不同寄主植物桑寄生總黃酮含量研究

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1、不同寄主植物桑寄生總黃酮含量研究李永華陳士林,盧棟,朱開昕,趙明惠,裴河歡,阮金蘭【摘要】目的考察不同寄主植物的桑寄生總黃酮含量。方法采用分光光度法測(cè)定寄生在16種不同寄主植物的桑寄生樣品的總黃酮含量,并用正交實(shí)驗(yàn)的方法研究比較了不同提取條件對(duì)桑寄生總黃酮提取率的影響。結(jié)果不同寄主植物的桑寄生莖枝的總黃酮含量為4.10~7.82mg/g,其中以桑樹為寄主的人工種植的桑寄生莖枝的總黃酮含量為最高;桑寄生葉總黃酮含量為18.33~32.08mg/g,其中以夾竹桃為寄主的桑寄生葉的總黃酮含量最高。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選的提取條件莖枝是A1B2C2D3,即桑寄生莖枝0.5g,乙醇濃

2、度為60%,超聲提取時(shí)間為30min,超聲提取溫度為45℃,料液比1∶25;葉是A2B1C2D3,即桑寄生葉0.5g,乙醇濃度為70%,超聲提取時(shí)間為20min,超聲提取溫度為45℃,料液比1∶25。結(jié)論桑寄生總黃酮含量因寄主植物不同,其總黃酮含量表現(xiàn)出一定的差異性。優(yōu)選的提取方法穩(wěn)定、可靠、簡潔,提取效率高?!娟P(guān)鍵詞】桑寄生;寄主;總黃酮  Abstract:ObjectiveToparethecontentsoftotalflavonoidsofHerbaTaxillifromdifferenthost-plants.MethodsThetotalflavonoi

3、dsofHerbaTaxillifromsixteenhost-plantsinedbyspectrophotometry,andtheextractionefficiencyoftotalflavonoidsentaldesigndifferenthost-plantsg/g,g/g,indicumMill.ConclusionThecontentsofthetotalflavonoidsofHerbaTaxillifromdifferenthost-plantsaredifferent.  Key波長范圍內(nèi)掃描,測(cè)得對(duì)照品與樣品的最大吸收波長為408nm左右?! ?/p>

4、2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備  精確稱取105℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品5.03mg,置10ml容量瓶中,加少量60%乙醇溶解后定容至刻度。精確吸取5ml于10ml容量瓶中,加60%乙醇稀釋至刻度,制成0.25mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)液。精確吸取標(biāo)準(zhǔn)液0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml,加60%乙醇稀釋至1.0ml,加0.1mol·L-1的三氯化鋁溶液2ml,0.1mol·L-1的醋酸鈉溶液1ml,搖勻,室溫放置20min,在波長408nm測(cè)吸收度。以吸收度A對(duì)濃度C作標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為A=0.2466C-0.0044,r為0.9998,表明在0.0063~0.0

5、63mg/ml之間呈良好的線性關(guān)系。  2.3總黃酮提取  工藝設(shè)計(jì)根據(jù)前期試驗(yàn)結(jié)果,選擇乙醇濃度(A)、提取時(shí)間(B)、提取溫度(C)、料液比(D)為實(shí)驗(yàn)因素。因素水平見表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。通過正交實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)處理發(fā)現(xiàn),影響桑寄生莖枝總黃酮提取率的因素主次順序?yàn)锳>B>C>D,最佳提取條件為A1B2C2D3,即乙醇濃度為60%,超聲提取時(shí)間為30min,超聲提取溫度為45℃,料液比1∶25;影響桑寄生葉總黃酮提取率的因素主次順序?yàn)锳>D>C>B,最佳提取條件為A2B1C2D3,即乙醇濃度為70%,超聲提取時(shí)間為20min,超聲提取溫度為45℃,料液比1∶25。表1提

6、取工藝參數(shù)設(shè)計(jì)(略)表2L9(43)提取工藝條件正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)  2.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)  精確吸取樣品溶液2ml,依法顯色20min后至100min內(nèi),在波長408nm,每隔10min測(cè)定1次吸收度。結(jié)果表明,顯色后室溫放置20~100min內(nèi),其吸收度穩(wěn)定,RSD為1.89%?! ?.5精密度實(shí)驗(yàn)  精確吸取樣品溶液2ml,依法顯色20min后,在波長408nm,重復(fù)測(cè)定6次,RSD為0.66%,表明儀器的精密度好?! ?.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)  精確吸取6份蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0ml,依法顯色后,測(cè)定吸收度,RSD為1.37%,表明本方法的重復(fù)性好。  2.7加樣回收率  

7、實(shí)驗(yàn)精確稱取已知含量的桑寄生0.5g,5份,分別加入一定量的蘆丁對(duì)照品,依法測(cè)定含量,平均回收率為98.32%,RSD為1.70%?! ?.8樣品制備與測(cè)定  分別稱取不同寄主的桑寄生莖枝、葉各0.5g,按照莖枝、葉的最佳提取條件進(jìn)行提取,每個(gè)樣品提取兩次,乙醇用量為12.5ml/次,離心分離,合并兩次提取液,提取液用石油醚萃取3次除去其它色素,用相同濃度的乙醇定容至25ml。精密吸取樣品液0.5ml,依法顯色測(cè)吸收度用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品總黃酮含量,每個(gè)樣品重復(fù)3次實(shí)驗(yàn),取平均值。結(jié)果見表3。表3不同寄主來源的桑寄生總黃酮含量(略)  3討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

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