白定性檢測,結(jié)果全部為陰性。隨機分為正常組、模型組、對照組和中藥組,每組10只。除正常組外,其他各組按60mg/kg一次性腹腔注
7、射STZ,自由飲水、攝食,72h后尾靜脈取血快速血糖儀測隨機血糖,以≥16.7mmol/L為糖尿病模型成模標準[3]。正常組注射相應(yīng)量0.9%氯化鈉注射液。造模各組在糖尿病模型建立后,按血糖水平重新分組,組別與動物數(shù)不變。1.4給藥與取材成模后1周開始給藥,中藥組給予腎絡(luò)通煎劑灌胃25g/(kg·d),對照組給予貝那普利水溶液10mg/(kg·d),對照組、中藥組用藥量均相當于臨床人用劑量的20倍。正常組和模型組給予等量0.9%氯化鈉注射液灌胃,均每日1次。1.5取材給藥第16周末,各組大鼠置于代謝籠中,
8、禁食不禁水收集大鼠24h尿液;10%水合氯醛30mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,腹主動脈取血,分離血清,然后迅速取腎組織置于液氮中,再轉(zhuǎn)存于-70℃超低溫冰箱中待檢。1.6生化指標檢測雙縮脲法定量24h尿蛋白,Beckmancx7全自動生化分析儀檢測血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等生化指標。1.7CTGFmRNA檢測各組腎組織采用Trizol一步法提取總RNA,CTGF引物由上海中生生物工程公司合成,其序列為5′-GAAAGA