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1、醒腦靜注射液對(duì)內(nèi)毒素休克兔腸的保護(hù)作用張藝,曾維誠(chéng),林燕,張英【摘要】 目的探討醒腦靜注射液對(duì)兔內(nèi)毒素休克時(shí)腸功能的保護(hù)作用。方法日本大耳白兔54只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組6只、LPS組24只(每個(gè)亞組6只)、LPS+XNJ組24只(每個(gè)亞組6只)。用耳緣靜脈推注LPS(2.4mg/kg)復(fù)制兔內(nèi)毒素休克模型,用耳緣靜脈推注醒腦靜注射液(0.5ml/kg)治療。于0h、1h、2h、3h取腸黏膜及血用ELISA法檢測(cè)腸黏膜和血漿TNF-α、sIgA的含量。結(jié)果sIgA的變化:LPS組各時(shí)間點(diǎn)的腸黏膜sIgA濃度與正常對(duì)照組比明
2、顯下降(P<0.05),而LPS+XNJ組各時(shí)間點(diǎn)的sIgA與LPS組比顯著升高(P<0.05)。LPS組各時(shí)間點(diǎn)的血漿sIgA濃度與正常對(duì)照組比明顯下降(P<0.05),LPS+XNJ組從2h開始顯著高于LPS組(P<0.05);TNF-α的變化:LPS組腸黏膜及血漿的TNF-α濃度與正常對(duì)照組比明顯升高(P<0.05);LPS+XNJ組與LPS組比顯著降低(P<0.05)。結(jié)論醒腦靜注射液對(duì)內(nèi)毒素休克時(shí)家兔腸黏膜有保護(hù)作用?!娟P(guān)鍵詞】醒腦靜;內(nèi)毒素休克;腸黏膜;兔 內(nèi)毒素休克(EndotoxinShock),是由革蘭
3、氏陰性菌內(nèi)毒素引起的以發(fā)熱、低血壓及多器官功能衰竭為主要特征的綜合征,死亡率高,是臨床常見的危急重癥之一。腸是內(nèi)毒素休克時(shí)最早受損的器官之一,因此,腸黏膜功能保護(hù)對(duì)治療內(nèi)毒素休克有重要的意義。本試驗(yàn)擬通過(guò)觀察內(nèi)毒素休克模型家兔腸黏膜及血漿中sIgA和促炎因子TNF-α含量的變化,探討醒腦靜注射液對(duì)內(nèi)毒素休克兔的腸黏膜的保護(hù)作用,為臨床治療內(nèi)毒素休克提供新的思路?! ?材料與方法 1.1實(shí)驗(yàn)材料 1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康日本大耳白兔54只,體重2~2.5kg,雄性,清潔級(jí)動(dòng)物,由瀘州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供?! ?.1.2實(shí)驗(yàn)
4、試劑醒腦靜注射液(河南天地藥業(yè)股份有限公司);脂多糖(LPS,美國(guó)Sigma公司);兔sIgA、TNF-α試劑盒(上海西唐生物科技有限公司)?! ?.2實(shí)驗(yàn)方法 1.2.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)日本大耳白兔54只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組6只,LPS組24只,LPS+XNJ組24只(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只)。1%戊巴比妥鈉全麻,分離右頸總動(dòng)脈,插管,接BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)觀察并記錄血壓變化。LPS組和LPS+XNJ組推注LPS(生產(chǎn)批號(hào),L-2880,)2.4mg/kg,正常對(duì)照組推注等量生理鹽水。待造成兔內(nèi)毒素休克后,LPS+XNJ組推注
5、醒腦靜注射液0.5ml/kg,正常對(duì)照組和LPS組推注等量生理鹽水。以上各組分別于第二次注射后0h、1h、2h、3h取血2ml,同時(shí)回輸?shù)攘可睇}水,并將動(dòng)物處死開腹刮取腸黏膜1ml。所取血以3000r/min離心10min,取血漿-80℃低溫冰箱保存待測(cè)sIgA、TNF-α?! ?.2.2sIgA、TNF-α的檢測(cè)用Elisa法檢測(cè)。操作分別按相應(yīng)的試劑盒說(shuō)明進(jìn)行,設(shè)空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管,各管一式兩份。450nm讀取吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取各待測(cè)標(biāo)本含量。 1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)用±s表示,采用SPS
6、S16.0軟件包分析處理。組間比較采用K-W檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?! ?實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.1sIgA的檢測(cè)在腸黏膜中,正常對(duì)照組兔sIgA濃度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)無(wú)變化(P>0.05)。LPS組sIgA濃度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)較正常對(duì)照組明顯下降,差異有顯著性(P<0.05),且隨時(shí)間延長(zhǎng),sIgA逐漸下降。LPS+XNJ組sIgA濃度與LPS組比較,在0h時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異(P>0.05),在1h、2h、3h時(shí)間點(diǎn)明顯升高(P<0.05),且也呈時(shí)間依賴性,但低于正常對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的水平。血漿中LPS組sIgA的變化趨勢(shì)與
7、腸黏膜的變化相同,LPS+XNJ組sIgA濃度在2h開始升高,但亦低于正常對(duì)照組,見表1。表1腸黏膜及血漿中sIgA含量的變化(略)注:1.與同時(shí)間點(diǎn)正常對(duì)照組比,P<0.05;2.與同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)毒素組比,P<0.05;3.與組內(nèi)0h時(shí)間點(diǎn)比,P<0.05;4.與組內(nèi)1h時(shí)間點(diǎn)比,P<0.05;5.與組內(nèi)2h時(shí)間點(diǎn)比,P<0.05 2.2TNF-α的檢測(cè)在腸黏膜中,正常對(duì)照組兔TNF-α濃度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)無(wú)變化(P>0.05)。LPS組TNF-α濃度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)逐漸增高,與正常對(duì)照組比較差異均有顯著性(P<0.05)。LPS
8、+XNJ組TNF-α濃度除0h時(shí)間點(diǎn)外,其余各組TNF-α濃度均明顯高于對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的LPS組(P<0.05)。血漿中TNF-α的變化和腸黏膜的類同,見表2。表2腸黏膜及血漿中TNF-α含量的變化(略)注:1.與同時(shí)間點(diǎn)正常對(duì)照組比,P<0.05;2.與同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)毒素組比,P<0.05;3.與組內(nèi)0h時(shí)間