六味地黃湯生物制劑對氫化可的松模型的藥理作用研究

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1、六味地黃湯生物制劑對氫化可的松模型的藥理作用研究陳艷芬,臧建偉,唐春萍,陶曙紅,楊超燕,趙越【摘要】  目的研究經(jīng)光合細(xì)菌代謝前后六味地黃湯對免疫力低下動物的藥理作用。方法采用氫化可的松造成免疫力低下模型,觀察六味地黃湯生物制劑和六味地黃湯分別對小鼠免疫器官、吞噬指數(shù)和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響。結(jié)果六味地黃湯生物制劑能明顯提高小鼠脾指數(shù)(P<0.05),提高吞噬指數(shù)(P<0.05),增強遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(P<0.05),而同等劑量的六味地黃湯作用不明顯。結(jié)論六味地黃湯生物制劑在增強免疫力方面優(yōu)于傳統(tǒng)的六味地黃湯水煎劑?!娟P(guān)鍵詞】六味地黃湯;光合細(xì)菌;免疫;小鼠;藥理作用  

2、Abstract:ObjectiveToparetheeffectsofLiuodel.MethodsTheimmunorepressivemodelice,andtheimmuneorgans,carbonphagocyticindex,anddelayedtypehypersensitivereaction(DHTR)iceevidently(P<0.05),increasedthecarbonphagocyticindex(P<0.05),andobviouslyenhancedDHTR(P<0.05).ButthesamedosedecoctionofLiue

3、tabolizedLiumunomodulatingeffectsanditissuperiortothetraditionalLiumunity;Mouse;Pharmcologicaleffects  六味地黃湯由宋代名醫(yī)錢乙首創(chuàng),是中醫(yī)著名的滋補腎陰傳統(tǒng)代表方劑,方由熟地、山茱萸、山藥(三補)和澤瀉、丹皮、茯苓(三瀉)所組成,主治腎陰不足證,從古到今在中醫(yī)臨床廣為應(yīng)用。光合細(xì)菌(PSB)是一種以光為能源的厭氧細(xì)菌,在自然界中的碳素循環(huán)和物質(zhì)轉(zhuǎn)化中起著重要作用,而且營養(yǎng)成分非常豐富,含有大量的蛋白質(zhì)和氨基酸,是一種優(yōu)質(zhì)蛋白源,富含胡蘿卜素,此外還含有多種生物活性成

4、分。近年來由于發(fā)現(xiàn)PSB含有豐富的營養(yǎng)藥用成分及其獨特的生物轉(zhuǎn)化功能,在醫(yī)藥保健品方面的應(yīng)用逐漸受到國內(nèi)外研究者的關(guān)注〔1〕。本研究通過引入PSB生物發(fā)酵技術(shù),探索性地研制了經(jīng)PSB生物代謝后的新型六味地黃湯生物制劑(以下簡稱“生物制劑”),并以免疫力低下動物模型為基礎(chǔ),比較該生物制劑與傳統(tǒng)的六味地黃湯水煎劑的藥理作用?! ?材料  1.1藥物和試劑氫化可的松,天津藥業(yè)焦作有限公司,批號05091212。光合細(xì)菌,顯微鏡下觀測含活菌數(shù)109個。六味地黃湯制備:取熟地黃240g,山茱萸120g,山藥120g,澤瀉90g,牡丹皮90g,白茯苓90g,置于玻璃燒杯內(nèi),加入5

5、倍蒸餾水浸泡2h,文火煮沸30min,過濾。藥渣再加3倍量水繼續(xù)煎煮,煮沸20min過濾。合并2次濾液,水浴濃縮至1500ml,4℃冰箱保存?zhèn)溆??! ?.2動物NIH小鼠,體重18~22g,雌雄各半,由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供,合格證號:2005A011,正常飼養(yǎng)3d后供試?! ?方法與結(jié)果  2.1對小鼠免疫器官的影響  取NIH小鼠,雌雄各半,隨機分成5組,即正常組、模型組、六味地黃湯組、光合細(xì)菌組、生物制劑組。各組動物每天灌胃給予相應(yīng)的藥物0.2ml/10g,正常組予以同容量的蒸餾水,1次/d,連續(xù)8d。與此同時,除正常對照組外,其余各組動物均同時皮下注射氫化

6、可的松40mg/kg以造成免疫力低下模型,1次/d,連續(xù)8d。末次給藥1h后脫臼處死動物,稱取脾、胸腺重量,計算臟器指數(shù),比較各組差異。結(jié)果見表1。表1六味地黃湯生物制劑對小鼠免疫器官的影響(略)結(jié)果表明,模型組免疫器官指數(shù)與正常組相比明顯降低(P<0.01),生物制劑和六味地黃湯能明顯改善脾指數(shù)(P<0.05),而對胸腺指數(shù)的影響統(tǒng)計學(xué)意義不明顯。  2.2對小鼠非特異性免疫功能的影響    2.3對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響  取NIH小鼠,雌雄各半,按上述方法分組、造模、給藥。給藥后第10天,腹部去毛約3cm×3cm,在去毛部位涂1%二硝基氟苯50μl,于給藥后第

7、14天再以1%二硝基氟苯10μl涂右耳,24h后處死小鼠,用8mm打孔器打取兩耳相同部位的耳片,稱取重量,以左右耳片重量之差為腫脹度。結(jié)果見表3。表3六味地黃湯生物制劑對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響(略)  結(jié)果表明,生物制劑組的耳腫脹度顯著高于模型組和傳統(tǒng)六味地黃湯水煎劑組,而傳統(tǒng)六味地黃湯在該劑量下并未體現(xiàn)作用?! ?討論近年來生物技術(shù)在中藥研究開發(fā)中已經(jīng)顯露出其誘人的前途,具有廣泛的應(yīng)用前景〔3〕。本研究通過引入光合細(xì)菌對傳統(tǒng)六味地黃湯進行發(fā)酵處理,獲得新型的生物制劑?,F(xiàn)代藥理學(xué)實驗研究表明,六味地黃湯具有調(diào)節(jié)免疫功能作用。本研究主要從免疫器官、非

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