腺苷及缺血后處理對兔缺血再灌注心肌的保護(hù)作用

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1、腺苷及缺血后處理對兔缺血再灌注心肌的保護(hù)作用作者：賀曉楠李淑梅王雪梅陳宇【摘要】目的探討腺苷對缺血再灌注后心肌的保護(hù)作用，及其與缺血后處理的關(guān)系。方法40只健康大耳白兔，隨機(jī)分為對照組、拮抗劑組、缺血后處理組、腺苷治療組4組，每組10只。制備在體兔心肌缺血再灌注模型，檢測心肌收縮功能指標(biāo)，測量心肌梗死范圍，觀察缺血再灌注即刻應(yīng)用腺苷及缺血后處理對兔缺血再灌注后心肌的影響。結(jié)果腺苷治療組和缺血后處理組與對照組和拮抗劑組相比，再灌注之后左室內(nèi)壓峰值、左室內(nèi)壓最大上升速率和左室內(nèi)壓最大下降速率的恢復(fù)率

2、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；梗死范圍均明顯低于對照組和腺苷受體拮抗劑組（P<0.01）；心肌酶學(xué)LDH和CK含量較對照組和腺苷受體拮抗劑組明顯降低（P<0.01）。結(jié)論腺苷/腺苷受體途徑是缺血后處理的重要途徑之一，能夠減輕缺血再灌注損傷，保護(hù)心肌?！娟P(guān)鍵詞】缺血再灌注損傷；缺血后處理；腺苷　動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)腺苷在心肌缺血再灌注損傷中具有保護(hù)作用，可以縮小梗死面積，改善左室功能以及增加冠脈血流〔1，2〕。腺苷的缺血預(yù)適應(yīng)作用已經(jīng)比較明了，而關(guān)于腺苷在缺血后處理〔3〕中的作用國內(nèi)外卻鮮

3、有報(bào)道，本研究旨在探討腺苷對缺血再灌注后心肌的保護(hù)作用及其與缺血后處理的關(guān)系?！　?材料與方法　　1.1材料　?。?）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康白兔40只,雄性,體質(zhì)量2.0～2.5kg（吉林大學(xué)動(dòng)物中心提供）。（2）藥物及主要試劑與儀器：25%烏拉坦（武漢博士德生物工程有限公司）；腺苷(adenosine，沈陽諾康醫(yī)藥有限公司)；8苯基茶堿(8phenyltheophylline,Sigma公司)；紅四氮唑(triphenyltetrazoliumchloride,TTC)（上?；瘜W(xué)試劑廠）；Evan

4、s藍(lán)（申邦科技貿(mào)易有限公司）；乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒，肌酸激酶（CK）試劑盒(上海申能德賽診斷技術(shù)有限公司)；DH140型動(dòng)物呼吸機(jī)（成都泰盟醫(yī)學(xué)儀器實(shí)驗(yàn)廠）；RM6280多導(dǎo)生理記錄和分析處理系統(tǒng)(成都儀器廠)；Olympus生物顯微鏡（日本）:FA2104電子天平（上海）；AP621G載波放大器（日本）；日立7060全自動(dòng)生化分析儀(日本)?！　?.2研究方法　　1.2.1動(dòng)物模型建立　　25%烏拉坦1g/kg(4ml/kg)經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉后，背位固定。用肝素鈉(1ml/kg

5、)抗凝，分離頸動(dòng)脈，6F導(dǎo)管經(jīng)頸動(dòng)脈插入左心室，聯(lián)接四導(dǎo)生理記錄儀，監(jiān)測左室內(nèi)壓，心電圖導(dǎo)聯(lián)線與兔四肢相聯(lián)接入心電放大器，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖。氣管切開，連接動(dòng)物呼吸機(jī)(潮氣量21ml，頻率50次/min)。除毛，剝離股靜脈以備靜脈給藥。沿胸骨正中做一長約5cm的切口，切開皮膚、皮下組織，暴露胸骨。于胸骨左緣切開肌肉組織，結(jié)扎止血，靠近胸骨左緣切斷3、4、5肋軟骨，用4號絲線結(jié)扎肋間血管，以甲狀腺拉鉤拉開肋軟骨，顯露胸腔。輕輕提起心包膜，用解剖剪縱行剪開，暴露心臟。用止血鉗將左心耳輕輕提起，找到

6、冠狀動(dòng)脈前降支。用持針器持心外科6.0的尼龍縫線，在冠狀動(dòng)脈前降支穿一線，用內(nèi)徑為0.5～0.8mm的硅膠管套線，束緊后在貼緊硅膠管的上端用止血鉗夾緊線，造成心肌缺血。心電圖出現(xiàn)明顯的ST段抬高。每次都由同一人完成這一操作。放松止血鉗，去掉硅膠管，抽出結(jié)扎線，原來結(jié)扎血管再通，缺血再灌注模型建立?！　　　?.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組　　將40只白兔按體質(zhì)量編號后，按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為4組，每組10只。（1）對照組：缺血40min,再灌注120min。（2）拮抗劑組：:缺血前靜脈滴注（靜滴）非特異性腺苷

7、受體拮抗劑8苯基茶堿30ml(10mg/kg)，持續(xù)30min，余下步驟同缺血后處理組。（3）缺血后處理組：缺血40min，再灌注2min，缺血2min，再灌注3min，缺血2min，再灌注5min，缺血2min，再灌注7min，缺血2min，然后再灌注95min。（4）腺苷治療組：缺血40min，再灌注120min，缺血再灌注即刻靜滴腺苷30ml(0.3mg/min),30min內(nèi)滴完。拮抗劑組缺血前靜滴8苯基茶堿30ml，其余組缺血前靜滴生理鹽水30ml作為平衡對照；腺苷治療組缺血再灌注

8、即刻靜滴腺苷30ml，其余組缺血再灌注即刻靜滴生理鹽水30ml作為平衡對照?！　?.2.3指標(biāo)檢測　　(1)心肌收縮功能指標(biāo)記錄和測量：通過壓力換能器在記錄儀上描記心電圖，左室內(nèi)壓(LVP)曲線以及左室內(nèi)壓峰值(LVSP)，將LVP電信號輸入微分器描記左室dp/dt曲線和正負(fù)dp/dtmax。所有圖形數(shù)據(jù)存入RM6280分析處理系統(tǒng)中進(jìn)行處理。(2)心肌梗死范圍的測量：于實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)將左前降支重新阻塞，從左心室導(dǎo)管內(nèi)推注2%Evans藍(lán)3～4ml，2min后迅速剪下心臟，分離缺血區(qū)(無藍(lán)色)和非缺血