微生物之棒狀桿菌

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1、棒狀桿菌屬種屬及毒力鑒定江蘇嘉語生物醫(yī)藥技術有限公司陳穎曦內(nèi)容概要棒狀桿菌屬及白喉棒狀桿菌簡介棒狀桿菌與疾病常用種屬鑒定靶點及序列比對棒狀桿菌毒力因子及序列比對文獻棒狀桿菌屬及白喉棒狀桿菌簡介棒狀桿菌屬(Corynebacterium)是一群革蘭染色陽性桿菌。本屬細菌的特點是菌體一端或兩端膨大呈棒狀，菌體染色不均勻，可出現(xiàn)異染顆粒。該菌屬無莢膜、無鞭毛，不產(chǎn)生芽胞。種類較多，廣泛分布于動、植物?？稍谌梭w皮膚、上呼吸道和泌尿生殖道粘膜等處定居。大多為非致病菌或條件致病菌，其中白喉棒狀桿菌是唯一能引起人類致病且具較強傳染性的菌種。白喉棒

2、狀桿菌的異染顆粒（Albert染色）白喉棒狀桿菌(C.diphtheriae)，俗稱白喉桿菌，是白喉的病原菌。白喉是一種急性呼吸道傳染病，患者咽喉部粘膜可出現(xiàn)灰白色的假膜。該菌能產(chǎn)生強烈外毒素，進入血液可引起全身中毒癥狀。菌體細長微彎，一端或兩端膨大呈棒狀。細菌排列不規(guī)則，常排列呈V、L等形狀。革蘭染色陽性。用美藍短時間染色菌體著色不均勻，出現(xiàn)有深染的顆粒。用Neisser或Albert等法染色，這些顆粒與菌體著染顏色不同，稱為異染顆。顆粒的主要成分是核糖核酸和多偏磷酸鹽，在鑒定時有重要意義。但當細菌衰老時異染顆粒被消耗而不明顯，且

3、細胞壁變薄易被脫色，常造成革蘭染色不定，有時可表現(xiàn)為在革蘭陰性的菌體中見有陽性顆?；蚬?jié)段。需氧或兼性厭氧。在血平板上可生長，菌落大小1~3mm。在含有凝固血清的呂氏血清斜面上生長迅速，涂片染色異染顆粒明顯。分離培養(yǎng)時常用亞碲酸鉀血平板作為鑒別選擇培養(yǎng)基。因亞碲酸鉀能抑制雜菌，而白喉棒狀桿菌不受影響，并能吸收亞碲酸鹽使其還原為黑色的金屬碲，菌落呈黑色。白喉棒狀桿菌在亞碲酸鉀血平板上可形成三種不同形態(tài)特征的菌落，分別稱為重型、輕型和中間型。三型的產(chǎn)毒株與疾病的輕重程度無明顯的對應關系，但對流行病學分析具有一定意義。在我國以輕型多見。白喉

4、棒狀桿菌對濕熱抵抗力不強，58?C10分鐘或煮沸1分鐘死亡。但對寒冷、干燥和日光的抵抗力較其他無芽胞菌強。在衣服、床單、玩具上可存活數(shù)天至數(shù)周。對常用消毒劑抵抗力較弱，5%石碳酸1分鐘、3%來蘇爾10分鐘處理可殺滅。對青霉素、氯霉素、紅霉素等敏感。棒狀桿菌與疾病棒狀桿菌種名臨床疾病與癥狀C．diphtheriae臨床上引起白喉，主要侵犯口咽、鼻咽等部位，局部形成灰白色假膜，有咽白喉、喉白喉、鼻白喉和氣管白喉之分。其產(chǎn)生的外毒素可損害心肌和神經(jīng)系統(tǒng)，病死率高，死亡的病例中50%以上是由于心肌受損發(fā)展到充血性心力衰竭所致，可引起心肌炎、

5、軟腭麻痹、聲嘶、腎上腺功能障礙等癥狀。此外，本菌可侵犯眼結(jié)膜、外耳道、陰道和皮膚傷口C．pseudodiphtheriticum偶爾可引起心內(nèi)膜炎、尿路感染、骨感染C．ulcerans可產(chǎn)毒素，引物呼吸道白喉樣疾病，也與奶牛乳腺炎有關C．a(chǎn)mycolatum可引起心內(nèi)膜炎C．striatum關節(jié)炎，敗血癥C．jeikeium在免疫抑制或免疫功能不全的人身上引起機會性感染，比如骨髓移植中引起的機會性感染，也可引起關節(jié)炎，心內(nèi)膜炎，敗血癥。C．urealyticum可引起泌尿道感染，產(chǎn)生大量尿素酶使尿液變堿，易導致結(jié)石形成。C．xero

6、sis常寄居于眼結(jié)膜，可引起關節(jié)炎，心內(nèi)膜炎，胸膜肺炎，腹膜炎，骨髓炎，膿毒性關節(jié)炎，腦膜炎等。C．pseudotuberculosis可引起小反芻動物干酪樣淋巴結(jié)炎C．bovis可引起牛乳房炎C．renale引物牲畜膀胱炎和腎盂腎炎C．pyogenes從牛、羊和豬的化膿性損傷中分離到，跟奶牛乳腺炎有關，人類感染已有報告.常用種屬鑒定靶點及序列比對靶微生物基因生理功能特異性敏感性備注C.pseudotuberculosis16S[1,11]核糖體RNA假陽性—與C.ulcerans交叉C.diphtheriaeC.ulceranst

7、ox[2,5,6,8,9,10,12,13,14]白喉毒素假陰性10copiesperreactiontube某些菌株不含有此基因C.diphtheriaeC.ulceransrpoB[2,11]RNA聚合酶亞基B—10copiesperreactiontubeC.diphtheriaedtxR[3,12]代謝調(diào)節(jié)和毒素合成調(diào)節(jié)因子100%—C.pseudotuberculosisrpoB[4]RNA聚合酶亞基B100%1pg和16S聯(lián)用3重PCR特異性達100%，敏感性達1pgC.pseudotuberculosisPld[4]外

8、毒素PLD100%1pg靶微生物基因生理功能特異性敏感性備注C.JeikeiumC.urealyticum16S-23S[7]核糖體RNA間區(qū)————16S-23S序列多態(tài)能夠清楚區(qū)分這兩個種種屬鑒定靶點的選定16S作為國際公認的細菌