亞低溫缺血預(yù)處理對大鼠腸缺血再灌注腎損傷的保護(hù)作用

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1、亞低溫缺血預(yù)處理對大鼠腸缺血再灌注腎損傷的保護(hù)作用高卉，白育庭，周水生，周燕紅，羅德生，查文良，阮明鳳【摘要】目的探討亞低溫下缺血預(yù)處理對大鼠腸缺血再灌注腎損傷的保護(hù)作用。方法選用健康HIP組）。夾閉大鼠腸系膜上動脈（SMA）60min造成缺血，再灌注2h后取出腎組織制成勻漿，測定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSHPX）、Ca2+Mg2+ATPase的活性及丙二醛（MDA）含量，觀察腎組織形態(tài)細(xì)胞學(xué)變化。結(jié)果MHIP組腎組織MDA含量明顯低于I/R組（P0.01），SOD、GSHP

2、X、Ca2+Mg2+ATPase的活性均明顯高于I/R組（P0.01），腎細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常變化明顯減輕。結(jié)論亞低溫缺血預(yù)處理能減少大鼠脂質(zhì)過氧化，改善ATPase功能，減輕大鼠腸缺血再灌注所致腎損傷?！娟P(guān)鍵詞】亞低溫；缺血預(yù)處理；缺血再灌注損傷；小腸；腎臟；大鼠ABSTRACT：ObjectiveToexploretheprotectiveeffectsofmildhypothermiaischemicpreconditioningonrenalinjuryaftergutischemiareper

3、fusioninrats.MethodsTheratslyintoghreegroups:①shamoperatedgroup,②ischemiareperfution(I/R)group,③mildhypothermiaischemicpreconditioning(MHIP)group.Superiormesentericarteryintocauseischimia,andthenunclippedtomakereperfusion.2hoursafterreperfusion,therenal

4、tissuesogenized,andthecontentsofSOD,GSHPX,MDAandCa2+Mg2+ATPase,andmorphologicalchangesofrenalalmorphologicalchangesofrenalarkably.ConclusionMildhypothermiaischemicpreconditioningcanreducelipidperoxidation,improveATPaseactivityanddecreaserenalinjuryinr

5、atsaftergutsI/Rinjury.KEYildhypothermia;Ischemicpreconditioning;Ischemiareperfusioninjury;Gut;Renal；Rat腸缺血再灌注（ischemiareperfusion，I/R）是機(jī)體遭受嚴(yán)重創(chuàng)傷、大手術(shù)、燒傷、感染等刺激后發(fā)生較早的病理過程之一。研究表明，小腸缺血再灌注后除對小腸組織本身造成損害外，還會對其他遠(yuǎn)隔器官造成次級損傷，而這種損傷在組織器官移植的生理病理發(fā)生發(fā)展、手術(shù)創(chuàng)傷后其他重要器官的功能改變及恢

6、復(fù)過程中均有十分重要的意義[1，2]。目前認(rèn)為，缺血再灌注損傷產(chǎn)生的主要機(jī)制與氧自由基大量生成導(dǎo)致組織器官脂質(zhì)過氧化有關(guān)[3]。本文采用大鼠腸缺血再灌注模型，探討亞低溫缺血預(yù)處理對大鼠腸缺血再灌注腎損傷的保護(hù)作用。1材料與方法1.1材料選用健康雄性DA、Ca2+Mg2+ATPase試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。1.2方法10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉后，大鼠仰臥固定，取腹部正中切口，暴露腸系膜上動脈（SMA），用無損傷動脈夾夾閉其根部導(dǎo)致缺血，松夾即為再灌注，在各設(shè)定時相點

7、經(jīng)髂動脈取血并迅速放血致死，取腎組織勻漿，同時取少許腎組織行光、電鏡觀察。將24只大鼠隨機(jī)分為3組，每組8只。①假手術(shù)對照組（sham組）：僅暴露SMA而不夾閉，共3h結(jié)束實驗后取材；②缺血再灌注組（I/R組）：夾閉SMA60min后松夾2h再取材；③亞低溫預(yù)處理組（MHIP組）：在小腸周圍充填碎冰造成小腸亞低溫（33℃～35℃），夾閉SMA5min和松夾5min作為預(yù)處理，余同I/R組。1.3指標(biāo)測定SOD活性用鄰苯三酚自氧化法檢測，MDA含量測定用改良硫代巴比妥酸（TBA）比色法測定，5.5,二硫?qū)Χ?/p>

8、硝基苯甲酸（DTNB）比色法測定GSHPX，定磷法測定Ca2+Mg2+ATPase。光鏡檢查：取腎組織經(jīng)10%甲醛固定，石臘包埋切片，HE染色，觀察切片。電鏡檢查：腎組織用生理鹽水漂洗后2.5%戊二醛固定，送電鏡室，經(jīng)四氧化鋨雙固定、脫水、包埋、切片等操作后，在日立H600透視電鏡下觀察。1.4統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)均以±s表示，組與組之間比較采用t檢驗。P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1腎形態(tài)學(xué)改變光鏡下sham組