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《殼寡糖對大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文殼寡糖對大鼠腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用中文摘要目的:通過建立大鼠輕度和重度腸缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷模型,探討殼寡糖對I/R損傷腸黏膜屏障功能的保護(hù)作用及其可能的作用機制,為殼寡糖治療腸I/R損傷提供一定的實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。方法:選用40只清潔級雄性SD大鼠,體重250-3009。實驗動物隨機分為5組(每組8只):①A組:假手術(shù)組(僅分離腸系膜上動脈不夾閉);②B組:重度缺血再灌注組(夾閉腸系膜上動脈2h后再灌注2h);③C組:輕度缺血再灌注組(夾閉
2、腸系膜上動脈30min后再灌注30min);④D組:重度缺血再灌注+殼寡糖預(yù)處理組;⑤E組:輕度缺血再灌注+殼寡糖預(yù)處理組;A、B、C三組按lOml/kg體重生理鹽水灌胃,D、E兩組給予殼寡糖1500mg/kg體重灌胃,每日1次,連續(xù)5日,造模前30rain灌胃一次。所有動物術(shù)前12/J'.時禁食,自由飲水。大鼠常規(guī)腹腔注射麻醉,經(jīng)腹正中切口,暴露并分離腸系膜上動脈(superiormesentericartery,SMA),無損傷動脈夾夾閉其起始部,縫合切口,旁照燈保暖。在進(jìn)行S姒夾閉期間,間斷地向腹腔內(nèi)注射生理
3、鹽水,總量約15--一,20mi/kg體重以保持血流動力學(xué)穩(wěn)定。到達(dá)相應(yīng)時間點后經(jīng)原切口進(jìn)腹,取出動脈夾,恢復(fù)血供,依次關(guān)閉切口。假手術(shù)組進(jìn)行同樣操作但不夾閉腸系膜上動脈。實驗結(jié)束后立即抽取下腔靜脈血3ml,室溫放置15min后4℃下3000rpm離心15min,分離血清,-70℃保存?zhèn)溆?,待做DA0測定;取距回盲部lOam以內(nèi)的一部分腸標(biāo)本,用生理鹽水漂洗干凈,濾紙吸干,電子天平稱重,按每lg組織添2口PBSIOml的比例,低溫下用高速電動勻漿機勻漿30s后,立即4℃下3000rpm離,b30min后取上清液,-
4、70℃保存?zhèn)溆?,做SOD、MDA、御0測定。取小腸回盲部lOcm以上的腸管,經(jīng)冰生理鹽水漂凈,濾紙吸干,延腸管長軸切開,用玻片輕輕刮取腸黏膜部分,準(zhǔn)確稱取小腸黏膜組織,用PBS制成10%組織勻漿,低溫離心,取上清液,-70℃保存?zhèn)溆?,做SIgA測定。距回盲部lOam處取相同腸段1.Ocm,4%多聚甲醛固定,梯度酒精脫水,透明后石蠟包埋,待做切片。結(jié)果:1.假手術(shù)組大鼠腸絨毛完整,形態(tài)正常,上皮下間隙無擴(kuò)張;重度缺血再灌注模型組大鼠腸絨毛上皮頂端與固有層分離,腸絨毛頂端破裂,伴固有層毛細(xì)血管暴露、出血和潰瘍,固有層炎
5、性細(xì)胞增多;輕度缺血再灌注模型組較重度模型組病理改變輕。殼寡糖干預(yù)的輕度及重度I/R組腸絨毛病理改變分別較輕、重度I/n模型組明顯減輕,但仍可見腸絨毛頂端破裂,固有層出血和炎癥細(xì)胞浸潤。2溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2.缺血再灌注后,B組腸組織中SOD含量為(27.68±8.60)u/lOOmg。C組腸組織中SOD含量為(44.00_12.74)u/lOOmg,與A組假手術(shù)組腸組織中SOD含量為(85.88±6.95)u/lOOmg相比較,差異有顯著性(尺O.01)。D組腸組織中SOD含量為(45.58±7.26)u/1
6、00mg,較B組明顯增加(P<0.01)。E組腸組織中SOD含量為(65.39±6.37)u/lOOmg,較C組明顯增N(P7、8±0.49)nmol/mg,較C組明顯下降(尸<0.01)。4.腸缺血再灌注后,B組腸組織中MPO含量為(1.10±0.43)ng/mg,C組腸組中MPO含量為(O.83±0.46)ng/mg,與A組假手術(shù)組腸組織中MPO含量為(0.62±0.33)ng/mg相比較,差異有顯著性(尸8、為(O.86±0.10)u/ml,C組血清中DAO含量為(0.65±0.09)u/ml,與A組假手術(shù)組血清中DAO含量為(0.37±0.39)u/ml相比較,差異有顯著性(尸<0.01)。D組血清中DAO含量為(0.73±0.95)u/ml,較B組明顯下降(尸<0.01)。E組血清中DAO含量為(0.49±0.83)u/ml,較C組明顯下降(尸<0.01)。