殼寡糖對大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

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1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文殼寡糖對大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用中文摘要目的：通過建立大鼠輕度和重度腸缺血再灌注(ischemia／reperfusion，I／R)損傷模型，探討殼寡糖對I／R損傷腸黏膜屏障功能的保護(hù)作用及其可能的作用機制，為殼寡糖治療腸I／R損傷提供一定的實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。方法：選用40只清潔級雄性SD大鼠，體重250-3009。實驗動物隨機分為5組(每組8只)：①A組：假手術(shù)組(僅分離腸系膜上動脈不夾閉)；②B組：重度缺血再灌注組(夾閉腸系膜上動脈2h后再灌注2h)；③C組：輕度缺血再灌注組(夾閉

2、腸系膜上動脈30min后再灌注30min)；④D組：重度缺血再灌注+殼寡糖預(yù)處理組；⑤E組：輕度缺血再灌注+殼寡糖預(yù)處理組；A、B、C三組按lOml／kg體重生理鹽水灌胃，D、E兩組給予殼寡糖1500mg／kg體重灌胃，每日1次，連續(xù)5日，造模前30rain灌胃一次。所有動物術(shù)前12／J'．時禁食，自由飲水。大鼠常規(guī)腹腔注射麻醉，經(jīng)腹正中切口，暴露并分離腸系膜上動脈(superiormesentericartery，SMA)，無損傷動脈夾夾閉其起始部，縫合切口，旁照燈保暖。在進(jìn)行S姒夾閉期間，間斷地向腹腔內(nèi)注射生理

3、鹽水，總量約15--一，20mi／kg體重以保持血流動力學(xué)穩(wěn)定。到達(dá)相應(yīng)時間點后經(jīng)原切口進(jìn)腹，取出動脈夾，恢復(fù)血供，依次關(guān)閉切口。假手術(shù)組進(jìn)行同樣操作但不夾閉腸系膜上動脈。實驗結(jié)束后立即抽取下腔靜脈血3ml，室溫放置15min后4℃下3000rpm離心15min，分離血清，-70℃保存?zhèn)溆?，待做DA0測定；取距回盲部lOam以內(nèi)的一部分腸標(biāo)本，用生理鹽水漂洗干凈，濾紙吸干，電子天平稱重，按每lg組織添2口PBSIOml的比例，低溫下用高速電動勻漿機勻漿30s后，立即4℃下3000rpm離，b30min后取上清液，-

4、70℃保存?zhèn)溆?，做SOD、MDA、御0測定。取小腸回盲部lOcm以上的腸管，經(jīng)冰生理鹽水漂凈，濾紙吸干，延腸管長軸切開，用玻片輕輕刮取腸黏膜部分，準(zhǔn)確稱取小腸黏膜組織，用PBS制成10％組織勻漿，低溫離心，取上清液，-70℃保存?zhèn)溆?，做SIgA測定。距回盲部lOam處取相同腸段1．Ocm，4％多聚甲醛固定，梯度酒精脫水，透明后石蠟包埋，待做切片。結(jié)果：1．假手術(shù)組大鼠腸絨毛完整，形態(tài)正常，上皮下間隙無擴(kuò)張；重度缺血再灌注模型組大鼠腸絨毛上皮頂端與固有層分離，腸絨毛頂端破裂，伴固有層毛細(xì)血管暴露、出血和潰瘍，固有層炎

5、性細(xì)胞增多；輕度缺血再灌注模型組較重度模型組病理改變輕。殼寡糖干預(yù)的輕度及重度I／R組腸絨毛病理改變分別較輕、重度I／n模型組明顯減輕，但仍可見腸絨毛頂端破裂，固有層出血和炎癥細(xì)胞浸潤。2溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2．缺血再灌注后，B組腸組織中SOD含量為(27．68±8．60)u／lOOmg。C組腸組織中SOD含量為(44．00_12．74)u／lOOmg，與A組假手術(shù)組腸組織中SOD含量為(85．88±6．95)u／lOOmg相比較，差異有顯著性(尺O．01)。D組腸組織中SOD含量為(45．58±7．26)u／1

6、00mg，較B組明顯增加(P<0．01)。E組腸組織中SOD含量為(65．39±6．37)u／lOOmg，較C組明顯增N(P

7、8±0．49)nmol／mg，較C組明顯下降(尸<0．01)。4．腸缺血再灌注后，B組腸組織中MPO含量為(1．10±0．43)ng／mg，C組腸組中MPO含量為(O．83±0．46)ng／mg，與A組假手術(shù)組腸組織中MPO含量為(0．62±0．33)ng／mg相比較，差異有顯著性(尸

8、為(O．86±0．10)u／ml，C組血清中DAO含量為(0．65±0．09)u／ml，與A組假手術(shù)組血清中DAO含量為(0．37±0．39)u／ml相比較，差異有顯著性(尸<0．01)。D組血清中DAO含量為(0．73±0．95)u／ml，較B組明顯下降(尸<0．01)。E組血清中DAO含量為(0．49±0．83)u／ml，較C組明顯下降(尸<0．01)。